二氧化氯对MCF-7细胞的杀伤机制及其对裸鼠移植瘤生长的影响研究

发布时间：2020-02-26 19:59

【摘要】：目的:研究二氧化氯(ClO2)对乳腺癌细胞(MCF-7)的杀伤机制,并在此基础上,探究ClO2对乳腺癌细胞移植瘤的影响。方法:1.以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,设定对照组和ClO2干预组。采用MTT法检测ClO2干预后乳腺癌MCF-7细胞株的细胞活性、生长曲线及量效关系。2.用流式细胞术(FCM)检测ClO2干预后MCF-7细胞的周期变化、细胞凋亡情况和细胞膜通透性大小。3.通过HE染色法观察MCF-7细胞形态的完整性,吉姆萨染色法观察细胞核结构改变。4.构建MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,给移植瘤内注射ClO2,观察瘤体直径变化情况,作用一定时间后取瘤体进行石蜡切片,并对切片行HE染色和免疫组化染色(Ki67和VEGF)分析。结果:1.与对照组相比,各ClO2干预组中MCF-7的细胞增殖率均明显降低(P0.05),且增殖率与药物浓度成反比。ClO2的有效抑制浓度为13μg/mL,有效杀伤浓度为26μg/mL。2.FCM检测提示:ClO2处理后,MCF-7细胞周期被阻滞在G1期,MCF-7细胞增殖被抑制(P0.05)。细胞凋亡检测发现,低浓度ClO2对乳腺癌细胞凋亡作用明显(P0.05),且随着ClO2浓度的增加,MCF-7细胞早期凋亡的细胞数逐渐减少,晚期凋亡的细胞数逐渐增加。3.PI染色膜通透性检测结果表明,细胞膜的通透性随着ClO2浓度增加而增大。HE染色辅助吉姆萨染色结果显示,随着ClO2浓度的增加,细胞膜完整性及染色体结构破坏程度逐渐增强,核仁数目逐渐增多,但细胞核的形态结构变化不大。4.ClO2处理MCF-7细胞移植瘤后,瘤体内部细胞出现大面积坏死的现象,HE染色和免疫组化阳性部位均为瘤体边缘。结论:1.ClO2处理MCF-7细胞后,MCF-7细胞的生长繁殖受到抑制,且细胞存活率与药物浓度呈反比关系。2.低浓度ClO2主要影响细胞增殖;中等浓度主要诱导细胞凋亡;高等浓度ClO2主要导致细胞坏死。3.ClO2能使MCF-7移植瘤内部坏死,且对瘤体部位皮肤的损伤是可控的,故“把浅表性肿瘤当成外伤处理”的设想是具有可行性的。
【图文】：

自稳态

.1 肌体 ROS 的生成途径人体许多细胞，如成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、免疫细胞等均能产生离基[11]。除此之外，某些恶性转化后的细胞，，如黑色素瘤细胞、直肠癌细胞、胞等肿瘤细胞也能大量产生 ROS[12]。依据其来源，肌体 ROS 可分为内源性和类[13]。内源性的 ROS 主要来自免疫/炎症细胞、内皮细胞、成纤维细胞、线子传递链、NADPH 氧化酶、单胺氧化酶及 Fe2+自身氧化等。外源性的 ROS 则于化学性致癌物、紫外辐射、射线辐射、香烟烟雾、臭氧、药物中毒等[14]。.2 细胞内 ROS 的清除细胞内 ROS 的清除有赖于抗氧化酶类和非酶类清除剂（图 1）。前者主要包括特异性的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化SH-PX）等[15]。非酶类 ROS 清除剂则主要包括还原型谷胱甘肽、类黄醇、维生素素 C、维生素 E、皮质类固醇、酪氨酸、半胱氨酸、硒、尿酸等[16]。

二氧化氯对MCF-7细胞的杀伤机制及其对裸鼠移植瘤生长的影响研究

PI3K/Akt通路
【学位授予单位】：河北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R73-36

【参考文献】