WNT5B过表达对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响

发布时间：2017-11-22 05:10

  本文关键词：WNT5B过表达对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响

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【摘要】：目的:本文旨在将WNT5B的过表达载体pcDNA3.1/WNT5B和空白对照载体pcDNA3.1分别同时转染人乳腺癌细胞MCF-7,通过Real-time PCR、Western blot、CKK8检测、流式细胞术等方法,分别在mRNA水平、蛋白水平、细胞的增殖、凋亡能力、周期分布情况等方面进行验证。得到WNT5B在人正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞株中的表达情况,及过表达WNT5B后对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响。探讨WNT5B在乳腺癌发生发展中的作用,并为乳腺癌靶向药物治疗提供新的研究思路。方法:将细胞分为对照组和实验组,采用CCK-8法和流式细胞术来检测实验组和对照组细胞的增殖、凋亡能力及周期分布情况;采用Real-time PCR法检测WNT5B mRNA表达水平;Western blot法检测WNT5B蛋白表达水平。结果:与正常乳腺上皮细胞相比,WNT5B在乳腺癌细胞中低表达;在乳腺癌细胞MCF-7中转染WNT5B表达质粒后,WNT5B表达上调,差异具统计学意义(P0.05);与对照组相比,过表达WNT5B后,过表达WNT5B的MCF7细胞生长明显慢于对照组细胞,表明细胞生长受到抑制,故MCF7细胞中WNT5B过表达,对细胞增殖具有抑制作用。且处于S期细胞的量明显增加,G1、G2/M期细胞的量明显减少,细胞凋亡比例明显增加,与对照组有明显差异,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:WNT5B在乳腺癌细胞中低表达;WNT5B过表达可使人乳腺癌细胞MCF-7阻滞在S期,抑制MCF-7的增殖,促进乳腺癌细胞凋亡。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9

【参考文献】

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本文编号：1213572