姜黄素逆转肺腺癌顺铂耐药作用及其分子机制的研究

发布时间：2020-03-31 21:59

【摘要】：目的:已有的研究表明:姜黄素对包括肺癌在内多种恶性肿瘤具有抗肿瘤作用。但是,姜黄素作为化疗药物促敏剂是否能逆转肿瘤化疗耐药及其分子机制目前尚不清楚。本研究的目的是:(1)探讨姜黄素对肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)体外增殖、分裂和凋亡的影响;(2)姜黄素对肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP在裸鼠体内成瘤性的影响;(3)筛选鉴定人肺腺癌顺铂耐药的分子标志物谱,并探讨其分子机制。方法:(1)体外常规培养A549和A549/DDP细胞,分别给予不同浓度顺铂(0μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml),不同浓度姜黄素(0μM、1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM、25μM、50μM、100μM)及不同浓度顺铂(0μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml)联合姜黄素(12.5μM)处理72小时,MTT实验检顺铂和/姜黄素对A549和A549/DDP细胞存活率的影响;(2)将A549细胞分为对照组(空白培养液)、DDP组(2μg/ml顺铂)、CUR组(12.5μM姜黄素)、DDP+CUR组(2μg/ml顺铂+12.5μM姜黄素),A549/DDP细胞分为对照组(空白培养液)、DDP组(12μg/ml顺铂)、CUR组(12.5μM姜黄素)、DDP+CUR组(12μg/ml顺铂+12.5μM姜黄素),各组给与相应药物处理72小时后,结晶紫染色法检测顺铂和/或姜黄素对A549和A549/DDP细胞增殖率的影响;(3)采用同样的分组处理方法,流式细胞仪检测顺铂和/或姜黄素对A549和A549/DDP细胞凋亡率的影响。(4)采用裸鼠分别于右侧腹股沟皮下接种200μL(约2×106个)A549细胞或A549/DDP细胞建立移植瘤动物模型,两种细胞移植瘤体积达到200mm3时分别随机分为对照组、DDP组、CUR组和DDP+CUR组。对照组:生理盐水溶液(腹腔注射,1次/周)+羧甲基纤维素钠溶液(灌胃,1次/天);DDP组:顺铂溶液(3mg/kg,腹腔注射,1次/周)+羧甲基纤维素钠溶液(灌胃,1次/天);CUR组:姜黄素混悬液(100mg/kg,灌胃,1次/天)+生理盐水腹腔注射(1次/周);DDP+CUR组:顺铂溶液(3mg/kg,腹腔注射,1次/周)+姜黄素混悬液(100mg/kg,灌胃,1次/天)。连续给药25天,期间隔日测量肿瘤的长径、短径及体重,评测移植瘤体积。(5)将A549细胞分为对照组(空白培养液)、DDP组(2μg/ml顺铂)、CUR组(12.5μM姜黄素)、DDP+CUR组(2μg/ml顺铂+12.5μM姜黄素),A549/DDP细胞分为对照组(空白培养液)、DDP组(12μg/ml顺铂)、CUR组(12.5μM姜黄素)、DDP+CUR组(12μg/ml顺铂+12.5μM姜黄素),常规培养,提取及纯化包括miRNA在内的总RNA,miRNA芯片检测A549细胞株对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组和A549/DDP细胞株对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组miRNA表达谱。结果:1、MTT实验结果:(1)A549细胞经0μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂处理72小时,细胞存活率分别为100±7.07%、74.66±1.38%、41.21±1.23%、35.03±0.73%、20.42±0.68%、17.12±1.31%、11.83±0.56%、0.45±0.15%,不同浓度顺铂组A549细胞株体外存活率经卡方检验比较有显著性差异(P=0.000);两两比较:对照组与1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著差异(P0.05);1μg/ml组与2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著性差异(P0.05);2μg/ml组与4μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P0.05),2μg/ml组与8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著性差异(P0.05);4μg/ml组与8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著差异(P0.05);8μg/ml组与16μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P0.05),8μg/ml组与32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著性差异(P0.05);16μg/ml组与32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著差异(P0.05);32μg/ml组与64μg/ml组间体外存活率比较有显著差异(P0.05)。顺铂可抑制A549细胞的存活率,呈剂量依赖关系,经曲线回归分析得出顺铂在A549细胞中的IC50为2.3μg/ml。(2)A549/DDP细胞经0μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂处理72小时,细胞存活率分别为100±4.25%、90.49±2.89%、81.93±3.11%、56.90±1.74%、46.42±2.91%、45.50±3.46%、36.59±3.31%、33.06±2.15%,不同浓度顺铂组A549/DDP细胞株体外存活率经卡方检验比较有显著性差异(P=0.000)。;两比较:对照组与2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000~0.024),但对照组与1μg/ml组间体外存活率没有显著差异(P=0.260);1μg/ml组与2μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P=0.202),1μg/ml组与4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较存在显著性差异(P=0.000~0.013);2μg/ml组与4μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P=0.158),2μg/ml组与8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较存在显著性差异(P=0.000~0.028);4μg/ml组与8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P=0.112~0.363),4μg/ml组与64μg/ml组间体外存活率比较存在显著性差异(P=0.046);8μg/ml组与16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P=0.237~894);16μg/ml组与32μg/ml、64μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P=0.290~0.551);32μg/ml组与64μg/ml组间体外存活率比较无显著差异(P=0.634)。顺铂可抑制A549/DDP细胞的存活率,呈剂量依赖关系,经曲线回归分析得出顺铂在A549/DDP细胞中的IC50分别为11.23μg/ml。(3)A549细胞0μM、1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM、25μM、50μM、100μM姜黄素处理72小时,细胞存活率分别为100±4.62%、100.62±1.58%、99.24±0.36%、91.00±2.27%、81.11±1.66%、60.42±1.78%、52.87±0.69%、25.95±1.11%,不同浓度姜黄素组A549细胞株体外存活率卡方检验比较有显著性差异(P=0.000);两两比较:对照组与25μM、50μM、100μM组间体外存活率比较有显著差异(P=0.001~0.018),但对照组与1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM组间体外存活率没有显著差异(P=0.075~0.701);1.5625μM组与3.25μM、6.5μM、12.5μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.150~0.565),1.5625μM组与25μM、50μM、100μM组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.002~0.040);3.25μM组与6.5μM、12.5μM、25μM、50μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.065~0.718),3.25μM组与100μM组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.008);6.5μM组与12.5μM、25μM、50μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.126~0.584)、6.5μM组与100μM组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.017);12.5μM组与25μM、50μM、100μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.050~0.479);25μM组与50μM、100μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.184~0.745);50μM组与100μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.305)。姜黄素可抑制A549细胞的存活率,呈剂量依赖性,经曲线回归分析得出姜黄素在A549细胞中的IC50为45.41μM。(4)A549/DDP细胞经0μM、1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM、25μM、50μM、100μM姜黄素处理72小时,细胞存活率分别为100±4.45%、100.45±1.68%、97.00±1.16%、86.75±0.84%、80.77±1.80%、62.91±0.17%、53.53±0.36%、26.78±1.20%,不同浓度姜黄素组A549/DDP细胞株体外存活率经卡方检验比较有显著性差异(P=0.000);两两比较:对照组与25μM、50μM、100μM组间体外存活率比较有显著差异(P=0.001~0.020),但对照组与1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM组间体外存活率没有显著差异(P=0.069~0.301);1.5625μM组与3.25μM、6.5μM、12.5μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.142~0.515),1.5625μM组与25μM、50μM、100μM组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.002~0.044);3.25μM组与6.5μM、12.5μM、25μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.148~0.666),3.25μM组与50μM、100μM组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.009~0.073);6.5μM组与12.5μM、25μM、50μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.159~0.667)、6.5μM组与100μM组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.021);12.5μM组与25μM、50μM、100μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.051~0.529);25μM组与50μM、100μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.162~0.697);50μM组与100μM组间体外存活率比较没有显著性差异(P=0.301)。姜黄素可抑制A549/DDP细胞的存活率,呈剂量依赖性,经曲线回归分析得出姜黄素在A549/DDP细胞中的IC50为46.25μM。(5)A549细胞经1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素处理72小时,细胞存活率分别为79.66±2.50%、42.46±0.16%、32.67±0.67%、17.67±0.45%、16.72±0.72%、11.13±0.39%、1.83±0.86%,对照组细胞存活率为100±1.57%,不同浓度顺铂联用12.5μM姜黄素组A549细胞株体外存活率经卡方检验比较有显著性差异(P=0.000);两两比较:对照组与1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.000);1μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.000);2μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000);4μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000);8μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与16μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较无显著差异(P=0.246),8μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较无显著差异(P=0.000);16μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000~0.002);32μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000)。不同浓度顺铂联用姜黄素可抑制A549细胞的存活率,呈剂量依赖性,经曲线回归分析得出顺铂联用姜黄素在A549细胞中的IC50为2.12。(6)A549/DDP细胞经1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素处理72小时,细胞存活率分别为94.05±1.65%、57.41±0.39%、39.82±2.01%、28.31±1.40%、18.46±1.08%、10.83±0.75%、9.90±0.38%,对照组细胞存活率为100±4.42%,不同浓度顺铂联用12.5μM姜黄素组A549/DDP细胞株体外存活率经卡方检验比较有显著性差异(P=0.000);两两比较:对照组与1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.000~0.025);1μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著性差异(P=0.000);2μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000~0.014);4μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.000~0.024);8μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与16μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较无显著差异(P=0.146),8μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与32μg/ml、64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较无显著差异(P=0.002~0.011);16μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与32μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较无显著差异(P=0.191),64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较有显著差异(P=0.039);32μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组与64μg/ml顺铂联用12.5μM姜黄素组间体外存活率比较无显著差异(P=0.392)。不同浓度顺铂联用姜黄素可抑制A549/DDP细胞的存活率,呈剂量依赖性,经曲线回归分析得出顺铂联用姜黄素在A549/DDP细胞中的IC50为3.44。(7)A549和A549/DDP细胞株在2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μg/ml、64μg/ml顺铂组间处理的体外存活率经卡方检验比较有显著性差异(P=0.000),但A549和A549/DDP细胞株在0μg/ml、1μg/ml顺铂组间体外存活率无显著差异(P0.05)(8)A549和A549/DDP细胞株在0μM、1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM、25μM、50μM、100μM姜黄素组间处理的体外存活率经卡方检验比较均无显著性差异(P0.05)。(9)选取空白对照、8μg/ml顺铂、12.5μM姜黄素及8μg/ml顺铂+12.5μM姜黄素处理A549细胞,存活率分别为100±7.07%、20.42±0.68%、81.11±1.66%、17.67±0.45%(见图1.1.4)。对照组、DDP(8μg/ml)组、CUR(12.5μM)组、DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组间A549细胞存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(F=397.002,P=0.000);两两比较:DDP(8μg/ml)组、CUR(12.5μM)组、DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组和对照组间存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(P=0.000),DDP(8μg/ml)组、DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组和CUR(12.5μM)组间存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(P=0.000),DDP(8μg/ml)组和DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组间存活率经单因素方差分析比较具无显著性差异(P=0.383)。(10)选取取空白对照、8μg/ml顺铂、12.5μM姜黄素及8μg/ml顺铂+12.5μM姜黄素处理A549/DDP细胞,存活率分别为100±4.25%、46.42±2.91%、80.77±1.80%、28.31±1.40%A549/DDP细胞株对照组、DDP(8μg/ml)组、CUR(12.5μM)组、DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组间体外存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(F=398.360,P=0.000);两两比较:DDP(8μg/ml)组、CUR(12.5μM)组、DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组和对照组间存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(P=0.000),DDP(8μg/ml)组、DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组和CUR(12.5μM)组间存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(P=0.000),DDP(8μg/ml)组和DDP(8μg/ml)+CUR(12.5μM)组间存活率经单因素方差分析比较具有显著性差异(P=0.000)。2、结晶紫染色实验结果:(1)A549细胞对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组间增殖率比较存在显著差异;两两比较:DDP组、DDP+CUR组与对照组间A549细胞增殖率比较存在显著差异,DDP组、DDP+CUR组与CUR组间A549细胞存活率比较存在显著差异,CUR组与对照组间A549细胞存活率比较无显著差异,DDP组与DDP+CUR组间A549细胞增殖率比较无显著差异。(2)A549/DDP细胞对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组间增殖率比较存在显著差异;两两比较:DDP+CUR组与对照组、DDP组、CUR组间A549/DDP细胞增殖率比较存在显著差异,对照组与DDP组、CUR组间A549/DDP细胞增殖率比较无显著差异,DDP组与CUR组间A549/DDP细胞增殖率比较无显著差异。3、流式细胞分析结果:(1)不同组A549细胞凋亡率分别为:对照组1.92±0.88%、DDP组12.90±0.33%、CUR组10.40±1.49%、DDP+CUR组14.88±1.00%;A549细胞株对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组间体外凋亡率经单因素方差分析检验有显著性差异(F=95.232,P=0.000);两两比较:DDP组、CUR组、DDP+CUR组与对照组间A549细胞凋亡率比较均存在显著性差异(P=0.000),CUR组和DDP+CUR组间A549细胞凋亡率比较存在显著性差异(P=0.002),DDP组和DDP+CUR组间A549细胞凋亡率比较无显著性差异(P=0.104),CUR组和DDP组间A549细胞凋亡率比较存在明显差异(P=0.016)。(2)A549/DDP细胞凋亡率分别为:对照组1.69±0.80%、DDP组8.83±1.04%、CUR组7.70±0.32%、DDP+CUR组22.83±0.81%;A549/DDP细胞株对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组间体外凋亡率经单因素方差分析检验有显著差异(F=386.209,P=0.000);两两比较:DDP组、CUR组、DDP+CUR组与对照组间A549/DDP细胞凋亡率比较均存在显著差异(P=0.000),DDP组、CUR组与DDP+CUR组间A549/DDP细胞凋亡率比较均存在显著差异(P=0.000),DDP组与CUR组间A549/DDP细胞凋亡率比较无显著差异(P=0.118)。4、裸鼠皮下移植肺腺癌细胞构建移植瘤后各组经相应药物处理25天,(1)移植A549细胞的各组裸鼠肿瘤体积分别为:对照组(1309.75±594.52)mm3、DDP组(980.46±143.64)mm3、CUR组(1209.55±67.65)mm3、DDP+CUR组(973.25±84.23)mm3;对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组间移植瘤体积经单因素方差分析检验有显著差异(F=5.119,P=0.029);两两比较:DDP组、DDP+CUR组与对照组间小鼠肿瘤体积比较存在显著差异(P=0.011,0.00),CUR组与对照组间小鼠肿瘤体积比较存在显著差异(P=0.096);DDP组、DDP+CUR组与CUR组间小鼠肿瘤体积比较无显著差异(P=0.201,0.154);DDP组与DDP+CUR组间小鼠肿瘤体积比较无显著差异(P0.05);CUR组与对照组间小鼠肿瘤体积比较无显著差异(P=0.858)。(2)移植A549/DDP细胞的各组裸鼠肿瘤体积分别为:对照组(1712.45±483.39)mm3、DDP组(1572.33±263.11)mm3、CUR组(1585.93±427.64)mm3、DDP+CUR组(1088.25±360.00)mm3;用药25天后,经测量计算移植A549/DDP细胞的各组裸鼠肿瘤体积分别为:对照组(1712.45±483.39)mm3、DDP组(1572.33±263.11)mm3、CUR组(1585.93±427.64)mm3、DDP+CUR组(1088.25±360.00)mm3;对照组、DDP组、CUR组、DDP+CUR组间移植瘤体积经单因素方差分析检验有显著差异(F=4.820,P=0.033);两两比较:DDP+CUR组与对照组、DDP组、CUR组间小鼠肿瘤体积比较存在显著差异(P=0.007,0.040,0.023);DDP组、CUR组与对照组间小鼠肿瘤体积比较无显著差异(P=0.281,0.455);DDP组与CUR组间小鼠肿瘤体积比较无显著差异(P=0.721)。5、miRNA芯片结果:(1)人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP与人肺腺癌顺铂敏感细胞株A549的miRNA表达谱存在显著差异,与A549细胞株相比较,A549/DDP细胞株中差异表达miRNA有36个,其中表达上调的差异miRNA有24个,表达下调的差异miRNA有12个。(2)A549细胞株DDP处理组与A549细胞株间miRNA表达谱存在显著差异,与A549细胞株相比较,A549细胞株DDP处理组与A549细胞株间差异表达miRNA有111个,其中表达上调的差异miRNA有68个,表达下调的差异miRNA有43个。(3)A549细胞株CUR处理组与A549细胞株间miRNA表达谱存在显著差异,与A549细胞株相比较,A549细胞株CUR处理组与A549细胞株间差异表达miRNA有13个,其中表达上调的差异miRNA有10个,表达下调的差异miRNA有3个。(4)A549细胞株DDP+CUR处理组与A549细胞株间的miRNA表达谱存在显著差异,与A549细胞株相比较,A549细胞株DDP+CUR处理组与A549细胞株间差异表达miRNA有109个,其中表达上调的差异miRNA有58个,表达下调的差异miRNA有51个。(5)A549/DDP细胞株DDP处理组与A549/DDP细胞株间的miRNA表达谱存在显著差异,与A549/DDP细胞株相比较,A549/DDP细胞株DDP处理组与A549/DDP细胞株间差异表达miRNA有99个,其中表达上调的差异miRNA有70个,表达下调的差异miRNA有29个。(6)A549/DDP细胞株CUR处理组与A549/DDP细胞株间的miRNA表达谱存在显著差异,与A549/DDP细胞株相比较,A549/DDP细胞株CUR处理组与A549/DDP细胞株间差异表达miRNA有14个,其中表达上调的差异miRNA有10个,表达下调的差异miRNA有4个。(7)A549/DDP细胞株DDP+CUR处理组与A549/DDP细胞株间的miRNA表达谱存在显著差异,与A549/DDP细胞株相比较,A549/DDP细胞株DDP+CUR处理组与A549/DDP细胞株间差异表达miRNA有145个,其中表达上调的差异miRNA有75个,表达下调的差异miRNA有70个。miRNA对肺癌细胞顺铂耐药的调控是一个由多种miRNAs共同参与的复杂生物过程。结论:(1)姜黄素显著增强A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。(2)姜黄素显著增强A549/DDP细胞体内移植瘤对顺铂敏感性,增强顺铂对A549/DDP细胞移植瘤的生长抑制作用。(3)肺腺癌细胞顺铂耐药、姜黄素逆转肺腺癌顺铂耐压作用与多种miRNAs差异表达密切相关。
【图文】：

存活率,细胞株,细胞,顺铂

图 1.1.1 A549 及 A549/DDP 细胞在不同浓度 DDP 作用下细胞存活率的比较表 1.1.7 相同浓度顺铂对 A549 与 A549/DDP 细胞株体外存活率的比较顺铂浓度(μg/ml)细胞株 P 值A549 A549/DDP0 100±7.07 100±4.25 11 74.66±1.38 90.49±2.89 0.0012 41.21±1.23 81.93±3.11 0.0004 35.03±0.73 56.90±1.74 0.0008 20.42±0.68 46.42±2.91 0.00016 17.12±1.31 45.50±3.46 0.00032 11.83±0.56 36.59±3.31 0.00064 0.45±0.15 33.06±2.15 0.000

存活率,姜黄素,细胞,抑制作用

天津医科大学博士学位论文一、姜黄素联合顺铂对肺腺癌细胞存活、增殖和凋亡的影响（见图 1.1.2），A549 和 A549/DDP 细胞株在 0μM、1.5625μM、3.25μM、6.5μM、12.5μM、25μM、50μM、100μM 姜黄素组间处理的体外存活率经卡方检验比较均无显著性差异（P>0.05）（见表 1.1.8）。结果表明：姜黄素对 A549 和 A549/DDP 细胞存活率有抑制作用，抑制效应均随姜黄素浓度增加而增强，呈剂量依赖性，，对 A549 和A549/DDP 细胞生存率抑制作用无明显差异。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R734.2

【参考文献】