叶酸、hnRNP E2与HPV16晚期蛋白在宫颈上皮内瘤变中的作用及交互效应

发布时间：2018-03-09 07:06

本文选题：叶酸　切入点：hnRNP　出处：《山西医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR-HPV)16的持续感染是宫颈癌发生的主要病因因素,HPV16 DNA整合到宿主细胞染色体是宫颈癌变发生的关键。晚期基因L1、L2不仅可作为HPV感染的指标,更重要的是可作为病毒与宿主染色体发生整合的重要标志。核不均一核糖核蛋白E2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein E2,hnRNP E2)参与基因转录和转录后调控过程,晚期基因含有多个与RNA结合蛋白结合的位点和结构,hnRNP E2的KH结构域提供了与HPV16晚期基因特异结合的独特分子结构。叶酸缺乏导致DNA的合成与甲基化过程发生障碍。有研究发现,宫颈癌细胞中叶酸缺乏会导致核不均一核糖核蛋白E1(hnRNP E1)与HPV16 RNA结合,使病毒衣壳蛋白的表达减少,促进HPV16 DNA整合到宿主基因。hnRNP E2和hnRNP E1属于同一类RNA结合蛋白,有关叶酸、hnRNP E2与HPV16晚期蛋白是否在CIN中有相互作用尚未见相关报道。本研究旨在分析不同CIN组叶酸水平、hnRNP E2及HPV16晚期蛋白的表达情况,探讨叶酸、hnRNP E2与HPV16晚期蛋白在CIN的作用及交互效应,以期为CIN的病因学研究和干预靶点提供依据。方法:从课题组于2014年6月至2014年9月在山西省介休市建立的社区宫颈病变研究队列中,随机选取正常宫颈(NC)妇女61例、低度宫颈上皮内瘤样变(CINⅠ)患者59例、高度宫颈上皮内瘤样变(CINⅡ/Ⅲ)患者60例为研究对象。所有研究对象经宫颈液基薄层细胞学检测技术(TCT)筛查、阴道镜检查,最终经病理学确诊,均在签署知情同意书的情况下进入研究。采用结构式问卷收集研究对象的一般人口学特征、生活习惯、生殖情况、既往病史等资料。采用化学发光法测定血清叶酸水平,导流杂交法检测hpv感染状况,western-blot检测hnrnpe2、hpv16l1、l2蛋白表达水平。应用spss19.0软件进行相关资料的c2检验、logistic回归和kruskal-wallish检验。应用相加模型及交互作用指标超额危险度(reri)、归因危险比(api)以及交互作用指数(s)进行两因素间交互作用的评估,应用广义多因子降维法(gmdr)分析多因素间的交互作用。结果:1.hpv与宫颈上皮内瘤变的关系:hpvs感染率在nc组、cinⅠ组、cinⅡ/Ⅲ组分别为21.3%、42.4%、60.0%,hpv16感染率在nc组、cinⅠ组、cinⅡ/Ⅲ组分别为11.5%、15.3%、41.7%。hpvs感染导致cinⅠ、cinⅡ/Ⅲ的发生是hpv阴性的2.576、4.732倍,而hpv16感染导致cinⅡ/Ⅲ的发生是hpv阴性的4.086倍,随着宫颈上皮内瘤变程度的加重,hpvs及hpv16感染率均呈升高趋势(c2趋势=18.607,p0.001;c2趋势=15.525,p0.001)。2.hpv16l1、l2与宫颈上皮内瘤变的关系:hpv16l1、l2蛋白相对表达量在各组间不全相同(h=8.689,p=0.013;h=6.878,p=0.032)。两两比较显示,cinⅡ/Ⅲ组的hpv16l1、l2蛋白相对表达量低于cinⅠ组,而hpv16l1、l2蛋白相对表达量在nc组与cinⅠ组、nc组与cinⅡ/Ⅲ组的差异均无统计学意义。3.hnrnpe2与宫颈上皮内瘤变的关系:hnrnpe2蛋白相对表达量在各组间不全相同(h=14.030,p=0.001),两两比较显示,cinⅡ/Ⅲ组的hnrnpe2蛋白相对表达量低于nc组,cinⅠ组与nc、cinⅡ/Ⅲ组间的差异均无统计学意义。hnrnpe2低表达导致cinⅡ/Ⅲ的发生是hnrnpe2高表达的4.531倍,随着宫颈上皮内瘤变程度的加重,hnrnpe2表达逐渐降低(c2趋势=8.590,p=0.003)。4.叶酸与宫颈上皮内瘤变的关系:叶酸含量在各组间不全相同(h=18.307,p0.001),经两两比较发现,cinⅠ组和cinⅡ/Ⅲ组血清叶酸含量均低于nc组,cinⅠ组与cinⅡ/Ⅲ组间的差异无统计学意义。叶酸缺乏导致cinⅠ和cinⅡ/Ⅲ的发生是叶酸充足的3.684、7.320倍,且随着宫颈上皮内瘤变程度的加重,叶酸含量逐渐降低(c2趋势=16.770,p0.001)。5.叶酸、hnrnpe2、hpv16l1、l2在宫颈上皮内瘤变中的相关关系:分别对叶酸、hnRNP E2、HPV16 L1、L2各因子之间的相关性分析结果显示,叶酸与HPV16 L1(r=0.149,P=0.046)、hnRNP E2与HPV16 L2(r=0.382,P=0.014)、L1与L2(r=0.407,P=0.008)之间存在正相关关系。6.不同宫颈上皮内瘤变组叶酸、hnRNP E2与HPV16间的交互作用分析:应用相加模型对叶酸、hnRNP E2与HPV16之间的交互作用进行分析,结果显示,清叶酸缺乏与HPV16感染、hnRNP E2低表达与HPV16感染均在CINⅡ/Ⅲ组中存在正相加效应。采用广义多因子降维法(GMDR)进一步分析了叶酸、hnRNP E2、HPV16 L1、L2在宫颈上皮内瘤变中的交互作用,结果表明,CINⅠ组和CINⅡ/Ⅲ组叶酸缺乏、hnRNP E2低表达、HPV16 L1低表达、HPV16 L2低表达的交互效应均为最佳交互作用模型。结论:1.HPVs和HPV16感染均可增加CIN的发病风险,因此在育龄妇女中开展HPV筛查,积极预防并控制HPV感染,有助于预防宫颈癌的发生。2.叶酸缺乏出现在CIN的早期,且叶酸缺乏与HPV16感染对CINⅡ/Ⅲ的发生具有协同效应,提示早期进行宫颈病变患者叶酸水平的检测,可为预测和评估病变进展提供重要参考。3.hnRNP E2、HPV16 L1、L2蛋白低表达可增加患CINⅡ/Ⅲ组的风险,提示其低表达更易进展为CINⅡ/Ⅲ,为高度宫颈上皮内瘤变提供诊断标志,且hnRNP E2低表达与HPV16感染对CINⅡ/Ⅲ的发生具有协同效应。4.叶酸缺乏、hnRNP E2、HPV16 L1、L2低表达四者的交互作用可能促进CINⅠ和CINⅡ/Ⅲ的发生,提示宫颈上皮内瘤变可能受膳食、基因和病毒间的交互作用的调控。
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【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.33

【参考文献】