粉防己碱对胃癌细胞MGC 803的增殖抑制作用及其机制研究

发布时间：2017-10-16 20:37

  本文关键词：粉防己碱对胃癌细胞MGC 803的增殖抑制作用及其机制研究

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【摘要】：背景胃癌是最常见的恶性消化道肿瘤之一,虽然全世界范围内胃癌的发病率有下降的趋势,然而,在大多数亚洲国家胃癌的发病率依然高居不下。我国是胃癌的高发地区之一,胃癌在恶性肿瘤中发病率占第二位,死亡率占第三位,严重影响着我国人民的生活质量。因此,胃癌的防治依然是我国亟待解决的医疗问题。化疗是胃癌治疗的重要手段,主要用于不适宜手术的患者以及术后防治复发。然而由于胃癌发病机制的复杂性以及化疗药物的严重不良反应和耐药性的产生,化疗的效果受到了严重的影响。因此,寻找显著疗效的化疗药物仍具有重要的意义。近年来,粉防己碱作为化疗药物在肿瘤治疗中的应用逐渐被大家所关注。目的本文以粉防己碱为研究对象,研究粉防己碱对体外培养的人胃癌细胞株MGC803的抑制作用及其机制,探讨粉防己碱在胃癌化疗中的作用。方法MTT法考察粉防己碱对胃癌细胞株MGC 803的增殖抑制作用并计算半数抑制浓度(IC50);结晶紫染色法考察粉防己碱对胃癌细胞株MGC 803形成克隆能力的影响；Hoechst 33258染色法观察粉防己碱处理MGC 803细胞后细胞核的形态；利用AnnexinV-FITC/PI染色法,流式细胞仪检测粉防己碱对胃癌细胞株MGC 803细胞凋亡的影响；PI染色法,流式细胞仪检测粉防己碱对胃癌细胞株MGC 803细胞周期分布的影响；JC-1荧光染色法考察粉防己碱对胃癌MGC 803细胞线粒体膜电位的影响；DCFH-DA荧光探针染色法检测粉防己碱对胃癌细胞株MGC 803细胞内活性氧含量的影响；Transwell法考察粉防己碱对胃癌细胞株MGC 803细胞的迁移能力的影响；Western blot分析粉防己碱对胃癌MGC 803细胞体外抑制作用的机制。结果(1)MTT结果显示,粉防己碱在体外能抑制人胃癌MGC 803细胞的增殖并呈时间和浓度依赖性。(2) 克隆形成实验结果显示,粉防己碱抑制胃癌MGC 803细胞的单细胞增殖能力。(3)Hoechst 33258染色结果显示,粉防己碱处理胃癌MGC 803细胞后,随着药物浓度的增大,细胞核逐渐出现固锁、浓染的现象,预示着凋亡的发生。(4)流式细胞术结果显示,粉防己碱能浓度依赖性地诱导胃癌MGC 803细胞发生凋亡。(5)流式细胞术结果显示,粉防己碱诱导了胃癌MGC 803细胞发生G2/M期周期阻止并具有浓度依赖性。(6) JC-1染色结果显示,粉防己碱处理导致了胃癌MGC 803细胞线粒体膜电位的下降。(7) DCFH-DA染色结果显示,粉防己碱处理后胃癌细胞MGC 803细胞内的活性氧含量上升。(8) Transwell结果显示,粉防己碱抑制了胃癌细胞MGC 803的迁移能力。(9) Western blot结果显示,粉防己碱作用于胃癌MGC 803细胞后,上调了p53、 Bax和cleaved-PARP的蛋白表达水平,下调了Bcl-2、N-cadherin的蛋白表达量。结论粉防己碱能抑制胃癌MGC 803细胞的增殖和迁移,可能是潜在的胃癌化疗药物。
【关键词】：粉防已碱 胃癌 凋亡 迁移 活性氧
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-31
• 结果31-42
• 讨论42-45
• 小结45-46
• 参考文献46-51
• 文献综述 粉防己碱研究进展51-61
• 参考文献57-61
• 攻读学位期间发表文章情况61-62
• 致谢62-63
• 个人简历63

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本文编号：1044786