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肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌细胞表达PD-L1

发布时间:2019-07-26 13:34
【摘要】:背景与目的肿瘤相关成纤维细胞(tumor-associated fibroblasts,TAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,可抑制免疫细胞的功能。在肿瘤免疫中CD8+T细胞发挥重要的作用,T细胞膜表面程序性死亡因子1(programmed death factor 1,PD-1),与其配体PD-L1(programmed death factor ligand 1,PD-L1)结合对T细胞的激活起负调节作用。本研究旨在探讨TAF对肺癌细胞PD-L1表达的影响。方法我们以肺癌细胞株H1975、H520和TAF细胞进行Transwell非接触式共培养48 h的H1975、H520细胞为实验组,单独培养的H1975、H520细胞为对照组,两组培养条件一致。倒置显微镜计数实验组和对照组H1975、H520细胞数、流式细胞仪分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1的蛋白表达率、RT-PCR分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1 m RNA的表达。结果每100μm2细胞计数,H1975细胞实验组为(46±21)个,对照组为(16±5)个(P0.05);H520细胞实验组为(38±10)个,对照组为(12±5)个(P0.05)。PD-L1蛋白表达率,H1975细胞实验组为(20.93%±3.54%),对照组为(12.58%±2.52%)(P0.05);H520细胞实验组(19.26%±3.04%),对照组为(11.60%±2.65%)(P0.05)。m RNA表达水平,H1975细胞实验组为(16.45±1.25)pg/m L,对照组为(7.78±1.27)pg/m L(P0.05);H520细胞实验组为(15.38±2.02)pg/m L,对照组为(7.20±1.58)pg/m L(P0.05)。结论 TAF促进肺癌细胞株H1975、H520的生长,增强细胞株PD-L1表达。
【图文】:

肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌细胞表达PD-L1


验组H1975细胞(图3A)、H520细胞(图3C)PD-L1表达水平分别较其单独培养对照组(图3B、图3D)高。2.4RT-PCR分析人肺癌肿瘤相关成纤维细胞对H1975、H520细胞PD-L1mRNA表达的影响如表1所示,H1975细胞PD-L1mRNA的表达量实验组高于对照组(P<0.05),H520细胞PD-L1mRNA的表达量实验组高于对照组(P<0.05)。3讨论肿瘤微环境是肿瘤细胞与围绕在肿瘤细胞周围的血管、神经、淋巴管以及上皮细胞、淋巴细胞、巨噬细胞、纤维细胞,以及生长因子、趋化因子、抗体、激酶等多种小分子物质,一起构成的一个庞大网状结构,为图2共培养肺癌细胞生长状态。共培养48h后肺癌细胞(200×):A:实验组H1975细胞;B:实验组H520细胞;C:对照组H1975细胞;D:对照组H520细胞。箭头位置细胞皱缩不能贴壁而漂浮于培养液中。Fig2Lungcancercellsgrowthafter48h.After48hco-culturedlungcancercells(200×):A:Co-culturedH1975cells;B:Co-culturedH520cells;C:ControlH1975cells;D:ControlH520cells.Arrows:shrunkcellsfloatingintheculturemedium.ABCD图3肺癌细胞株H1975、H520PD-L1蛋白表达率。H1975细胞PD-L1蛋白表达率,共培养组19.14%(A),单独培养组14.04%(B);H520细胞PD-L1蛋白表达率,,共培养组18.81%(C),单独培养组12.27%(D)。Fig3ThePD-L1proteinexpressioninH1975andH520.TheexpressionofPD-L1proteininH1975is19.14%intheexperimentgroup(A)and14.04%inthecontrolgroup(B).TheexpressionofPD-L1proteininH520is18.81%intheexperimentgroup(C)and12.72%inthecontrolgroup(D).ABCD表1H1975,H520细胞PD-L1mRNA表达Ta1ThePD-L1mRNAexpressioninH1975,H520GroupH1975(pg/mL)H520(pg/mL)Experimentgroup16.45±1.2515.38?

肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌细胞表达PD-L1


验组H1975细胞(图3A)、H520细胞(图3C)PD-L1表达水平分别较其单独培养对照组(图3B、图3D)高。2.4RT-PCR分析人肺癌肿瘤相关成纤维细胞对H1975、H520细胞PD-L1mRNA表达的影响如表1所示,H1975细胞PD-L1mRNA的表达量实验组高于对照组(P<0.05),H520细胞PD-L1mRNA的表达量实验组高于对照组(P<0.05)。3讨论肿瘤微环境是肿瘤细胞与围绕在肿瘤细胞周围的血管、神经、淋巴管以及上皮细胞、淋巴细胞、巨噬细胞、纤维细胞,以及生长因子、趋化因子、抗体、激酶等多种小分子物质,一起构成的一个庞大网状结构,为图2共培养肺癌细胞生长状态。共培养48h后肺癌细胞(200×):A:实验组H1975细胞;B:实验组H520细胞;C:对照组H1975细胞;D:对照组H520细胞。箭头位置细胞皱缩不能贴壁而漂浮于培养液中。Fig2Lungcancercellsgrowthafter48h.After48hco-culturedlungcancercells(200×):A:Co-culturedH1975cells;B:Co-culturedH520cells;C:ControlH1975cells;D:ControlH520cells.Arrows:shrunkcellsfloatingintheculturemedium.ABCD图3肺癌细胞株H1975、H520PD-L1蛋白表达率。H1975细胞PD-L1蛋白表达率,共培养组19.14%(A),单独培养组14.04%(B);H520细胞PD-L1蛋白表达率,共培养组18.81%(C),单独培养组12.27%(D)。Fig3ThePD-L1proteinexpressioninH1975andH520.TheexpressionofPD-L1proteininH1975is19.14%intheexperimentgroup(A)and14.04%inthecontrolgroup(B).TheexpressionofPD-L1proteininH520is18.81%intheexperimentgroup(C)and12.72%inthecontrolgroup(D).ABCD表1H1975,H520细胞PD-L1mRNA表达Ta1ThePD-L1mRNAexpressioninH1975,H520GroupH1975(pg/mL)H520(pg/mL)Experimentgroup16.45±1.2515.38?
【作者单位】: 武警后勤学院;武警后勤学院附属医院;天津市第四中心医院;
【基金】:全军重点实验室开放基金项目(No.JY1406)资助~~
【分类号】:R734.2

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本文编号:2519583

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