STAT3基因在乳腺癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响

发布时间：2017-11-26 07:01

  本文关键词：STAT3基因在乳腺癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响

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【摘要】：研究背景:乳腺癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤之一,在美国,乳腺癌是女性最常见的肿瘤且成为癌症死亡的第二大原因。在国内,占城市女性恶性肿瘤发病率第二位即为乳腺癌,一些大城市中已经上升为第一位[1]。乳腺癌的发生率和病死率近年来逐渐上升,在很大程度上影响着女性患者的生活质量,重者影响生命安全。乳腺癌是一个多因素、多突变积累的过程,其发病病因尚未清楚。乳腺癌目前常见的治疗方法包括外科手术、放射治疗、化学治疗。在肯定化疗效果的同时,我们不得不承认肿瘤细胞产生对化疗药物的耐药现象是乳腺癌治疗失败的重要原因。近年来对乳腺癌发生、发展及转移过程中相关蛋白的过度表达或异常激活的研究一直是该领域研究的热点。STAT3是信号转导子和转录激活子家族STATs中较为关键的成员之一,其存在于胞浆且能在激活后进入细胞核与DNA特异性结合,并介导多种生长因子和细胞因子向核内的信号转导。在正常的生理条件下,STAT3信号通路是受密切调节和控制的,但是研究发现多种人类肿瘤组织和细胞中存在STAT3的持续性激活。STAT3调控下游靶基因如Survivin、VEGF、Bcl-x L、Cycline D1、c-myc等的转录,并可促进肿瘤细胞的生长增殖、血管生成、侵袭转移和免疫逃逸等生理过程,因而其与肿瘤的发生发展密切相关[2]。STAT3在肿瘤细胞的异常增殖和恶性转化中起着关键作用[3],并间接诱导化疗耐药[4]。研究发现,化疗药物通常对STAT3信号通路异常激活的肿瘤细胞治疗效果较低,阻断该通路可能改善甚至逆转肿瘤细胞化疗耐药[5]。有关STAT3高表达可以引起细胞耐药,以及阻断该信号通路可以逆转耐药的研究已在不同癌症细胞株及组织样本的体外实验中得到验证,但STAT3在乳腺癌紫杉醇耐药细胞中是否异常表达及其在乳腺癌细胞耐药中的作用目前尚未见报道。本研究通过RNAi技术将STAT3-si RNA转染乳腺癌紫杉醇耐药细胞MCF-7/TR,下调STAT3的表达,观察STAT3下调对乳腺癌细胞化疗敏感性的影响。目的检测STAT3在人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/TR及其敏感细胞株MCF-7中的表达差异,探讨以STAT3基因为靶点的小分子干扰RNA是否能够逆转乳腺癌细胞对紫杉醇的化疗耐药。材料和方法1.采用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测STAT3 m RNA和蛋白在乳腺癌耐药和敏感细胞株中的表达差异。2.运用特异性STAT3-si RNA转染乳腺癌紫杉醇耐药细胞,RT-PCR和Western blot法检测转染后乳腺癌紫杉醇耐药细胞中STAT3的表达情况。3.MTT法检测STAT3-si RNA对乳腺癌紫杉醇耐药细胞生长的影响及其逆转耐药作用。4.采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析。计量数据以平均值±标准差(x±S)表示,两组数据间使用成组t检验,两组以上比较采用单因素方差分析。P0.05认为差异有统计学意义。结果1.STAT3 m RNA和蛋白在MCF-7/TR和MCF-7细胞中均存在高表达。STAT3 m RNA在MCF-7/TR细胞中的相对表达量明显高于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P0.05),STAT3蛋白在MCF-7/TR细胞中的表达量显著高于MCF-7细胞。表明STAT3在乳腺癌细胞中被激活,同时在紫杉醇耐药细胞株MCF-7/TR中的表达较敏感细胞株MCF-7明显升高。2.STAT3-si RNA转染组MCF-7/TR细胞较未转染组MCF-7/TR细胞相比,STAT3 m RNA水平明显下降,蛋白水平明显下降,差异有显著统计学意义(P0.05)。阴性对照组MCF-7/TR细胞较未转染组MCF-7/TR细胞相比,STAT3m RNA水平变化不明显,蛋白水平变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。表明si RNA能够有效而特异性地沉默STAT3基因,抑制STAT3蛋白的表达。3.MTT结果显示,与空白对照组MCF-7/TR和非特异性si RNA转染组MCF-7/TR-Sc-si RNA细胞相比,MCF-7/TR-STAT3-si RNA细胞的生长受到明显抑制。MCF-7/TR-STAT3-si RNA细胞对紫杉醇的IC50为(0.023±0.004)μmol/L,与空白对照组MCF-7/TR(0.159±0.018)μmol/L、非特异性si RNA转染组(0.146±0.010)μmol/L相比,差异有统计学意义(P0.05);非特异性si RNA转染组与空白对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结果表明STAT3-si RNA对乳腺癌细胞具有抑制作用,同时可增加化疗药物的抗肿瘤作用,并对紫杉醇耐药乳腺癌细胞有逆转耐药作用。结论1.STAT3基因在乳腺癌紫杉醇耐药细胞中的表达明显升高,STAT3基因表达与乳腺癌紫杉醇耐药存在相关性。2.靶向STAT3基因的RNA干扰能够增强肿瘤化疗药物的疗效,有效逆转乳腺癌紫杉醇耐药细胞对紫杉醇的耐药性。3.STAT3基因具有作为乳腺癌基因治疗靶点的潜在价值。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9

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2 辛君;乳腺癌扩散基因“浮出水面”[N];大众卫生报;2009年

3 王乐　沈基飞;我科学家发现导致乳腺癌耐药的新标志物[N];科技日报;2011年

4 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年

5 通讯员 王乐　沈基飞;乳腺癌耐药新标志物被发现[N];光明日报;2011年

6 伊遥;乳腺癌药新旧交替[N];医药经济报;2012年

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3 何文山;细胞周期蛋白E同乳腺癌的预后及分子靶向治疗相关性的实验研究[D];华中科技大学;2007年

4 王s，

本文编号：1228912