RORα高表达对二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化的影响
发布时间：2020-03-20 18:06
【摘要】：背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抗肿瘤的作用。该研究在DADS上调人胃癌MGC803细胞RORα的基础上,观察DADS与RORα高表达对MGC803细胞上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:相差显微镜观察MGC803细胞形态的影响。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT相关分子表达。裸鼠实验检测对移植瘤生长的影响。结果:相差显微镜显示,DADS组与RORα高表达组细胞大小较MGC803细胞一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞少见,异型性降低。RORα高表达加DADS后,上述改变更为明显。Western blot检测结果显示,DADS组与RORα高表达组Snail蛋白表达明显下调,DADS+RORα高表达组更明显(P0.05)。RT-PCR与Western blot检测显示,DADS与RORα高表达可明显下调Vimentin和上调E-cadherin m RNA与蛋白表达,DADS+RORα高表达组更为显著(P0.05)。免疫荧光显示,DADS组与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin表达较对照组明显减弱和E-cadherin表达显著增强,DADS+RORα高表达组更为显著,与Western blot结果一致。裸鼠实验显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组移植瘤较对照组生长减慢(P0.05),并且,移植瘤体重较对照组明显降低,抑瘤率分别为15.07%、26.55%与49.27%(P0.05)。免疫组织化学检测结果显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组较对照组的Ki-67、CD34与Vimentin表达均明显降低,E-cadherin表达明显增强。结论:RORα高表达可增强DADS体内外抑制人胃癌细胞EMT的作用。
【图文】：
362降低。RORα高表达细胞大小较一致，呈圆形或椭圆形，细胞膜突起少见，核质比例减少，异型性显著降低。RORα高表达加DADS后，上述改变更为明显。表明DADS与RORα高表达可从形态上抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图1)。(Phase-contrastmicroscopy,×40)图1RORα高表达对MGC803细胞形态的影响Fig.1ThemorphologicaleffectofoverexpressionofRORαinMGC803cellsA:MGC803;B:DADS;C:RORα/MGC803;D:RORα/MGC803+DADS图2DADS与RORα高表达对Snail蛋白表达的影响Fig.2TheeffectofSnailexpressionbyDADSandoverexpressionofRORα1:MGC803;2:vector/MGC803;3:RORα/MGC803;4:MGC803+DADS;5:vector/MGC803+DADS;6:RORα/MGC803+DADS;*:P<0.05,comparedwithMGC803andvector/MGC803;#:P<0.05,comparedwithMGC803+DADS,vector/MGC803+DADSandRORα/MGC8032.2DADS与RORα高表达抑制MGC803细胞EMTWesternblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可明显下调MGC803细胞Snail蛋白表达(P<0.05)。并且，RT-PCR与Westernblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可下调Vimentin和上调E-cadherinmRNA与蛋白表达(P<0.05)。上述改变RORα/MGC803+DADS作用更为明显(P<0.05)。表明DADS与RORα高表达可通过下调Snail与Vimentin和上调E-cadherin抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图2~4)。2.3细胞免疫荧光检测DADS与RORα高表达对EMT相关蛋白表达的影响免疫荧光检测结果显示，Snail蛋白定位细胞核，Vimentin与E-cadherin蛋白主要定位于细胞质。DADS与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组明显减弱，而E-cadherin阳性表达显著增强，与Westernblot检测结果一致(图5)。2.4DADS与RORα高表达
362降低。RORα高表达细胞大小较一致，呈圆形或椭圆形，细胞膜突起少见，核质比例减少，，异型性显著降低。RORα高表达加DADS后，上述改变更为明显。表明DADS与RORα高表达可从形态上抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图1)。(Phase-contrastmicroscopy,×40)图1RORα高表达对MGC803细胞形态的影响Fig.1ThemorphologicaleffectofoverexpressionofRORαinMGC803cellsA:MGC803;B:DADS;C:RORα/MGC803;D:RORα/MGC803+DADS图2DADS与RORα高表达对Snail蛋白表达的影响Fig.2TheeffectofSnailexpressionbyDADSandoverexpressionofRORα1:MGC803;2:vector/MGC803;3:RORα/MGC803;4:MGC803+DADS;5:vector/MGC803+DADS;6:RORα/MGC803+DADS;*:P<0.05,comparedwithMGC803andvector/MGC803;#:P<0.05,comparedwithMGC803+DADS,vector/MGC803+DADSandRORα/MGC8032.2DADS与RORα高表达抑制MGC803细胞EMTWesternblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可明显下调MGC803细胞Snail蛋白表达(P<0.05)。并且，RT-PCR与Westernblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可下调Vimentin和上调E-cadherinmRNA与蛋白表达(P<0.05)。上述改变RORα/MGC803+DADS作用更为明显(P<0.05)。表明DADS与RORα高表达可通过下调Snail与Vimentin和上调E-cadherin抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图2~4)。2.3细胞免疫荧光检测DADS与RORα高表达对EMT相关蛋白表达的影响免疫荧光检测结果显示，Snail蛋白定位细胞核，Vimentin与E-cadherin蛋白主要定位于细胞质。DADS与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组明显减弱，而E-cadherin阳性表达显著增强，与Westernblot检测结果一致(图5)。2.4DADS与RORα高表达
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362降低。RORα高表达细胞大小较一致，呈圆形或椭圆形，细胞膜突起少见，核质比例减少，异型性显著降低。RORα高表达加DADS后，上述改变更为明显。表明DADS与RORα高表达可从形态上抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图1)。(Phase-contrastmicroscopy,×40)图1RORα高表达对MGC803细胞形态的影响Fig.1ThemorphologicaleffectofoverexpressionofRORαinMGC803cellsA:MGC803;B:DADS;C:RORα/MGC803;D:RORα/MGC803+DADS图2DADS与RORα高表达对Snail蛋白表达的影响Fig.2TheeffectofSnailexpressionbyDADSandoverexpressionofRORα1:MGC803;2:vector/MGC803;3:RORα/MGC803;4:MGC803+DADS;5:vector/MGC803+DADS;6:RORα/MGC803+DADS;*:P<0.05,comparedwithMGC803andvector/MGC803;#:P<0.05,comparedwithMGC803+DADS,vector/MGC803+DADSandRORα/MGC8032.2DADS与RORα高表达抑制MGC803细胞EMTWesternblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可明显下调MGC803细胞Snail蛋白表达(P<0.05)。并且，RT-PCR与Westernblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可下调Vimentin和上调E-cadherinmRNA与蛋白表达(P<0.05)。上述改变RORα/MGC803+DADS作用更为明显(P<0.05)。表明DADS与RORα高表达可通过下调Snail与Vimentin和上调E-cadherin抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图2~4)。2.3细胞免疫荧光检测DADS与RORα高表达对EMT相关蛋白表达的影响免疫荧光检测结果显示，Snail蛋白定位细胞核，Vimentin与E-cadherin蛋白主要定位于细胞质。DADS与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组明显减弱，而E-cadherin阳性表达显著增强，与Westernblot检测结果一致(图5)。2.4DADS与RORα高表达
362降低。RORα高表达细胞大小较一致，呈圆形或椭圆形，细胞膜突起少见，核质比例减少，，异型性显著降低。RORα高表达加DADS后，上述改变更为明显。表明DADS与RORα高表达可从形态上抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图1)。(Phase-contrastmicroscopy,×40)图1RORα高表达对MGC803细胞形态的影响Fig.1ThemorphologicaleffectofoverexpressionofRORαinMGC803cellsA:MGC803;B:DADS;C:RORα/MGC803;D:RORα/MGC803+DADS图2DADS与RORα高表达对Snail蛋白表达的影响Fig.2TheeffectofSnailexpressionbyDADSandoverexpressionofRORα1:MGC803;2:vector/MGC803;3:RORα/MGC803;4:MGC803+DADS;5:vector/MGC803+DADS;6:RORα/MGC803+DADS;*:P<0.05,comparedwithMGC803andvector/MGC803;#:P<0.05,comparedwithMGC803+DADS,vector/MGC803+DADSandRORα/MGC8032.2DADS与RORα高表达抑制MGC803细胞EMTWesternblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可明显下调MGC803细胞Snail蛋白表达(P<0.05)。并且，RT-PCR与Westernblot检测结果显示，DADS与RORα高表达可下调Vimentin和上调E-cadherinmRNA与蛋白表达(P<0.05)。上述改变RORα/MGC803+DADS作用更为明显(P<0.05)。表明DADS与RORα高表达可通过下调Snail与Vimentin和上调E-cadherin抑制MGC803细胞EMT，RORα高表达可增强DADS的抑制作用(图2~4)。2.3细胞免疫荧光检测DADS与RORα高表达对EMT相关蛋白表达的影响免疫荧光检测结果显示，Snail蛋白定位细胞核，Vimentin与E-cadherin蛋白主要定位于细胞质。DADS与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组明显减弱，而E-cadherin阳性表达显著增强，与Westernblot检测结果一致(图5)。2.4DADS与RORα高表达
【参考文献】
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【共引文献】
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本文编号：2591991
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