表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对胃癌细胞侵袭能力的影响研究
发布时间:2018-05-02 13:23
本文选题:EGCG + 胃癌 ; 参考:《兰州大学》2015年硕士论文
【摘要】:目的:通过本课题的研究明确EGCG对胃癌细胞侵袭性及MMP-2、MMP-9、 VEGF表达的影响从而为进一步明确胃癌侵袭机制奠定基础同时也为早期控制胃癌侵袭寻求潜在的治疗靶点。方法:以正常不加:EGCG的完全培养基培养的MKN-45、SGC-7901胃癌细胞作为对照组。以含有不同浓度EGCG的完全培养基培养的胃癌细胞作为实验组。首先实验组以含有不同浓度(0、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200μM) EGCG的完全培养基在37℃下培养MKN-45、SGC-7901胃癌细胞24h,采用CCK-8法分别测定两株胃癌细胞在不同浓度EGCG作用下的抑制率。然后计算出两种胃癌细胞的半数抑制浓度,并把半数抑制浓度作为我们后续实验的工作浓度。用Transwell侵袭实验测定在37℃环境中胃癌细胞在选定的工作浓度EGCG作用24h后的侵袭能力。用qRT-PCR测定上述细胞的MMP-9, MMP-2及VEGF的mRNA表达水平。结果:1、采用CCK-8法分别测定两种胃癌细胞在不同浓度EGCG作用下的抑制率。MKN-45细胞在EGCG浓度分别为0、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200μM时相对应的抑制率分别为:0.0%、11.1%、15.2%、21.1%、36.4%、48.4%、59.4%、63.2%。SGC-7901细胞在EGCG浓度分别为0、3.13、6.25、12.5、25、50、100、200μM时相对应的抑制率分别为:0.0%、7.3%、12.5%、19.2%、29.6%、35.7%、52.9%、59.4%。进而计算两种胃癌细胞在EGCG作用下的IC50值。采用SPSS19.0进行数据分析得:SGC-7901 IC50=100.94μM, MKN-45 IC50=67.03μM。2、用Transwell侵袭实验测定与工作浓度EGCG,37℃环境中共培养24h的胃癌细胞侵袭能力。实验组MKN-45细胞与对照组MKN-45细胞相比侵袭能力明显减弱(40.24±5.78%vs 100.00±12.34%,P0.05)。实验组SGC-7901细胞与对照组SGC-7901细胞相比侵袭能力明显减弱(50.56±8.13% vs 100.00±19.47%,P0.05)。3、用qRT-PCR测定与工作浓度EGCG,37℃环境中共培养24h的胃癌细胞的MMP-9、MMP-2及VEGF的mRNA水平的变化。实验组MKN-45细胞MMP-9、MMP-2、VEGF mRNA相对对照组的表达量分别是:0.45±0.04,0.31±0.02,0.39±0.02。对照组MMP-9、MMP-2、VEGF的表达量为1.00±0.03,1.00±0.05,1.00±0.07。实验组相对对照组表达量明显降低,P0.05。实验组SGC-7901细胞MMP-9、MMP-2、VEGF mRNA相对对照组的表达量分别是:0.42±0.03,0.30±0.07,0.25±0.06。对照组MMP-9、MMP-2、VEGF mRNA表达量为1.00±0.05,1.00±0.08,1.00±0.07。实验组相对对照组表达量明显降低,P0.05。结论:EGCG可抑制胃癌细胞的侵袭能力,其机制可能与MMP-9、MMP-2及VEGF的表达下降有关。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of EGCG on the invasion of gastric cancer cells and the expression of MMP-2 MMP-9, VEGF in gastric cancer cells, so as to lay a foundation for further understanding the invasion mechanism of gastric cancer and to seek a potential therapeutic target for early control of gastric cancer invasion. Methods: MKN-45 SGC-7901 gastric cancer cells were cultured in normal normal medium without EGCG as control group. Gastric cancer cells were cultured on complete culture medium containing different concentrations of EGCG as experimental group. MKN-45 SGC-7901 gastric cancer cells were cultured at 37 鈩,
本文编号:1834101
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