干细胞表面标志CD133在肝癌中的表达及其阳性亚群增殖特性

发布时间：2019-07-25 07:31

【摘要】：背景:以CD133为标志物,利用其蛋白特异性特征可对不同的肿瘤干细胞进行分选和研究。目的:探讨干细胞表面标志CD133在肝癌中的表达及其阳性亚群的体外增殖特性。方法:对人肝癌MHCC97-H细胞株进行培养和分选,分别获得CD133~+与CD133~-MHCC97-H细胞,检测CD133表达及细胞迁移侵袭能力;培养14 d,检测细胞克隆形成率;培养7 d,检测细胞增殖及Notch基因蛋白表达。将CD133~+与CD133~-MHCC97-H细胞分别接种于裸鼠背部皮下,4周后,检测成瘤情况。结果与结论:(1)CD133表达与细胞克隆形成率:CD133~+MHCC97-H细胞CD133表达率、克隆形成率均显著大于CD133~-MHCC97-H细胞(P0.05);(2)细胞增殖:CD133~+MHCC97~-H细胞培养3-7 d的吸光度值大于CD133~-MHCC97-H细胞(P0.05);(3)细胞迁移侵袭:CD133~+MHCC97-H细胞迁移与侵袭实验的透膜细胞数均显著多于CD133~-MHCC97-H细胞(P0.05);(4)Notch基因蛋白:CD133~+MHCC97-H细胞Notch基因蛋白表达多于CD133~-MHCC97-H细胞(P0.05);(5)成瘤实验:CD133~-MHCC97-H细胞组成瘤体积大于CD133~-MHCC97-H细胞组(P0.05);(6)结果表明:CD133阳性肝癌细胞亚群具有较强的体外增殖特性,具有一定的肿瘤干细胞特性,并有较强的侵袭、转移及致瘤能力。
[Abstract]:Background: using CD133 as marker, different tumor stem cells can be sorted and studied by using its protein specific characteristics. Objective: to investigate the expression of stem cell surface marker CD133 in hepatocellular carcinoma (HCC) and the proliferation characteristics of its positive subsets in vitro. Methods: human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cell line was cultured and sorted, CD133~ and CD133~-MHCC97-H cells were obtained, CD133 expression and cell migration and invasion were detected, cell clone formation rate was detected after 14 days of culture, and cell proliferation and Notch gene protein expression were detected after 7 days of culture. CD133~ and CD133~-MHCC97-H cells were inoculated subcutaneously on the back of nude mice, and the tumorigenesis was detected 4 weeks later. Results and conclusion: (1) CD133 expression and clone formation rate: the CD133 expression rate and clone formation rate of CD133~ MHCC97-H cells were significantly higher than those of CD133~-MHCC97-H cells (P 0.05); (2). The absorbance of CD133~ MHCC97~-H cells cultured for 3 days was higher than that of CD133~-MHCC97-H cells (P 0.05). (3) Cell migration and invasion: the number of permeable cells in CD133~ MHCC97-H cell migration and invasion test was significantly higher than that in CD133~-MHCC97-H cell (P 0.05); (4). The expression of Notch gene protein in CD133~ MHCC97-H cell was higher than that in CD133~-MHCC97-H cell (P 0.05); (5). The tumor volume of CD133~-MHCC97-H cell was larger than that of CD133~-MHCC97-H cell group (P 0.05). (6) the results showed that CD133 positive HCC cell subsets had strong proliferation characteristics in vitro, had certain tumor stem cell characteristics, and had strong invasion, metastasis and tumorigenic ability.
【作者单位】： 北京大学滨海医院、天津市第五中心医院消化科;
【基金】：国家青年科学基金项目(81770221):膜联蛋白A2亚硝基化诱导肝细胞癌上皮-间质转化的机制~~
【分类号】：R735.7

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本文编号：2518932