YAP对人肺腺癌干细胞顺铂耐药的调控的研究

发布时间：2017-12-15 14:03

  本文关键词：YAP对人肺腺癌干细胞顺铂耐药的调控的研究

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【摘要】：研究目的:1、检测对比A549细胞及A549干细胞球中YAP m RNA和蛋白的表达水平。2、初步探讨YAP对A549干细胞球顺铂耐药的影响。方法:1、以无血清培养基(serum-free medium,SFM)的方法诱导A549细胞形成A549细胞球体。2、以si RNA-YAP转染A549细胞和A549干细胞球来下调YAP m RNA和蛋白的表达。3、通过RT-PCR法检测经si RNA转染前后A549细胞及A549干细胞球中YAP m RNA的表达水平。4、通过Western Blot法检测经si RNA转染前后A549细胞及A549干细胞球中YAP蛋白的表达水平。5、在si RNA转染细胞48小时后,加药组以顺铂处理细胞24小时。6、以CCK法检测各A549细胞及A549干细胞球组的增殖抑制率。7、以流式细胞仪检测各A549细胞及A549干细胞球组的细胞凋亡率。结果:1、RT-PCR、Western Blot法检测到:(1)A549细胞中YAP m RNA及蛋白表达均低于A549干细胞球(P0.05);(2)si YAP可下调A549细胞和A549干细胞球中YAP m RNA及蛋白的表达(P0.05);(3)经si YAP转染后的A549细胞和A549干细胞球中YAP m RNA和蛋白的表达比较差异无统计学意义(P0.05)。2、CCK法检测到:(1)以相同的si RNA和/或顺铂处理后,A549细胞的增殖抑制率高于A549干细胞球(P0.05);(2)YAP表达下调可使A549细胞和A549干细胞球的增殖抑制率较前升高(P0.05);(3)顺铂引起的YAP表达下调后的A549细胞及A549干细胞球的增殖抑制率均较相应的对照细胞组高(P0.05)3、流式细胞仪检测到:(1)以相同的si RNA和/或顺铂处理后,A549细胞的凋亡率高于A549干细胞(P0.05);(2)YAP表达下调可使A549细胞和A549干细胞球的细胞凋亡率较前增加(P0.05);(3)顺铂引起的YAP表达下调后的A549细胞及A549干细胞球的凋亡率均较相应的对照细胞组高(P0.05)结论:1、YAP m RNA及蛋白在A549干细胞球中的表达水平高于A549细胞。2、下调YAP表达可降低A549干细胞球对顺铂的耐药性。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2

【参考文献】

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1 韩高扬;赵松;党丽峰;齐宇;杨洋;刘东雷;张春em;吴恺;;YAP干扰质粒的构建及转染肺腺癌细胞A549的筛选鉴定[J];中国老年学杂志;2014年16期

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本文编号：1292197