下调MAEL和上调CDH1基因表达抑制肝癌HepG2细胞的迁移和增殖研究

发布时间：2017-12-07 23:28

  本文关键词：下调MAEL和上调CDH1基因表达抑制肝癌HepG2细胞的迁移和增殖研究

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【摘要】：目的:本文旨在联合下调MAEL和上调CDH1基因的表达研究其对肝癌Hep G2细胞迁移、侵袭和增殖的作用。方法:通过转染试剂,靶向MAEL基因的si RNA和靶向CDH1基因启动子的sa RNA转染到Hep G2细胞中。按照转染混合物的不同将细胞划分为五组,分别是CT组、NC组、778组、215组和778+215组。采用荧光定量PCR法检测MAEL和CDH1基因m RNA的表达情况,Western Blot法检测MAEL、E-钙黏蛋白、Caspase-3和Bcl-2的蛋白表达情况,MTT法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果:si RNA-778和sa RAN-215处理Hep G2细胞后,荧光定量PCR结果显示,si RNA-778显著下调MAEL基因m RNA的表达(p0.05);sa RNA-215显著上调CDH1基因m RNA的表达(p0.05)。蛋白质免疫印迹检测结果显示,MAEL和Bcl-2的蛋白表达量显著降低(p0.05);E-钙黏蛋白和Caspas-3蛋白的表达量显著升高(p0.05)。细胞增殖能力和划痕愈合率显著降低(p0.05),穿过基底膜的Hep G2细胞个数显著减少(p0.05),并且联合转染对细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制效果更佳(p0.05)。结论:si RNA-778能有效下调MAEL基因的表达,sa RNA-215有效上调CDH1基因的表达;Hep G2细胞的迁移和侵袭能力降低、增殖减少,这些现象发生的机理可能与上皮-间质的转化受到抑制相关,并可能通过Caspas-3/Bcl-2信号通路增强细胞的凋亡;si RNA-778和sa RNA-215联合应用的效果优于单基因调控的效果。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

【共引文献】

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本文编号：1264229