广藿香酮抑制人胆囊癌SGC-996细胞的增殖

发布时间：2019-08-09 13:34

【摘要】：目的 :探讨广藿香酮对人胆囊癌SGC-996细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:MTT法检测10、40、80、100和120μg/m L广藿香酮作用24、48和72 h后,人胆囊癌SGC-996细胞的增殖情况。克隆形成实验检测10、20和30μg/m L广藿香酮对胆囊癌SGC-996细胞克隆形成的影响。FCM法检测40、60和80μg/m L广藿香酮作用48 h后,胆囊癌SGC-996细胞的凋亡及细胞周期分布。蛋白质印迹法检测40、60和80μg/m L广藿香酮作用胆囊癌SGC-996细胞48 h后,活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型多聚ADP核糖聚合酶1[ploy(ADP-ribose)ployrnerase-1,PARP-1]、Bax、Bcl-2及cyclin D1、cyclin A、cyclin B1蛋白的表达水平。结果:10、40、80、100和120μg/m L广藿香酮可明显抑制人胆囊癌SGC-996细胞的增殖(P值均0.01),且呈剂量和时间依赖性(P值均0.05)。10、20和30μg/m L广藿香酮能明显抑制SGC-996细胞的克隆形成(P值均0.05)。40、60和80μg/m L广藿香酮可显著促进SGC-996细胞的凋亡(P值均0.05),并将细胞周期阻滞于S期(P值均0.05)。40、60和80μg/m L广藿香酮处理后,SGC-996细胞中活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型PARP-1蛋白表达水平及Bax/Bcl-2值均显著上调(P值均0.05),而cyclin D1、cyclin A和cyclin B1蛋白的表达水平则显著下调(P值均0.01)。结论 :广藿香酮可抑制胆囊癌SGC-996细胞的增殖,并将细胞周期阻滞于S期。这一作用可能与广藿香酮调控线粒体凋亡途径相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达水平有关。
【图文】：

（P值均＜0.05），而S期细胞所占百分比均高于对照组（P值均＜0.05）。2.4广藿香酮调控细胞凋亡线粒体途径中相关蛋白的表达Caspase家族、PRAP蛋白及Bcl-2家族蛋白等在细胞凋亡线粒体途径中发挥关键的调控作用[9-11]。40、60和80μg/mL广藿香酮处理SGC-996细胞48h后，应用蛋白质印迹法检测细胞凋亡线粒体途径中相关蛋白的表达水平。结果（图3A）显示，，各质量浓度广藿香酮处理组SGC-996细胞中活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型PARP-1Fig.1TheeffectsofpatchoulenoneontheabilitiesofproliferationandcolonyformationofhumangallbladdercarcinomaSGC-996cellsweredetectedbyMTT(A)andcolonyformationmethods(B),respectively.SGC-996cellswithoutanytreatmentasthecontrol.*P<0.05,**P<0.01,vsthecontrol(n=3).图1MTT法（A）和克隆形成实验（B）分别检测广藿香酮对人胆囊癌SGC-996细胞增殖和克隆形成的影响54吴瑶诗，等.广藿香酮抑制人胆囊癌SGC-996细胞的增殖

Fig.2Theeffectsofpatchoulenoneontheapoptosis(A)andcellcycledistribution(B)ofhumangallbladdercarcinomaSGC-996cellsweredetectedbyFCMassay.SGC-996cellswithoutanytreatmentasthecontrol.*P<0.05,**P<0.01,vsthecontrol(n=3).图2FCM法检测广藿香酮对人胆囊癌SGC-996细胞凋亡（A）及细胞周期分布（B）的影响蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均高于对照组（P值均＜0.05）。这一结果表明，广藿香酮可能通过上调细胞凋亡线粒体途径中相关蛋白的表达水平，进而诱导胆囊癌SGC-996细胞的凋亡。2.5广藿香酮调控细胞周期相关蛋白的表达40、60和80μg/mL广藿香酮处理SGC-996细胞48h后，应用蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白的表达水平。结果（图3B）显示，各质量浓度广藿香酮处理组SGC-996细胞中cyclinD1、cyclinA和cyclinB1蛋白的表达水平均显著低于对照组（P值均＜0.01）。这一结果提示，广藿香酮可能通过下调细胞周期相关蛋白的表达水平，将细胞周期阻滞于S期。吴瑶诗，等.广藿香酮抑制人胆囊癌SGC-996细胞的增殖55
【作者单位】： 南昌大学第二附属医院消化内科;清华大学附属北京清华长庚医院肝胆胰中心;
【分类号】：R735.8

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本文编号：2524812