循环肿瘤细胞的捕获及胞内雌激素受体检测探针的设计与合成

发布时间：2017-11-04 09:24

  本文关键词：循环肿瘤细胞的捕获及胞内雌激素受体检测探针的设计与合成

  更多相关文章： 循环肿瘤细胞 留置针 双色纳米荧光探针 上皮细胞粘附分子抗体 纳米金

【摘要】：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类健康[1,85]。近年来，随着生活水平的提高，乳腺癌已成为导致女性死亡的主要原因[2]，每年全球新发病患者将近百万，而且其发病年龄呈年轻化趋势，肿瘤早期发现和诊断对肿瘤的治愈率至关重要。循环肿瘤细胞（Circulation tumor cells，CTCs）是导致肿瘤转移及复发的主要原因，存在于患者外周血中[3]，，随着血液循环进入身体各处。检测体内CTCs对于发现和预防肿瘤的发生有重要意义[82-84]，一旦CTCs滞留在身体某处，在环境适合生长的条件下，易形成病灶[86]。肿瘤传统的诊断方法往往副作用大，造成身体的二次伤害，因此开发快速、高效、伤害小的诊断方法尤为必要。 论文建立了一种基于留置针输液过程的CTCs在体捕获方法。这种方法的优点是：对CTCs的捕获不需要通过额外取血，在输液过程中就可以完成，对患者伤害较小，容易被患者接受，且灵敏度较高。本文设计并合成了一种可同时检测CTCs内两种雌激素受体亚型的双色纳米荧光探针，并对合成的双色纳米探针进行了表征与鉴定。本论文主要分为四个部分，内容如下： 第一章主要涵盖了乳腺癌及循环肿瘤细胞的概述、循环肿瘤细胞体外捕获和在体捕获的研究进展、雌激素受体的概述、纳米金及纳米金探针在检测方法中的应用等内容。 在第二章建立了一种基于留置针输液过程的CTCs在体捕获方法。可成功捕获注射到野生鼠、兔子及裸鼠静脉中的DAPI标记MCF-7细胞。注射到裸鼠静脉5个细胞时，可成功捕获2个，由裸鼠血液总量计算得出最低捕获及检出限为1个细胞/mL血液。此方法有效避免了CTCs分布不均匀造成的体外捕获检测方法的取样误差，提高了分析的准确度和灵敏度。此捕获操作是伴随输液过程同时进行的，不会引起额外的身体损伤，容易被患者接受。这种简单、快速、损伤小的在体捕获方法可随着留置针的广泛应用而普及。 第三章设计并合成了用于雌激素受体检测的双色纳米荧光探针。带有荧光染料标记的DNA双链与纳米金进行组装，组装完成后，DNA链上的荧光会被纳米金猝灭。双色纳米荧光探针通过碱基互补配对与目的基因相结合，将荧光链竞争下来，荧光恢复。 第四章对本文建立的CTCs捕获方法和双色纳米荧光探针的设计与合成进行了总结。利用留置针可以有效捕获体内的CTCs，且操作简单、方便快捷、损伤较小。双色纳米荧光探针灵敏度高，有良好的核酸酶稳定性和生物亲和力，具有较大的应用前景。
【学位授予单位】：山东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9;O657.3

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 孙桂英;雌激素受体的变异及其临床意义[J];国外医学.妇产科学分册;1999年03期

2 赵静;崔勇霞;易成;;免疫组化技术在肿瘤学中的应用[J];华西医学;2006年01期

3 赵聪;李贻昆;徐睿;梁纯;刘大渔;马薇;PIYAWATTANAMETHA Wibool;ZOHAR Yitshak;;基于微流控技术在流体动力载荷下分离循环肿瘤细胞(英文)[J];力学进展;2014年00期

4 赵晓民,徐小明;雌激素受体及其作用机制[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2004年12期

5 李帅;刘晓强;;循环肿瘤细胞的检测[J];医学综述;2010年06期

6 赵洪猛;张斌;汤小川;曹旭晨;;乳腺癌循环肿瘤细胞研究及其检测进展[J];中国肿瘤临床;2009年15期

7 Hui-Ying Liu;Hai-Hua Qian;Xiao-Feng Zhang;Jun Li;Xia Yang;Bin Sun;Jun-Yong Ma;Lei Chen;Zheng-Feng Yin;;Improved method increases sensitivity for circulating hepatocellular carcinoma cells[J];World Journal of Gastroenterology;2015年10期

本文编号：1138815