HiPSC-MSCs来源Exosome促进部分肝切除后肝再生修复作用的研究

发布时间：2017-11-07 01:40

  本文关键词：HiPSC-MSCs来源Exosome促进部分肝切除后肝再生修复作用的研究

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【摘要】：肝脏是人体各种物质代谢、能量转换的枢纽器官。肝脏具有强大的再生能力,急、慢性创伤及各种肝脏外科手术后,残存的肝组织会进入快速且复杂的肝再生过程。如何更快更有效促进肝细胞再生以代偿受损肝功能仍是临床经常需面对的问题.既往研究表明,间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)具有其它干细胞类似的多分化潜能,且因它的低免疫源性,可作为治疗脑、心脏、肾、肝脏损伤修复的重要手段[1-4],然而,目前越来越多实验证实,干细胞影响组织损伤修复的主要机制是其产生及分泌的生物活性因子对损伤细胞代谢的干预作用。Exosome则是这些生物活性因子中最有治疗价值的因子之一[5]。在前期研究过程中,我们使用了HiPSC-MSCs来源的exosome在大鼠的肝脏缺血再灌注模型上进行了实验,结果证实了HiPSC-MSCs-Exo能够减轻大鼠缺血再灌注所致的肝组织损伤,并促进损伤肝组织的修复,但HiPSC-MSC-Exo能否促进肝切除术后肝脏再生及修复尚不清楚。目的:探讨多潜能干细胞诱导分化的间充质干细胞(HiPSC-MSCs)来源外泌体(exosome)对大鼠部分肝切除后肝脏再生及修复的作用。方法:分离、培养、鉴定HiPSC-MSCs,提取HiPSC-MSCs来源exosome,使用电镜观察并检测表面标记物表达。建立雄性大鼠70%肝切除模型,随机数字表法分为对照组及实验组。采用HE染色观察肝脏组织形态学改变,生物化学方法检测谷草转氨酶、谷丙转氨酶水平,Elisa法检测TNF-a及IL-6水平,流式细胞仪和免疫组化分别检测肝细胞周期和增殖细胞核抗原(PCNA)。结果:成功分离培养HiPSC-MSCs,成功诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞。成功提取exosome,透射电镜及表面标记物检测均符合,其表面标记CD9、CD63、CD81;大鼠的肝脏组织HE染色显示,实验组术后1d、3d时肝窦稍有扩张,较少的炎性细胞浸润,少有坏死,坏死程度轻于对照组;实验组术后1、3d时血ALT和AST水平较对照组明显降低,差异有统计学意义(P0.05);对照组术后1、3d时TNF-a及IL-6水平较实验组升高,差异有统计学意义(P0.05)。实验组术后1、3、5及7 d时肝细胞周期中S期细胞比例与对照组相比均明显增高(P0.05);残肝免疫组化显示实验组PCNA在术后1、3、5、7d表达水平明显高于对照组(P0.05)。结论:HiPSC-MSC来源exosome可减轻70%肝切除术后肝组织的损伤,促进残肝再生并改善肝功能。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.7

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1 韩淑媛;黄志强;刘永雄;于国;咎世明;张曙光;李晖;;大鼠肝部分切除后肝再生过程的动态观察[J];传染病信息;1995年02期

2 唐天勋,樊克武,井清源;大鼠肝、胰十二指肠联合切除对残肝再生的影响[J];南京医科大学学报;2002年01期

3 黄志刚,刘殿武;肝再生增强因子的研究进展[J];中国病理生理杂志;2002年05期

4 王阁;肝再生信号转录调控进展[J];国外医学(消化系疾病分册);2003年04期

5 赵利峰,徐存拴,王林嵩,章静波;调控肝再生的基因和生长因子的研究进展[J];解剖学报;2004年03期

6 许翠萍,韩德五,张杨,赵元昌,尹镭;肝部分切除大鼠肠源性内毒素血症与肝再生的关系[J];世界华人消化杂志;2004年12期

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本文编号：1150309