SCIN在胃癌干细胞自我更新及侵袭转移中的作用

发布时间：2017-10-22 17:40

  本文关键词：SCIN在胃癌干细胞自我更新及侵袭转移中的作用

  更多相关文章： 胃癌 SCIN 肿瘤干细胞 自我更新 侵袭转移

【摘要】：胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,发病率及致死率均较高,严重危害着人类的健康,高发于东欧、东亚和南美等地区。近年的流行病学调查结果显示,胃癌的死亡率位于恶性肿瘤相关死亡原因的第二位。尽管各种各样的治疗方法均在逐步完善,包括手术治疗、化学治疗和生物治疗等,但这并未使患者的远期生存率得以显著延长,最根本的原因主要还是因为胃癌侵袭转移的生物学特性,而我们对于胃癌侵袭转移的机制的认识仍不够深入。因此,加深对其机制的探讨是当前研究最紧迫的主题。肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)这一新近理论的提出,使研究者们在深入研究胃癌发生发展的道路上打开了新思路。之前,我们小组已通过无血清成球培养的方法成功分离/富集胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs),并证明其拥有高度的自我更新和侵袭转移能力,说明GCSCs是胃癌自我更新及侵袭转移的细胞学基础。前期我们通过基因表达谱芯片分析发现,与普通胃癌贴壁细胞比较,GCSCs中与细胞形态和运动功能密切相关的肌切蛋白(scinderin,SCIN)表达显著上调。因此,我们进一步研究了SCIN在GCSCs自我更新及侵袭转移中的作用及可能存在的分子机制,并且探讨了SCIN在胃癌标本中表达水平的临床意义。我们的结果提示SCIN可望为胃癌诊疗提供新的标志物和靶点。主要研究方法、结果及结论如下:1.SCIN在胃癌组织中的表达及其临床意义(1)采用免疫组化染色法检测188例胃癌标本中SCIN表达,发现56%(105/188)的胃癌标本中SCIN呈高表达,其表达水平与患者的年龄(P=0.840)、性别(P=0.220)和肿瘤细胞分化程度(P=0.483)无显著相关性,而与肿瘤的浸润深度(P=0.011)及是否存在淋巴结转移(P=0.024)密切相关。(2)采用Kaplan-Meier方法计算患者生存率与SCIN的相关性,结果显示SCIN高表达的患者预后较SCIN低表达者差(P0.001),提示SCIN可以作为判断胃癌患者预后的指标。2.沉默SCIN抑制胃癌干细胞的自我更新能力(1)应用q RT-PCR和Western blot技术,我们选择了在胃癌细胞中SCIN表达较高,且与胃癌干细胞比较其表达有显著差异的胃癌细胞系MGC803和原代细胞XN0422,进一步构建慢病毒稳定干扰SCIN基因表达的细胞。(2)与对照组(mock)细胞相比,SCIN沉默后,细胞的平板克隆形成能力、成球能力及裸鼠皮下成瘤能力均受到一定程度的抑制(P0.05)。3.沉默SCIN抑制胃癌细胞的侵袭转移能力(1)应用活细胞工作站观察细胞的迁移能力,Transwell-matrigel侵袭实验检测细胞的侵袭能力,结果显示,SCIN沉默后,细胞的迁移能力和侵袭能力均受到显著抑制。(P0.05)(2)通过裸鼠皮下成瘤实验和腹腔转移实验检测SCIN沉默对胃癌细胞在体内侵袭转移能力的影响,结果显示,虽然SCIN敲低与否均能形成皮下移植瘤并发生腹腔转移,但与对照相比,SCIN敲低细胞形成的移植瘤体积显著减小且重量明显减轻,此外,腹腔转移瘤数目显著少于对照组,MGC803和XN0422 mock细胞转移瘤数分别为19.67±2.33和32.67±4.74,SCIN敲低细胞的转移瘤数分别为10.00±1.29和15.83±2.00,P0.05。本文的主要结论如下:SCIN的表达水平与胃癌患者的生存期呈负相关,可用于判断临床预后;SCIN的表达降低可抑制胃癌干细胞的自我更新能力;SCIN的表达水平与胃癌的侵袭转移密切相关。
【关键词】：胃癌 SCIN 肿瘤干细胞 自我更新 侵袭转移
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 缩略览表4-5
• Abstract5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 SCIN在人胃癌组织中的表达及其临床意义12-19
• 2.1 材料与方法12-15
• 2.2 结果15-18
• 2.3 讨论18
• 2.4 小结18-19
• 第三章 肌切蛋白在胃癌干细胞自我更新中的作用19-36
• 3.1 材料与方法19-30
• 3.2 结果30-34
• 3.3 讨论34-35
• 3.4 小结35-36
• 第四章 肌切蛋白在调控胃癌细胞侵袭转移中的作用36-42
• 4.1 材料与方法36-38
• 4.2 结果38-40
• 4.3 讨论40-41
• 4.4 小结41-42
• 全文总结42-43
• 参考文献43-47
• 文献综述 肌切蛋白的研究进展47-52
• 参考文献50-52
• 攻读硕士期间撰写和发表论文情况52-53
• 致谢53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 Kang Li;Zeng Dan;Yu-Qiang Nie;;Gastric cancer stem cells in gastric carcinogenesis,progression,prevention and treatment[J];World Journal of Gastroenterology;2014年18期

2 吴姗;马晶晶;姜旖;马小玲;范文;程文俊;;卵巢上皮性癌中肌切蛋白的表达及其临床意义[J];实用妇产科杂志;2013年07期

3 Ismail Gomceli;Baris Demiriz;Mesut Tez;;Gastric carcinogenesis[J];World Journal of Gastroenterology;2012年37期

4 赖章超;宋鑫;;肌切蛋白的结构与功能多样性[J];中国生物化学与分子生物学报;2012年07期

，

本文编号：1079435