咔唑衍生物与DNA相互作用、细胞成像和细胞活性研究
发布时间：2024-07-06 08:48
本论文设计合成了两个新型咔唑衍生物1和2,利用多种实验方法深入研究了1和2与DNA的相互作用、HepG2细胞成像及活性,并得到了以下实验结果:(1)以9-乙基-3-甲酰基咔唑为起始原料分别经一步和两步反应得到目标化合物1和2,用1H-NMR、13C-NMR和HRMS对其进行了结构表征。(2)紫外可见吸收滴定和FID实验结果表明,相对于双链DNA和i-motif来说,化合物1和2都能选择性的优先与G-四链体DNA结合,而且化合物1与所有DNA的结合能力强于2的;Job Plot实验结果表明,化合物1和2与bcl-2的结合计量比均为1.5:1,与其他G-四链体DNA的结合计量比为2:1,1与i-motif的结合计量比为2:1,尽管未能准确测试2与i-motif的结合计量比;CD实验结果证明了化合物1和2的结合不会显著影响DNA的二级结构;荧光寿命和荧光滴定实验都说明了化合物1和2可以和DNA相互作用,而且化合物1可作为双链DNA探针分子,而化合物2是潜在的G-四链体荧光探针。(3)MTT和细胞形态实验表明,化合物1和2都能抑制HepG2细胞增殖,...
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略表
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 四链体DNA的结构及生物学功能
1.2.1 不同G-四链体DNA的结构及生物学功能
1.2.1.1 bcl-2G-四链体的结构及生物学功能
1.2.1.2 c-mycG-四链体的结构及生物学功能
1.2.1.3 c-kitG-四链体的结构及生物学功能
1.2.1.4 端粒G-四链体的结构及生物学功能
1.2.2 I-motif四链体DNA的结构及生物学功能
1.3 G-四链体DNA荧光探针的研究进展
1.4 咔唑衍生物与G-四链体DNA相互作用的研究进展
1.5 本论文的设计思路和研究内容
1.5.1 设计思路
1.5.2 研究内容
第二章 咔唑衍生物的合成及结构表征
2.1 引言
2.2 实验材料及仪器
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验仪器
2.3 咔唑衍生物1和2的合成路线
2.4 咔唑衍生物1和2的合成及表征
2.4.1 咔唑衍生物1的合成及表征
2.4.2 咔唑衍生物2的合成及表征
2.5 小结
第三章 咔唑衍生物与不同二级结构DNA的相互作用
3.1 引言
3.2 研究方法
3.2.1 紫外可见吸收光谱
3.2.2 等摩尔连续变化分析
3.2.3 荧光指示剂TO置换(FID)
3.2.4 荧光共振能量转移熔点技术(FRET-melting)
3.2.5 圆二色谱(CD)
3.2.6 荧光光谱
3.2.7 荧光寿命
3.3 实验试剂及仪器
3.3.1 实验试剂
3.3.2 实验仪器
3.4 实验内容
3.4.1 缓冲溶液及化合物储备液的配置
3.4.2 DNA的预处理及缓冲溶液的选择
3.4.3 紫外可见吸收
3.4.4 JobPlot
3.4.5 FID
3.4.6 FRET熔点实验
3.4.7 CD
3.4.8 荧光光谱
3.4.9 荧光寿命
3.5 实验结果与讨论
3.5.1 紫外可见吸收
3.5.2 JobPlot
3.5.3 FID
3.5.4 FRET熔点实验
3.5.5 CD
3.5.6 荧光光谱
3.5.7 荧光寿命
3.6 小结
第四章 咔唑衍生物对HepG2细胞增殖影响及细胞成像研究
4.1 引言
4.2 研究方法
4.2.1 MTT实验
4.2.2 细胞形态实验
4.2.3 共聚焦成像
4.2.4 DNA酶和RNA酶消化实验
4.3 实验试剂及仪器
4.3.1 实验试剂
4.3.2 实验仪器
4.4 实验内容
4.4.1 溶液的配制
4.4.2 MTT实验
4.4.3 细胞形态实验
4.4.4 共聚焦成像
4.4.5 DNA酶和RNA酶消化实验
4.5 实验结果
4.5.1 化合物1和2对HepG2细胞活性的影响
4.5.2 细胞形态实验
4.5.3 共聚焦成像
4.5.4 DNA酶和RNA酶消化实验
4.6 小结
第五章 总结与展望
5.1 总结
5.2 展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
个人简况及联系方式
本文编号：4002347
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英文缩略表
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 四链体DNA的结构及生物学功能
1.2.1 不同G-四链体DNA的结构及生物学功能
1.2.1.1 bcl-2G-四链体的结构及生物学功能
1.2.1.2 c-mycG-四链体的结构及生物学功能
1.2.1.3 c-kitG-四链体的结构及生物学功能
1.2.1.4 端粒G-四链体的结构及生物学功能
1.2.2 I-motif四链体DNA的结构及生物学功能
1.3 G-四链体DNA荧光探针的研究进展
1.4 咔唑衍生物与G-四链体DNA相互作用的研究进展
1.5 本论文的设计思路和研究内容
1.5.1 设计思路
1.5.2 研究内容
第二章 咔唑衍生物的合成及结构表征
2.1 引言
2.2 实验材料及仪器
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验仪器
2.3 咔唑衍生物1和2的合成路线
2.4 咔唑衍生物1和2的合成及表征
2.4.1 咔唑衍生物1的合成及表征
2.4.2 咔唑衍生物2的合成及表征
2.5 小结
第三章 咔唑衍生物与不同二级结构DNA的相互作用
3.1 引言
3.2 研究方法
3.2.1 紫外可见吸收光谱
3.2.2 等摩尔连续变化分析
3.2.3 荧光指示剂TO置换(FID)
3.2.4 荧光共振能量转移熔点技术(FRET-melting)
3.2.5 圆二色谱(CD)
3.2.6 荧光光谱
3.2.7 荧光寿命
3.3 实验试剂及仪器
3.3.1 实验试剂
3.3.2 实验仪器
3.4 实验内容
3.4.1 缓冲溶液及化合物储备液的配置
3.4.2 DNA的预处理及缓冲溶液的选择
3.4.3 紫外可见吸收
3.4.4 JobPlot
3.4.5 FID
3.4.6 FRET熔点实验
3.4.7 CD
3.4.8 荧光光谱
3.4.9 荧光寿命
3.5 实验结果与讨论
3.5.1 紫外可见吸收
3.5.2 JobPlot
3.5.3 FID
3.5.4 FRET熔点实验
3.5.5 CD
3.5.6 荧光光谱
3.5.7 荧光寿命
3.6 小结
第四章 咔唑衍生物对HepG2细胞增殖影响及细胞成像研究
4.1 引言
4.2 研究方法
4.2.1 MTT实验
4.2.2 细胞形态实验
4.2.3 共聚焦成像
4.2.4 DNA酶和RNA酶消化实验
4.3 实验试剂及仪器
4.3.1 实验试剂
4.3.2 实验仪器
4.4 实验内容
4.4.1 溶液的配制
4.4.2 MTT实验
4.4.3 细胞形态实验
4.4.4 共聚焦成像
4.4.5 DNA酶和RNA酶消化实验
4.5 实验结果
4.5.1 化合物1和2对HepG2细胞活性的影响
4.5.2 细胞形态实验
4.5.3 共聚焦成像
4.5.4 DNA酶和RNA酶消化实验
4.6 小结
第五章 总结与展望
5.1 总结
5.2 展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
个人简况及联系方式
本文编号：4002347
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/4002347.html
最近更新
教材专著
