改良细胞因子鸡尾酒诱导肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞疫苗抗肿瘤效应的体内研究

发布时间：2017-10-26 06:31

  本文关键词：改良细胞因子鸡尾酒诱导肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞疫苗抗肿瘤效应的体内研究

  更多相关文章： 树突状细胞疫苗 细胞毒性T淋巴细胞 细胞因子鸡尾酒 抗肿瘤效应 肺腺癌 TLR配体 裸鼠 免疫治疗

【摘要】：目的探讨不同细胞因子鸡尾酒诱导的树突状细胞(DC)疫苗对裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用。方法从38名外周血干细胞移植术供者的外周血中分离单个核细胞(PBMC),诱导成未成熟DC,将人肺腺癌细胞A549总RNA电转染入DC,分别用传统细胞因子鸡尾酒(IL-6、IL-1β、TNF-α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN)刺激DC成熟。致敏DC与自体T细胞混合培养,诱导产生抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),用流式细胞术鉴定T细胞表型,ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5和IL-10的分泌。建立肺腺癌A549荷瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、未成熟组、传统组和改良组(n=5),于肿瘤接种d15、d22、d29给予相应CTL治疗,测量肿瘤体积和重量,免疫组化法和Western blotting检测肿瘤组织COX-2、VEGF、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果1)CD3+CD8+T细胞表达率(%):未成熟组、传统组和改良组分别为35.00±3.24 vs 57.10±2.69 vs 63.98±1.96(P0.05);2)IFN-γ浓度(pg/mL):3组分别为160.12±42.01 vs 263.17±55.30 vs 1 034.30±253.07(P0.05);TNF-α浓度(pg/mL):3组分别为72.72±9.13 vs 65.20±8.03 vs 295.89±123.80(P0.05);IL-10浓度(pg/mL):3组分别为7.26±1.76 vs 31.06±4.19 vs 44.01±12.12(P0.05);3组IL-4、IL-5含量均未检测出,可见改良组T细胞分泌Th1型细胞因子IFN-γ和TNF-α的能力较未成熟组和传统组明显增强;3)经CTL免疫治疗后,裸鼠肿瘤体积(mm3):3组分别为512±33 vs 345±63 vs203±52(P0.05),且改良组抑瘤率最大,为69.62%;4)改良组DC诱导的CTL明显上调Bax的表达,下调COX-2、VEGF和Bcl-2的表达。结论改良细胞因子鸡尾酒诱导肺腺癌细胞总RNA转染的DC疫苗能诱导Th1型免疫应答及产生有效的抗原特异性CTL,对肺腺癌裸鼠移植瘤具有良好的抑制作用。
【作者单位】： 安徽医科大学附属安庆市立医院检验科;安徽医科大学附属省立医院检验科;
【关键词】： 树突状细胞疫苗 细胞毒性T淋巴细胞 细胞因子鸡尾酒 抗肿瘤效应 肺腺癌 TLR配体 裸鼠 免疫治疗
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81172172)
【分类号】：R734.2
【正文快照】： 树突状细胞(dendritic cells,DC)是目前发现的机体内功能最强大的专职抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APC),可高效地摄取、加工、处理和提呈抗原,具有强大的激活CD4+Th1型辅助性T细胞和细胞毒性T细胞(CTL)的能力,在免疫应答过程中发挥重要作用[1]。近年来,以DC为基础

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 金娟;王保龙;完晓菊;叶书来;陈家萍;应美爱;王敏;蔡秋妍;;人肺腺癌细胞总RNA电穿孔法转染的树突状细胞疫苗的体外抗肿瘤效应研究[J];中国输血杂志;2011年05期

2 周志风;王保龙;魏静;蔡秋妍;潘健;陈家萍;应美爱;沈佐君;李庆;黄琼;罗朋;;Toll样受体信号通路在调控树突状细胞成熟中的作用研究[J];中国输血杂志;2014年05期

3 程娟;王涛涛;唐伟;姚余有;;慢性复合应激致老年小鼠学习记忆损伤及机制研究[J];安徽医科大学学报;2013年12期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 蔡秋妍;王保龙;金娟;陈家萍;叶书来;应美爱;完晓菊;魏静;;肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞诱导特异性CTLs的体内抗肿瘤效应研究[J];中国输血杂志;2012年04期

2 赵利国;戴敏;李芬;陈正堂;;树突状细胞在肿瘤中的作用[J];重庆医学;2012年11期

3 田蓉;李巍;于继云;刘玉峰;;小鼠树突状细胞的体外培养与鉴定[J];第四军医大学学报;2006年10期

4 奚正德;张冬青;;类风湿性关节炎中血管新生机制及临床价值[J];国外医学(内科学分册);2006年07期

5 张龙辉;赵玲;杨鹰;;舒林酸下调COX-2和乙酰肝素酶对内皮祖细胞迁移趋化能力的影响[J];第三军医大学学报;2014年04期

6 齐平;靳颖华;张为革;宋宏锐;;分子靶点抗肿瘤药物研究进展[J];中国医药导刊;2014年02期

7 曾毅;黄凯;陈夏;;肿瘤相关淋巴细胞浸润在乳腺癌新辅助化疗疗效评估中的作用[J];福建医药杂志;2014年03期

8 周志风;王保龙;魏静;蔡秋妍;潘健;陈家萍;应美爱;沈佐君;李庆;黄琼;罗朋;;Toll样受体信号通路在调控树突状细胞成熟中的作用研究[J];中国输血杂志;2014年05期

9 甘志明;汪晓东;吕东昊;刘丹;李立;;围手术期免疫调节治疗对直肠癌术后复发的影响[J];南方医科大学学报;2015年04期

10 彭丹;王洪武;;树突状细胞在抗肿瘤免疫中的研究进展[J];临床肺科杂志;2012年08期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 孙擎;分泌型多肽TAT-CT3-cMyc对白血病HL-60细胞的生长调节[D];第二军医大学;2011年

2 黄宗堂;重组人FLT-3配体胞外区在毕赤氏酵母中的表达与鉴定[D];天津医科大学;2002年

3 孙跃明;IL-2基因修饰的树突状细胞免疫治疗肝癌的实验研究[D];南京医科大学;2004年

4 张利旺;全细胞性肿瘤抗原以不同方式负载树突状细胞诱导肝癌特异性T细胞反应的实验研究[D];第四军医大学;2006年

5 盘鹰;负载EBV-LMP2基因人树突状细胞疫苗的制备及抗肿瘤免疫研究[D];汕头大学;2006年

6 尹小川;超抗原联合树突状细胞诱导抗肺癌免疫反应的实验研究[D];昆明医学院;2007年

7 廖博;骨肉瘤相关抗原的免疫学筛选及其生物信息学分析[D];第四军医大学;2009年

8 方芳;重组MUC1-MBP融合蛋白疫苗抗肿瘤作用机制研究[D];吉林大学;2010年

9 马艳苗;风湿宁胶囊对胶原诱导性关节炎大鼠的治疗作用及机制研究[D];湖北中医药大学;2013年

10 颜娟;大黄酚脂质体对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及机制研究[D];河北医科大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张建芳;树突状细胞的体外培养及其与超抗原联合诱导抗肺癌免疫反应[D];第四军医大学;2001年

2 廖博;人骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库的构建和鉴定[D];第四军医大学;2004年

3 成芳;人外周血树突状细胞的体外分离、培养和表型鉴定[D];新疆医科大学;2004年

4 叶秀峰;不同分化程度脑星形细胞瘤微血管形成的意义及机制研究[D];重庆医科大学;2006年

5 宋文惠;冻融抗原负载的树突状细胞抗子宫内膜癌的体内研究[D];河北医科大学;2007年

6 王聪华;关于CD147分子上调类风湿关节炎滑膜中VEGF表达的研究[D];第四军医大学;2007年

7 洪玮;E26转录因子-1在大肠癌中的表达及意义[D];华中科技大学;2006年

8 李坤;人可溶性CD83基因的克隆、原核表达、纯化及其融合蛋白活性检测[D];第四军医大学;2008年

9 明飞;CP-690550对小鼠心脏移植后急性排斥反应的实验研究[D];遵义医学院;2009年

10 董云;VEGF、COX-2和MMP-9在NPC中的表达及其临床意义[D];广西医科大学;2010年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 金娟;王保龙;完晓菊;叶书来;陈家萍;应美爱;王敏;蔡秋妍;;人肺腺癌细胞总RNA电穿孔法转染的树突状细胞疫苗的体外抗肿瘤效应研究[J];中国输血杂志;2011年05期

2 王敬慧;时广利;张树才;王群慧;杨新杰;李曦;王海永;张卉;宋长兴;;血清TPS、CEA、Pro-GRP和CYFRA21-1水平在肺癌患者中的临床意义[J];中国肺癌杂志;2010年05期

3 祁慧薇;范理宏;;PI3K/Akt/mTOR信号转导通路与非小细胞肺癌[J];中国肺癌杂志;2010年12期

4 张亚楠;王玉其;陈亚静;李亚;;慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内GDNF的影响[J];曲阜师范大学学报(自然科学版);2011年01期

5 姚余有;吴庆四;姬艳丽;;地塞米松和淀粉样β蛋白联合作用致大鼠学习记忆能力下降[J];中国药理学与毒理学杂志;2011年02期

6 孙梯业;颜伟;刘全达;张娜;贾洪琳;段伟宏;周宁新;;CpG ODN增强树突状细胞对胃癌细胞增殖周期和凋亡影响的实验研究[J];中华临床医师杂志(电子版);2011年01期

7 ;Bone marrow-derived dendritic cells pulsed with tumor lysates induce anti-tumor immunity against gastric cancer ex vivo[J];World Journal of Gastroenterology;2008年46期

8 任利翔;罗轶凡;高威;白艳梅;宋少江;吴英良;;知母总皂苷对慢性温和应激小鼠的保护作用及机制研究[J];中药新药与临床药理;2011年04期

9 樊彩妮;汤荟冬;陈生弟;;β-淀粉样蛋白前体降解产物对阿尔茨海默病致病作用的研究进展[J];中国现代神经疾病杂志;2010年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 冼励坚,潘启超;细胞因子及其在肿瘤学中的应用(讲座)[J];现代诊断与治疗;1993年04期

2 余庆荣;急性髓细胞白血病患者强烈化疗后细胞因子对感染的反应[J];国外医学.输血及血液学分册;1995年05期

3 章小平,杨红枚,鲁功成,李文鑫,刘辉;三种细胞因子对恶性肿瘤多药耐受影响的实验研究[J];同济医科大学学报;2000年05期

4 黄萍萍;唐德q，

本文编号：1097461