肝癌干细胞生物学特性初步研究及其临床意义

发布时间：2016-12-12 17:39

  本文关键词：Polycomb家族蛋白作为肿瘤异质性分子标记物在卵巢癌复发过程中的作用及相关调控机制，由笔耕文化传播整理发布。

《安徽医科大学》 2013年

肝癌干细胞生物学特性初步研究及其临床意义

吕阳  

【摘要】：【目的】（1）研究肝细胞癌组织中肝癌干细胞标志物的表达与肿瘤血管计数之间的相关性，并统计分析肝癌干细胞标志物表达水平与肝癌临床病理特征及生存预后间的关系，初步探讨肝癌干细胞在肝癌术后转移、复发过程中的作用，对肝癌的预后判断进行评估。（2）利用流式细胞仪分选出肝癌细胞株HepG2中侧群细胞（Sidepopulation，SP），，探讨其生物学特性并比较其与同代未经分选的HepG2细胞的差异。 【方法】（1）采用免疫组织化学染色检测61例原发性肝癌患者组织中CD90、CD133和CD34的表达水平，统计分析两者间的相关性及与肝癌临床病理特征和生存预后间的关系。（2）利用流式细胞仪从肝癌细胞株HepG2细胞中分选得到SP细胞，将分选出的SP细胞定义为实验组，同代未经分选的HepG2细胞定义为对照组，用软琼脂克隆形成实验和NOD/SCID小鼠接种实验分别观察两组细胞体外增殖和体内成瘤情况；用细胞外基质粘附实验比较两组粘附能力差别；用Transwell小室侵袭实验和迁移实验比较两组细胞的侵袭和迁移能力；MTT法检测两组细胞的生长曲线；成球培养实验检测两组细胞在无血清培养条件下成球能力差异。 【结果】（1）肝癌组织标本中CD90、CD133阳性率分别为29.5%（18/61）31.1%（19/61），CD90和/或CD133表达阳性率为45.9%（28/61），有血管侵犯、肿瘤分化程度Ⅲ/Ⅳ级、包膜不完整、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期的患者CD90和/或CD133表达阳性率明显高于无血管侵犯、肿瘤分化程度Ⅰ/Ⅱ级、包膜完整、TNM分期Ⅰ/Ⅱ期患者，CD90和/或CD133表达与肿瘤血管密度（Microvessel density，MVD）计数在肝癌组织中表达呈正相关（r=0.5，P0.05）。表达肝癌干细胞标志物合并MVD计数高的患者术后总体生存率和无瘤生存率明显低于肝癌干细胞标志物表达阴性且MVD计数低的患者。（2）软琼脂克隆形成实验显示SP细胞具有更强的克隆形成能力（31.17±5.95）%vs.（9.50±2.74）%(t=8.106，P＜0.05)，NOD/SCID小鼠接种实验显示2×104个SP细胞即能在皮下成瘤；两组细胞粘附能力（16.19±3.68）%vs.（25.01±13.97）%（t=1.36，p=0.210）和生长曲线差异无统计学意义（t=0.058，P=0.955）；分选出的SP细胞具有更强的迁移能力（87±10）vs.（47±8）（t=8.646，P0.05）但侵袭性差异无统计学意义（20±4）vs.(16±3）（t=1.462，P=0.175），SP细胞在无血清条件培养下成球数较对照组多（54±9）vs.（18±3）（t=8.632，P0.05）。 【结论】（1）高表达肝癌干细胞表面标记物和肿瘤微血管密度有一定关系，结合两者可以预测肝癌患者术后生存预后，肝癌干细胞标志物表达水平是肝癌术后总生存率和无瘤生存率的独立危险因素。（2）肝癌细胞株HepG2中SP细胞具有肿瘤干细胞特性，肝癌细胞株HepG2中SP细胞可能富集了肝癌干细胞。

【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R735.7
【目录】：

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