蒿甲醚通过PPARγ信号通路抑制小鼠Lewis肺癌生长实验研究

发布时间：2017-10-22 17:29

  本文关键词：蒿甲醚通过PPARγ信号通路抑制小鼠Lewis肺癌生长实验研究

  更多相关文章： 蒿甲醚(ARE) 小鼠Lewis肺癌 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) Caspase-3 NF-κB

【摘要】：[目的]：大量研究发现青蒿素及其衍生物具有抗肿瘤活性,其与肿瘤的增殖、侵袭、转移,凋亡具有密切的关系,但其具体的抗肿瘤机制还有很多未知的方面。近年来,研究证实过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARy)亦与肿瘤的增殖、侵袭、转移等密切相关。为更广泛的探索青蒿素及其衍生物可能的抗肿瘤机制,本课题通过建立Lewis肺癌小鼠模型,探索青蒿素的衍生物蒿甲醚对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及抑制侵袭转移的效应,探讨其机制是否与PPARy通路调节NF-κB及Caspase-3的表达,从而抑制肿瘤新生血管生成,促进细胞周期阻滞及肿瘤细胞凋亡相关。为临床抗肺癌治疗及抗肿瘤药物的开发提供新靶点及实验基础。[方法]：1、建立小鼠Lewis肺癌模型：选LLC细胞及C57BL/6小鼠建立Lewis肺癌模型,按不同分组给药,分别为：①NS组(注射生理盐水90mg/kg)、②ARE组(注射蒿甲醚50mg/kg)、③GW9662组(注射PPARy特异性抑制剂GW96621mg/kg)、④GW9662+ARE联合组(先注射GW9662 30mi,再注射ARE,给药浓度均同前)；GW9662为PPARy的特异性抑制剂,可特异性的阻断PPARy的表达。2、观察各组小鼠的生存状态、体重变化、瘤体积变化；3、计算抑瘤率：肿瘤抑制率=[对照组瘤重—给药组瘤重]／[对照组瘤重]；4、病理学变化：取各组瘤组织10%甲醛固定,常规石蜡包埋、切片,HE染色,光镜观察；5、免疫组化：在14天治疗结束后取各组肿瘤组织进行免疫组化染色,检测各组瘤组织PPARy、NF-κB、caspase-3、CD31、VEGF表达情况；6、流式细胞术：流式细胞仪检测各组瘤组织细胞周期及凋亡率。7、RT-PCR法检测各组瘤组织中PPARγ、NF-κB、caspase-3 mRNA水平8、western blot法检测各组瘤组织中PPARγ、NF-κB、Caspase-3蛋白的表达水平9、数据统计和分析采用SPSS17.0软件包进行。数据以均数±标准差(x±s)表示,组间资料应用单因素方差分析(one way ANOVA)和t检验。[结果]：1.(1)ARE组能明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长(抑瘤率为64.51%)；(2) ARE+GW9662联合组对Lewis肺癌移植瘤有抑制作用(抑瘤率为45.14%)；(3)GW9662组对Lewis肺癌移植瘤无明显的抑制作用,其瘤组织大小与生理盐水组比较差异无统计学意义；2.病理学改变：各组HE染色均可见形态各异的肿瘤细胞,大小不一,细胞核增大,可见异形核,核膜增厚,核仁肥大,数目增多,核质比率失调,异常核分裂等。NS组及GW9662组除了可见肿瘤细胞典型形态外,瘤体中心还可见明显的大片出血坏死液化区,坏死区域内肿瘤组织中有明显的血细胞浸润。此外生理盐水组GW9662组均有远处侵袭转移,生理盐水组可见明显的肌肉侵犯,而GW9662组也可见骨骼肌侵犯。ARE组及ARE+GW9662联合组未见明显远处侵犯,均可见凋亡的肿瘤细胞,尤以ARE组明显；3.免疫组化：ARE组及联合组PPARy阳性表达较NS组明显增加,GW9662组则为阴性；GW9662组NF-κB阳性表达明显较其它各组高,而ARE组及联合组均较NS组降低；GW9662组及NS组CD31阳性表达较联合组及ARE组明显；VEGF在GW9662组及NS组阳性表达明显较其它两组高；Caspase-3在各组的阳性表达差异无意义；4.流式细胞术：ARE组及联合组均可见G0/G1期比例增加,S期比例减小,细胞凋亡率均增高。其中ARE组变化最明显。5. RT-PCR结果：PPARy mRNA表达水平：ARE组联合组NS组GW9662组；NF-κB mRNA:GW9662组联合组NS组ARE组；Caspase-3 mRNA在各组的表达水平差异无统计学意义；6. Western blot结果:PPARγ蛋白：ARE组联合组NS组GW9662组；NF-κB蛋白：GW9662组联合组NS组ARE组；各组的Caspase-3蛋白水平差异无统计学意义。[结论]：1.ARE可通过抑制血管生成抑制Lewis肺癌移植瘤的生长；2.ARE可通过G0/G1期阻滞,降低S期比例,促进肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤组织生长；3.ARE通过上调PPARγ表达,下调NF-κB抑制Lewis肺癌移植瘤增殖和侵袭。
【关键词】：蒿甲醚(ARE) 小鼠Lewis肺癌 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) Caspase-3 NF-κB
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 主要中英文缩略词表5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-14
• 前言14-20
• 材料与方法20-37
• 结果37-48
• 讨论48-53
• 结论53
• 本课题研究的创新性53
• 本课题进一步的研究问题53-54
• 参考文献54-59
• 综述59-66
• 参考文献62-66
• 在读期间发表文章情况66-67
• 致谢67

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 任黔川;彭芝兰;谭欣;;PPARγ在卵巢浆液性囊腺癌中的表达[J];重庆医学;2009年23期

2 张乾勇;PPAR的结构与功能及其生物学作用[J];国外医学(卫生学分册);2000年05期

3 白玉杰,牛丹,赵锦荣,张文红,吕贯廷,阎小君;Rapid detection of PPAR_γ gene Pro12Ala polymorphism with fluorescence polarization in Chinese population[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2003年03期

4 袁平戈;PPARα的主要功能是什么[J];中华肝脏病杂志;2003年05期

5 潘光栋;PPAR-γ及其配体在人体细胞的分子研究[J];职业卫生与病伤;2003年02期

6 曹廷兵,叶治家,彭家和,巩燕,黄刚;人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化[J];第三军医大学学报;2004年01期

7 王刚,陈继俊,倪沛洲;PPARα受体亚型与新药研究[J];药学进展;2004年01期

8 叶平;过氧化体增殖物激活型受体(PPAR)与心血管疾病[J];中华心血管病杂志;2004年07期

9 孙曙光,周智广;PPARγ与1型糖尿病[J];国外医学.内分泌学分册;2005年02期

10 胡桂芳,武革;PPARγ与2型糖尿病大血管病变的研究进展[J];广东医学院学报;2005年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 ;Genetic polymorphisms of PPAR-γ,HHEX,PTPRD,KCNQ1,and SRR affect therapeutic efficacy of Pioglitazone in Chinese Patients with type 2 diabetes[A];传承与发展，创湖南省生理科学事业的新高——湖南省生理科学会2011年度学术年会论文摘要汇编[C];2011年

2 ;Dynamic analysis and ligand binding affinity investigation of PPAR mutations[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年

3 童南伟;;过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)a与脂质代谢[A];全国首届代谢综合征的基础与临床专题学术会议论文汇编[C];2004年

4 王伟铭;章慧娣;刘峰;陈佳韵;陈楠;;PPARγ活化对肾间质成纤维细胞的作用研究[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年

5 陈刚;林新富;梁继兴;林丽香;沈晓丽;;过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因多态性与老年男性骨质疏松症相关性研究[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年

6 陈刚;林新富;梁继兴;林丽香;沈晓丽;;过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因多态性与老年男性骨质疏松症相关性研究[A];2008中国医师协会内分泌代谢科医师分会年会论文汇编[C];2008年

7 李洁;戴爱国;胡瑞成;朱黎明;王梅芳;;PPARγ影响γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性及表达在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年

8 管又飞;;脂质过氧化物体增殖物激活受体γ(PPAR γ)与糖尿病肾病[A];中华医学会肾脏学分会2004年年会暨第二届全国中青年肾脏病学术会议专题讲座汇编[C];2004年

9 孙莉;尚进林;梁浩;程焱;;PPAR全激动剂对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年

10 ;Endothelial PPARγmediates anti-inflammatory actions of rosiglitazone through dissociation of NF-κB[A];中国生理学会心血管生理学术研讨会论文集[C];2011年

中国重要报纸全文数据库 前3条

1 徐铮奎;发现PPAR拮抗剂[N];医药经济报;2012年

2 曾凡新邋林敏;PPAR激动剂类抗糖尿病药研发喜忧参半[N];中国医药报;2007年

3 袁松范;开发PPAR多通道激动剂须谨慎[N];中国医药报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 刘炳婷;SUMO特异性蛋白酶1调控脂肪形成的作用及分子机制[D];上海交通大学;2014年

2 陈宏;巨噬细胞PPARγ对皮肤伤口愈合的作用研究[D];第三军医大学;2015年

3 韩晶;PPARγ在脑缺血再灌注损伤和过氧化氢损伤中的调控机制研究[D];天津医科大学;2014年

4 张岩;PPARα/γ信号通路在高脂性脂肪性肝炎发病机制中的作用研究[D];苏州大学;2015年

5 张鸥;阿托伐他汀对动脉粥样硬化患者外周血中PPAR γ的作用研究及相关炎症因子与动脉粥样硬化关系的建模分析[D];郑州大学;2016年

6 周毅;PPARγ介导的抗氧化机制在血管平滑肌细胞表型转化中作用和机制研究[D];第三军医大学;2016年

7 滕志朋;PPARβ/δ在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用及其机制研究[D];重庆医科大学;2016年

8 佟强;PPARβ/δ激活在帕金森病中的保护作用及机制研究[D];南京医科大学;2016年

9 王伶;高静水压刺激对血小板活化的影响及PPARγ的保护作用的研究[D];南昌大学;2008年

10 孙晶;PPARγ1对系膜细胞外基质生成的抑制作用及其机制[D];复旦大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 曹智丽;过氧化物酶增殖物激活受体α（PPARα）在大鼠酒精性肝病发生过程中的变化[D];河北医科大学;2015年

2 宋石;miR-27a通过靶向调控PPARγ对酒精诱导大鼠BMSC分化的影响[D];郑州大学;2015年

3 邹佳楠;PPAR-γ在IgA肾病发生中的作用及其机理研究[D];复旦大学;2014年

4 李春梅;家兔PPARγ和MYF5基因多态性及其与部分经济性状的关联研究[D];四川农业大学;2014年

5 李晓鹏;脑胶质瘤中PPARγ、Bcl-2基因表达水平及临床意义[D];大连医科大学;2015年

6 李晋福;慢病毒介导PPAR-γ基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭性的影响[D];山西医科大学;2016年

7 徐颖;EGFR/MDM2信号通过PPARγ降解途径促进NFκB激活[D];江苏大学;2016年

8 高家明;PPARα/Bcl2信号诱导细胞凋亡[D];江苏大学;2016年

9 冷银芝;低剂量双酚A通过PPARγ促进小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化的研究[D];安徽医科大学;2016年

10 朱梦;妊娠期糖尿病胎盘PPARγ水平及其对新生儿体脂的影响[D];安徽医科大学;2016年

，

本文编号：1079379