Nanog、Dpagt1基因在浸润性乳腺癌中的表达及意义

发布时间：2018-03-11 17:36

本文选题：乳腺癌　切入点：Nanog　出处：《河北医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：乳腺癌作为女性最常见的肿瘤,其发病率呈逐年递增的趋势,全世界大约有1.15亿乳腺癌患者,每年约有41万女性死于乳腺癌。尽管现在各种抗肿瘤疗法使得五年生存率有了很大的改善,但较高的复发和远处转移率仍然是乳腺癌患者死亡的主要原因。因此寻找新的治疗方法,从而更为有效的遏制肿瘤转移和复发,一直是恶性肿瘤治疗学研究的重要课题。Nanog是一个参与胚胎干细胞自我更新的转录因子。研究表明Nanog基因及其同工型在细胞恶性表现型形成中起着重要作用。Nanog在多种肿瘤组织中表达,包括卵巢癌、膀胱癌、胃腺癌、恶性黑色素瘤等。在鼻咽癌的研究中显示,Nanog表达与E-钙黏素的高表达呈负相关,而与N-钙黏素的高表达呈正相关。Nanog在鼻咽癌的表达可以促进肿瘤细胞的生长、抗凋亡和转移。还有研究表明过表达Nanog的卵巢癌细胞往往过度增生、迁移和侵袭。敲低Nanog可以使卵巢癌细胞的转移潜质降低、E-钙黏素m RNA的表达升高。相反地Nanog过表达则引起细胞增生、迁移增强、E-钙黏素m RNA的表达下降,说明Nanog特异性的参与了肿瘤的发生过程,因此Nanog是一种潜在的恶性肿瘤生物学和预后的标志物,是一种重要的转录调控因子。Dpagt 1基因(人多萜-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1)是一种编码内质网低聚糖前体的限速酶的基因,作为限速酶与多种蛋白的糖基化调节相关。Dpagt1高表达促进细胞增殖并导致细胞间黏附连接不成熟,研究表明下调Dpagt1的表达可导致细胞间形成成熟的黏附连接进而抑制细胞增殖。而Dpagt1基因的突变会导致三磷酸鸟苷酸活性下降,引起先天性的糖基化功能失调引起早期的胚胎死亡。另一方面,Dpagt1的缺失会导致发生神经发育迟缓、低血氧及低血糖等疾病,新近的研究表明Dpagt 1过表达与头颈部鳞状细胞癌的发生密切相关。但是,在乳腺癌的形成和发展中,Nanog和Dpagt1的表达如何及其是否存在相互关系的研究至今还未见报道。目的:本课题将检测Nanog、Dpagt1蛋白在100例浸润性乳腺癌中的表达情况,探讨两者与乳腺癌各种临床病理特征间的关系,并分析两者间的表达是否存在相关性。方法:1研究对象:100例浸润性乳腺癌组织的石蜡包埋标本,病例均来自河北省邢台市人民医院病理科存档石蜡包埋标本。时间从2012年1月至2014年1月,从中随机抽取30例对应癌旁正常乳腺组织(距离癌组织2cm内的正常乳腺组织)石蜡标本作为对照组。将所收集的病例按照年龄、绝经情况、TNM分期、病理学分级及淋巴结转移情况进行分组,并结合乳腺癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、C-erb B-2、ki-67的阳性表达情况,分析两个指标与哪些临床及病理学分类有关,进一步探讨两者的相关性。2研究方法:组织切除后10%中性甲醛固定,石蜡包埋。应用免疫组织化学法检测100例乳腺癌组织及30例癌旁正常乳腺组织中Nanog和Dpagt1蛋白的表达情况,探讨两者与乳腺癌各种临床病理特征间的关系,并分析两者间的表达是否存在相关性。免疫组织化学染色判定方法:Nanog和Dpagt1的阳性细胞着色主要定位在细胞浆与细胞核,根据阳性细胞所占观察细胞总数的百分率以及着色强度的综合评分进行半定量分析。统计学方法:计数资料的比较采用χ~2检验(chi-square),相关分析采用Spearman相关分析,以P0.05为有统计学差异。结果:1 Nanog蛋白在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义1.1 Nanog蛋白在正常乳腺组织及乳腺癌中的表达情况Nanog蛋白表达主要位于胞核或细胞质中,免疫组化中呈棕黄色颗粒,Nanog蛋白在30例乳腺癌旁组织中,Nanog蛋白阳性表达率为0%(0/30),在乳腺癌组织标本中的阳性表达率为48%(48/100),Nanog蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁乳腺组织,有统计学差异(χ~2=22.829,P0.01)(Fig.1)。1.2 Nanog蛋白表达对乳腺癌临床病理特征的影响Nanog蛋白表达与乳腺癌的临床病理特征的关系见Table 1。经统计学分析,Nanog蛋白阳性表达率与乳腺癌患者的年龄、绝经情况无相关关系(P0.05),而与患者的临床TNM分期、淋巴结转移情况、病理组织学分级具有相关性(P0.05);临床TNM分期越晚、病理组织学分级越高,淋巴结转移越多Nanog的表达水平越高。Nanog蛋白在乳腺癌的阳性表达与乳腺癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、C-erb B-2、ki-67的阳性表达间的相关关系见Table 2。统计结果显示,乳腺癌组织中Nanog蛋白阳性表达与ER、PR、C-erb B-2的阳性表达有明显的相关性,呈负相关关系(P0.05,P0.05,P0.05),ER、PR、C-erb B-2阴性表达的乳腺癌患者Nanog蛋白阳性表达率明显高于ER、PR、C-erb B-2阳性表达的乳腺癌患者(P0.05);而乳腺癌组织中Nanog蛋白阳性表达与ki-67的阳性表达呈正相关关系(P0.05)(Table1)。2 Dpagt1蛋白在浸润性乳腺癌中的表达及其意义2.1 Dpagt1蛋白在正常乳腺组织及乳腺癌组织的表达Dpagt1蛋白表达主要位于细胞质基质中,也有部分表达表达于细胞核,免疫组化中呈棕黄色颗粒或片状棕黄染色,在30例乳腺癌旁的正常乳腺组织中,Dpagt1阳性表达率为20%(6/30);在100例乳腺癌组织标本中,Dpagt1阳性表达率为68%(68/100)。经卡方检验,Dpagt1蛋白在乳腺癌组织中的表达高于癌旁正常乳腺组织,有统计学差异(χ~2=21.683,P0.01)(Fig.2)。2.2 Dpagt1蛋白表达与浸润性乳腺癌临床病理特征的关系Dpagt1蛋白表达与乳腺癌的临床病理特征的关系见Table 3。经统计学分析,Dpagt1蛋白阳性表达率与乳腺癌患者的年龄无相关关系(P0.05),与绝经情况亦无相关关系(P0.05);而与患者的临床TNM分期、病理学分级及淋巴结转移情况具有相关性(P0.05,P0.05,P0.01),尤其是淋巴结转移情况。表现为临床TNM分期越晚、病理组织学分级越高,淋巴结转移数目越多,Dpagt1的表达水平越高。Dpagt1蛋白在乳腺癌的阳性表达与乳腺癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、C-erb B-2、ki-67的阳性表达之间的相关关系见Table 4。统计结果显示,乳腺癌组织中Dpagt1蛋白阳性表达与ER、PR的阳性表达没有明显的相关性(P0.05,P0.05);而乳腺癌组织中Dpagt1蛋白阳性表达与C-erb B-2、ki-67的阳性表达呈正相关关系(P0.05,P0.05),C-erb B-2、ki-67阳性表达的乳腺癌患者Dpagt1蛋白阳性表达率明显高于C-erb B-2、ki-67阴性表达的乳腺癌患者(P0.05)。3乳腺癌中Nanog和Dpagt1表达的相关性研究Spearman相关性分析显示:在乳腺癌中,Nanog蛋白表达和Dpagt1蛋白表达呈正相关(r值=0.316,χ~2=9.974,P0.05)(Table 5)。这说明与正常乳腺组织相比,Nanog和Dpagt1的蛋白在乳腺癌中均呈高表达,二者的高表达协同促进了乳腺癌的发生和发展,并在乳腺癌的浸润、淋巴结转移中发挥作用。结论:1 Nanog蛋白在乳腺正常上皮组织不表达,在乳腺癌中表达明显升高。在乳腺癌中,Nanog蛋白的表达水平与ER状态、PR状态、Ki67指数、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤分期等已知肿瘤预后指标密切相关。提示Nanog蛋白参与的信号通路促进乳腺癌细胞增殖、转移,抑制细胞分化,同时与肿瘤的预后密切相关。2 Dpagt1在正常乳腺中低表达,在乳腺癌中高表达。在乳腺癌中,Dpagt1的表达水平与Ki67指数、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤分期等已知肿瘤预后指标密切相关。而与ER、PR的阳性表达没有明显的相关性。提示Dpagt1参与乳腺癌的发生发展,并与肿瘤的增殖能力相关。3 Nanog、Dpagt1在乳腺癌组织中的表达有正相关性,提示二者可能协同促进乳腺癌的发生和发展,且在乳腺癌的浸润、转移及预后中发挥了重要作用。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R737.9

【参考文献】