PD-L1、CD8在微卫星高度不稳定性结直肠癌中的表达及临床意义

发布时间：2020-03-25 20:53

【摘要】：目的研究Ⅱ/Ⅲ期结直肠癌(CRC)中微卫星高度不稳定性及PD-L1、CD8蛋白的表达,并分析其与临床病理特征和复发率的关系。方法1选取福建医科大学附属第二医院2016-3-1至2017-11-30期间141例Ⅱ/Ⅲ分期CRC患者,收集经结直肠癌切除术后并病理确诊为CRC的癌组织标本及血液标本,并收集患者的临床病理资料。采用多重荧光PCR结合毛细管电泳方法检测6个单核苷酸重复位点(NR-21、NR-24、NR-27、BAT-25、BAT-26、MONO-27)以鉴定微卫星状态,筛选出微卫星高度不稳定性(MSI-H)结直肠癌患者作为实验组,再选取剩余部分CRC作为对照组。从收集的临床病理资料分析CRC发病情况及其病理特征。2收集实验组25例和对照组36例的癌组织及其正常肠粘膜组织标本,用免疫组化法检测PD-L1、CD8蛋白,并分析PD-L1、CD8在各型Ⅱ/Ⅲ期CRC中的表达特点。从临床病理资料分析实验组和对照组的发病情况及病理特征。3收集实验组和对照组的随访资料,分析Ⅱ/Ⅲ期CRC、MSI-H CRC、MSI-L/MSS CRC的复发因素。结果1 141例CRC患者中MSI-H 25例,发生率为17.7%;检出微卫星低度不稳定性(MSI-L)17例,发生率为12.1%;检出微卫星稳定型(MSS)99例,发生率为70.2%。实验组和对照组在肿瘤部位、组织类型、分化程度存在明显差异(P0.05)。2实验组癌组织的PD-L1蛋白表达阳性率为52.0%(13/25),对照组的阳性率为16.7%(6/36),实验组的PD-L1阳性表达率高于对照组(P0.05)。PD-L1蛋白在实验组及对照组中的正常肠黏膜组织中无阳性表达。实验组癌组织中CD8蛋白表达阳性率为64.0%(16/25),对照组的阳性率为44.4%(16/36),差异无统计学意义(P0.05)。实验组正常组织中CD8蛋白表达阳性率为52.0%(13/25),对照组的阳性率为30.6%(11/36),差异无统计学意义(P0.05)。实验组癌组织中PD-L1+/CD8+为48.0%(12/25),PD-L1+/CD8-为4.0%(1/25),PD-L1-/CD8+为16.0%(4/25),PD-L1-/CD8-为32.0%(8/25)。PD-L1与CD8在实验组中的表达差异具有统计学意义(P0.05)。PD-L1在MSI-H CRC癌组织中的阳性表达与肿瘤分化程度、Ⅱ/Ⅲ期、脉管癌栓存在明显差异(P0.05)。CD8在MSI-H CRC癌组织中的阳性表达与肿瘤分化程度、淋巴分期、Ⅱ/Ⅲ期、脉管癌栓存在明显差异(P0.05)。PD-L1、CD8在MSI-H CRC癌组织中表达与肿瘤分化程度、脉管癌栓存在明显差异(P0.05)。3数据分析显示实验组患者无疾病生存期(DFS)为12.2±1.0月,对照组患者DFS为9.8±0.6月,提示MSI-H CRC患者DFS较长。单因素分析显示肿瘤分化程度、临床分期、肿块直径、脉管癌栓、微卫星状态是影响CRC患者的复发因素(P0.05),行COX回归模型的多因素分析示微卫星状态是影响Ⅱ/Ⅲ期CRC复发的独立危险因素(P?0.05)。4实验组中PD-L1阴性表达患者DFS为14.9±0.9个月,阳性表达患者DFS为10.1±0.4个月,PD-L1阳性表达患者DF较短(P0.05)。实验组中CD8阴性表达患者DFS为14.0±1.2个月,阳性表达的患者DFS为11.5±0.8个月,CD8阴性表达患者DFS与阳性表达患者无明显差异(P0.05)。单因素分析显示分化程度、脉管癌栓、PD-L1、PD-L1/CD8是影响MSI-H CRC的复发因素(P0.05),行COX回归模型的多因素分析示PD-L1、PD-L1/CD8是Ⅱ/Ⅲ期影响MSI-H CRC复发独立危险因素。分化程度是影响MSI-L/MSSⅡ/Ⅲ期CRC患者复发的独立危险因素。结论1通过PCR检测出CRC患者MSI-H的发生率为17.7%。结肠癌中MSI-H的检出率高于直肠癌;MSI-H CRC在分化程度低且黏液腺癌中多见。2 PD-L1蛋白在MSI-H CRC癌组织中高表达。PD-L1蛋白在正常组织不表达。MSI-H CRC中PD-L1+和CD8+表达较高。3 PD-L1的阳性表达与MSI-H CRC分化程度低、Ⅲ期、脉管癌栓呈正相关。CD8的阳性表达与MSI-H CRC分化程度低、有淋巴结转移、Ⅲ期、脉管癌栓呈正相关相关。PD-L1+/CD8+在癌间质细胞中的共同表达与MSI-H CRC分化程度低、脉管癌栓呈正相关。4微卫星状态是Ⅱ/Ⅲ期CRC影响复发的独立危险因素。5 PD-L1是影响Ⅱ/Ⅲ期MSI-H CRC患者复发的独立危险因素。6分化程度是影响Ⅱ/Ⅲ期MSI-L/MSS CRC患者复发的独立危险因素。
【图文】：

毛细管电泳,检测结果,方法,患者

D E F图 1.1 MSI 多重荧光 PCR 结合毛细管电泳方法检测结果A Bat-25 阳性表达 B Bat-26 阳性表达 C NR-21 阳性表达D NR-24 阳性表达 E NR-27 阳性表达 F MONO-27 阳性表达注：1.蓝色为石蜡组织 DNA 扩增图；2.黑色为血液 DNA 扩增图；3.红色为内参扩增图5.2 实验组与对照组患者临床病理特征的关系研究显示实验组和对照组的性别、年龄、肿瘤浸润深度、淋巴分期、Ⅱ/Ⅲ分期、肿瘤直径、脉管癌栓无明显相关性（P>0.05），，而与肿瘤部位、组织类型、分化程度存在明显差异（P<0.05）。因此在结肠癌患者中 MSI-H 阳性率显著高于直肠癌患者；在粘液腺癌 CRC患者中 MSI-H 阳性率显著高于 CRC 患者；在分化程度低的 CRC 患者中 MSI-H阳性率显著高于高、中分化的 CRC 患者。（见表 1.4）

结直肠癌,癌组织,癌细胞,微卫星

PD-L1在微卫星稳定性结直肠癌癌组织中的表达（PV×200）
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.34

【参考文献】