羟基红花黄色素A对H22小鼠肝癌移植瘤生长抑制作用及机制研究

发布时间：2020-02-27 07:00

【摘要】：目的：羟基红花黄色素A (hydroxysafflor yellow A, HSYA)为活血化瘀类中草药红花的主要活性成分。已有研究证实HSYA具有抗肿瘤活性,但HSYA对肝癌作用的研究却很少见。本实验在建立小鼠肝癌H22移植瘤基础上,对HSYA抑制肝细胞癌生长及其机制进行研究。方法：1、建立小鼠H22皮下移植瘤模型,建立模型第2天将小鼠随机分为阴性对照组(0.9%生理盐水0.2m1腹腔注射)、阳性对照组(索拉非尼50mg/kg灌胃)及HSYA低、中、高剂量组(分别给予1.125,2.25,4.5 mg/kg腹腔注射)五组。连续给药14天,每次用药体积为0.2m1,末次给药24h后处死小鼠。测量小鼠体重变化、肿瘤及胸腺、脾脏的重量,计算抑瘤率及免疫器官指数。2、利用免疫组化、流式细胞术分别检测HSYA对肿瘤细胞增殖相关因子Ki-67及对肿瘤细胞凋亡的影响。3、应用免疫组化、western blot及ELISA实验方法检测HSYA对肿瘤血管生成相关因子的影响及对]Ras/Raf/Mek/Erk (p-c-Raf, c-Raf, p-ERK1/2, ERK1/2)信号通路的作用。4、采用western实验技术在蛋白水平测量与炎症相关的NF-κB (p65, IκB and p-IκB)细胞信号通路相关因子的表达。结果：1、同生理盐水组比较,HSYA组可以明显提高抑瘤率,并且可以抑制肿瘤细胞增殖及促进细胞凋亡,以HSYA中剂量组尤为明显,其次为高剂量组,但均不及索拉非尼组。2、同生理盐水及索拉非尼组比较,HSYA可以提高小鼠的免疫器官指数,以起到增强小鼠免疫力的作用,且具有剂量依赖性,以HSYA高剂量组最为显著。3、HSYA可以抑制肝癌组织中血管生长因子(VEGF,bFGF)的表达及抑制Ras/Raf/Mek/Erk细胞转导通路中c-Raf及ERK1/2的磷酸化。4、HSYA可以下调核p65蛋白表达量、上调胞质中p65蛋白表达并抑制IκB-a磷酸化及降解,从而抑制NF-κB信号转导通路的激活。结论：1、HSYA在一定浓度范围内能够抑制H22小鼠肝癌移植瘤的生成,并抑制肝癌细胞增殖及促进其凋亡。2、HSYA通过提高机体免疫力、抑制肿瘤血管生成及抑制Ras/Raf/Mek/Erk与NF-κB细胞转导通路异常活化起到抗肿瘤作用。
【图文】：

肝癌组织,抑瘤率,光密度值,肝癌细胞

平巧光密度值不高，Ｗ邋ＨＳＹＡ中剂量组显著，ＨＳＹＡ高剂量组次之，逡逑但均不及索拉非尼组。由此可见，ＨＳＹＡ组可Ｗ明显抑制肿瘤细胞的增殖，且趋逡逑势与抑瘤率的庭势一致（图１）。我们可Ｗ推测到ＨＳＹＡ在一定范围内可１＾＞１抑制逡逑Ｈ２２肝癌细胞的增殖。逡逑Ａ逦目逡逑１２逡逑

肝癌细胞,生理盐水,比例,趋势

生理盐水组、索拉非尼组、ＨＳＹＡ低、中、高剂量组每组的调亡比例分别为：１９％、逡逑巧．６４％、３８．３７％、５０．０１％、４４．３９％，由上可知，ＨＳＹＡ在一定浓度范围内具有逡逑促进肿癌细胞调亡的作用，，趋势同上（图２）。逡逑１３逡逑
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7

【参考文献】