C35蛋白在辛伐他汀诱导人结肠癌细胞凋亡中的作用及其机制
发布时间:2017-10-23 18:17
本文关键词:C35蛋白在辛伐他汀诱导人结肠癌细胞凋亡中的作用及其机制
【摘要】:研究目的:结肠癌是消化道最常见的恶性肿瘤,在发达中国家中占所有恶性肿瘤的第三位,在我国虽然发病率并不是很高,但是随着生活条件的改变以及诊断技术的提高,我国结肠癌的发病率也在逐年增加。尽管结肠癌的早期诊断和治疗方法包括手术、放疗、化疗等治疗上有明显的提高,但患者的5年生存率仍然不足60%,死亡率仍在增加,找到新的有效的治疗方法至关重要。靶向治疗是目前新发现的新的治疗方法,其特异性的针对肿瘤细胞作用,对正常细胞影响较小,所以开发靶向治疗药物是一个新的研究方向。研究方法:1.选取人结肠癌细胞株LoVo及HT29进行培养。2.通过反转录方法、SDS-PAGE测定结肠癌细胞株中C35mRNA、蛋白是否表达。3.MTT法检测辛伐他汀的抑制作用。4.real-time PCR检测C35基因mRNA的表达。5.Westen blot检测C35蛋白用药前后表达差异。研究结果:1.反转录后测得C35基因在细胞株表达,并将所得产物纯化进行测序,结果通过与blast对比确定该表达的基因为C35基因。用全蛋白提取试剂盒提取结肠癌细胞蛋白,SDS-PAGE测得在12kDa处有蛋白表达。2.抑制率与时间和浓度呈正相关,随着时间的增长和浓度的增加,其抑制率也在逐渐增大。3.被辛伐他汀作用后细胞株中C35mRNA是未被作用的的1/8-1/20,说明被辛伐他汀作用后C35mRNA表达降低,结果具有显著地统计学意义。4.被辛伐他汀作用后细胞株中C35蛋白条带与未被作用的相比呈明显呈减弱趋势,相对蛋白灰度统计分析P0.05,说明被辛伐他汀作用后C35蛋白表达降低,结果具有统计学意义。研究结论:早期实验证明,C35mRNA、蛋白均在结肠癌中高表达,且在癌症的发生发展中起很重要的作用,是监测结直肠癌发生的一个新的重要靶点。辛伐他汀可以有效地作用于该靶点并使肿瘤细胞凋亡,给结肠癌的临床治疗提供了新的思路。
【关键词】:C35 结肠癌 辛伐他汀 治疗
【学位授予单位】:济南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R735.35
【目录】:
- 摘要6-8
- Abstract8-10
- 主要符号表10-11
- 前言11-15
- 第一部分 C35在结肠癌细胞株LOVO、HT-29中的表达15-31
- 1 材料与方法15-26
- 1.1 材料15-18
- 1.2 方法18-26
- 2 结果26-28
- 3 讨论28-31
- 第二部分 辛伐他汀对C35蛋白的抑制31-45
- 1 材料与方法31-40
- 1.1 材料31-33
- 1.2 方法33-40
- 2 结果40-42
- 3 讨论42-45
- 结论45-46
- 参考文献46-50
- 附录50-51
- 攻读学位期间取得的研究成果51-52
- 致谢52
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1 李敏;C35蛋白在辛伐他汀诱导人结肠癌细胞凋亡中的作用及其机制[D];济南大学;2016年
2 周鹏杰;C35水下不分散混凝土研制[D];安徽理工大学;2014年
,本文编号:1084706
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