同一观察者对乳腺癌Ki67免疫组化检测结果判读重复性研究

发布时间：2020-04-10 21:14

【摘要】：[目的]Ki67免疫组织化学指数是乳腺癌分子分型的关键指标,也是是否对乳腺癌进行细胞毒药物治疗的重要依据。但由于目前传统判读方法的局限性,导致不同观察者之间的判读结果或同一观察者在不同的时间判读结果重复性差。本课题通过对现有判读方法的改进,建立基于数字图像分析的Ki67免疫组织化学指数判读方法,并研究同一观察者使用上述方法判读乳腺癌Ki67免疫组化染色结果的重复性,为乳腺癌分子分型和个体化治疗提供科学依据。[方法]1、建立基于数字图像分析的乳腺癌Ki67免疫组织化学指数判读新方法:热点区域设定面积自动计数(Demarcating-square Automatic Counting In Hot Spot,DACHS)、多区域设定面积自动计数(Demarcating-square Automatic Counting In Multiple Spot,DACMS)、热点区域设定面积人工计数(Demarcating-square Manual Counting In Hot Spot,DMCHS)。2、对30例乳腺癌标本进行Ki67免疫组化染色和数字切片扫描。3、同一观察者在10个不同的时间,采用上述判读方法对30例数字切片进行Ki67指数判读。4、同一观察者在10个不同时间采用热点区域显微镜下人工计数(Manual Counting Under Microscope InHotSpot,MCUMHS)对30例免疫组化染色切片进行判读。5、对不同判读方法获得数据用R语言统计学分析其一致性以及离散程度,比较不同判读方法的可重复性。[结果]一、本实验30例乳腺癌Ki67免疫组化数字切片中,有热点区切片25例,占比83%;25例有热点区切片中19例为热点区散在分布,6例为热点区集中分布。热点区分布于肿瘤组织浸润性边缘为11例,热点区分布于肿瘤组织中为14例;热点区的最大径9980 μm,最小径47 μm,4例病理切片热点区直径小于100μm,10例病理切片热点区直径在100-200 μm之间,11例病理切片热点区直径200 μm。二、100×100 μm2面积大小的一个判读框覆盖肿瘤细胞数为57个左右;200×200μm2面积大小的一个判读框覆盖肿瘤细胞数为180个左右;300×300μm2面积大小的一个判读框覆盖肿瘤细胞数为640个左右。三、同一观察者采用热点区域设定面积自动计数所得的Ki67评估值的标准差小于多区域设定面积自动计数,说明热点区域设定面积自动计数的离散程度小于多区域设定面积自动计数。四、热点区域设定面积自动计数:设定判读框面积为200×200 μm2,300×300 μm2的热点区域,ICC值分别是0.964和0.977;多区域设定面积自动计数:设定判读框面积为200×200 μm2，300×300 μ m2的多区域自动计数,ICC值分别是0.853和0.880;热点区域设定面积人工计数:设定判读框面积为200×200μ m2,300×300μm2热点区域人工计数,ICC值分别是0.926和0.973;热点区域显微镜下人工计数的ICC值是0.832。五、由离散程度分布图,可以得到热点区域显微镜下人工计数离散程度大于热点区域设定面积自动计数。六、由均数士标准差可知,离散程度由大到小的排序为:热点区域显微镜下人工计数热点区域200×200 μm2人工计数热点区域200×200 μm2自动计数热点区域300×300 μm2人工计数热点区域300×300 μm2自动计数。[结论](1)建立的乳腺癌Ki67免疫组化检测结果判读方法的可重复性均符合要求,其中可重复性最好的是热点区域设定面积为300X 300 μm2的自动计数。(2)热点区域设定面积人工计数可以人为避免热点区域设定面积自动计数中因计算机的识别错误而导致的错误计数。(3)传统的热点区域显微镜下人工计数由于标本量大,判读者易视觉疲劳且容易漏掉计数以及重复计数肿瘤细胞,不建议临床病理科医生使用。
【图文】：

２．邋４．邋２面积设定选择逡逑每例数字切片分别下三个判读框，热点区域为Ｋｉ６７肿瘤阳性细胞最为集中逡逑的区域，可以位于同一个热点区内，也可位于不同的热点区内（图２）。逡逑图２：热点区域选择。Ａ：若切片中热点区域足够大（可放置３个判读逡逑框）时，选择一个肿瘤阳性细胞数最为集中的区域下３个判读框逡逑？逡逑图２：热点区域选择。Ｂ：若切片中热点区域不够大时，则再选择第２逡逑或第３个阳性细胞集中的区域分别下框，共设３个判读框逡逑１６逡逑

２．邋４．邋２面积设定选择逡逑每例数字切片分别下三个判读框，热点区域为Ｋｉ６７肿瘤阳性细胞最为集中逡逑的区域，，可以位于同一个热点区内，也可位于不同的热点区内（图２）。逡逑图２：热点区域选择。Ａ：若切片中热点区域足够大（可放置３个判读逡逑框）时，选择一个肿瘤阳性细胞数最为集中的区域下３个判读框逡逑？逡逑图２：热点区域选择。Ｂ：若切片中热点区域不够大时，则再选择第２逡逑或第３个阳性细胞集中的区域分别下框，共设３个判读框逡逑１６逡逑
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.9

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 石乐娟;贾小婷;罗利云;柳柏林;郑国沛;;LncRNA RP11-316M1.12促进乳腺癌细胞侵袭转移[J];中国医师杂志;2018年11期

2 刘倩;金红艳;何为;葛四平;田勇;赵能刚;;乳腺癌组织微小RNA-218-5p的表达及其临床意义[J];临床肿瘤学杂志;2018年12期

3 高嘉悦;;乳腺癌的治疗现状及展望[J];中国新通信;2019年02期

4 郭奕阳;朱彩虹;郭秀娟;;人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌与抗人表皮生长因子受体2新型药物[J];河北医科大学学报;2018年01期

5 闫东;;人表皮生长因子受体3在人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌组织中的表达[J];肿瘤基础与临床;2017年06期

6 张青;甘淋;;乳腺癌生物标志物的研究进展[J];生命的化学;2018年01期

7 张斌;梁爱玲;刘勇军;;外泌体在乳腺癌中耐药机制的研究进展[J];中国医药生物技术;2018年02期

8 张国强;刘增艳;王晓红;杨振林;;血清微小RNA-409-3p表达在乳腺癌早期诊断中的价值[J];江苏医药;2018年04期

9 王晨飞;胡浩霖;吕建鑫;张亚男;;乳腺癌侵袭相关分子的研究热点[J];东南大学学报(医学版);2018年04期

10 童彤;;草莓能抑制乳腺癌扩散[J];中国果业信息;2017年05期

相关会议论文 前10条

1 钱明;黄剑浜;肖杨;郑海荣;;利用高频超声刺激探究乳腺癌细胞侵袭性[A];2016年全国声学学术会议论文集[C];2016年

2 杨永长;黄文芳;刘华;肖代雯;姜伟;;乳腺癌细胞核差异蛋白筛选[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年

3 陆劲松;邵志敏;吴炅;韩企夏;沈镇宙;;新型维甲酸抑制乳腺癌细胞的生长及诱导凋亡的机制研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

4 白霞;傅建新;丁凯阳;王兆钺;阮长耿;;组织因子途径抑制物-2在乳腺癌细胞中的表达研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

5 戴建建;章静茹;陈峰;马道新;纪春岩;;EGFR抑制剂对乳腺癌细胞生物学活性的影响[A];中华医学会血液学分会第十三届全国血栓与止血学术会议暨“血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展”论文摘要汇编及学习班讲义[C];2011年

6 李俊;缪苏宇;李晓敏;束永前;王水;殷咏梅;;肿瘤坏死因子-α对乳腺癌细胞CD44表达的调控以及影响细胞迁徙的机制探讨[A];2010’全国肿瘤分子标志及应用学术研讨会暨第五届中国中青年肿瘤专家论坛论文汇编[C];2010年

7 ;不同分子量肝素对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响(英文)[A];第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2012年

8 汲振余;李懿;范丹丹;;膜骨架蛋白4.1N负调控乳腺癌细胞的粘附、迁移及侵袭[A];2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2013年

9 赵丽;曹英林;;降钙素体外抑制乳腺癌细胞的作用[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

10 赵丽;曹英林;;降钙素体外抑制乳腺癌细胞的作用[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

相关重要报纸文章 前10条

1 记者 闫洁;我学者发现乳腺癌侵袭转移新机制[N];中国科学报;2012年

2 本报记者 王建影;乳腺癌确诊后应先做分型[N];健康报;2019年

3 记者 张梦然;妊娠34周以上可降低乳腺癌风险[N];科技日报;2018年

4 本报记者 黄辛 通讯员 王广兆;最“毒”乳腺癌开启精准治疗时代[N];中国科学报;2019年

5 记者 张梦然;转移乳腺癌细胞休眠不死之谜破解[N];科技日报;2018年

6 本报记者 刘霞;大数据算法在诸多领域“弄潮”[N];科技日报;2017年

7 南方日报记者 严慧芳 通讯员 宋莉萍;长期喝蜂王浆会致癌？[N];南方日报;2017年

8 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年

9 ;专家发现抑制DNA修补可杀死乳腺癌细胞[N];中国高新技术产业导报;2005年

10 记者 毛磊;乳腺癌干细胞被美专家发现[N];新华每日电讯;2003年

相关博士学位论文 前10条

1 左百乐;HER3靶向HRG1β-CAR-T细胞的制备及其对乳腺癌杀伤作用[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年

2 李国印;TGF-β信号通过关键lncRNAs多层次调控SNAI2促进乳腺癌细胞上皮—间质转化[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年

3 韩琳琳;乳腺癌中NDRG1基因异常甲基化分析及BRCA1基因CpG岛甲基化特异位点对转录活性的影响[D];青岛大学;2013年

4 夏阳;靶向ASBEL的反义核苷酸在三阴性乳腺癌联合治疗中的应用[D];北京工业大学;2018年

5 韩娜;新型分子探针~(11)C和~(18)F标记PI3K抑制剂GDC-0941在乳腺癌中应用价值研究[D];华中科技大学;2018年

6 张尊月;tmTNF-α诱导乳腺癌细胞对阿霉素耐受的分子机制以及靶向tmTNF-α的流感病毒特异性CAR-T细胞对乳腺癌的杀伤效应[D];华中科技大学;2018年

7 乔龙;SEMA4C介导肿瘤淋巴转移和作为乳腺癌生物标志物的研究[D];华中科技大学;2018年

8 蔡琳琳;柴桂龙牡汤改善Luminal型乳腺癌患者生活质量及对MCF-7细胞株影响的研究[D];中国中医科学院;2018年

9 赵建华;MRI动态增强联合钼靶在乳腺癌早期诊治临床路径中的价值研究[D];南方医科大学;2017年

10 李俊堂;miR-568抑制乳腺癌细胞体内外转移机制的研究[D];第四军医大学;2014年

相关硕士学位论文 前10条

1 李倩倩;二维斑点追踪技术评价蒽环类化疗药物剂量对乳腺癌患者心功能的影响[D];青岛大学;2014年

2 严青;17β-雌二醇上调胱硫醚-β-合成酶表达促进MCF-7乳腺癌细胞迁移的机制研究[D];广州医科大学;2018年

3 吴玮依;乳腺癌脑转移细胞靶向肽BRBP1结合相关蛋白分子的鉴定[D];东南大学;2018年

4 王哲;PRMT5通过调控乳腺癌细胞干性促进乳腺癌阿霉素耐药性的机制研究[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年

5 陈雄;Exo70自身聚合的关键序列及其在乳腺癌细胞迁移过程中的作用[D];厦门大学;2017年

6 孟庆杰;三阴性乳腺癌IL-17基因Real-time qPCR检测法的建立与应用[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年

7 杜光远;Nrf2通过代谢重编程及Notch信号通路调控乳腺癌增殖和迁移[D];北京工业大学;2018年

8 张晓菲;三阴性乳腺癌细胞表面的HER1和c-Met单分子电镜成像研究[D];北京工业大学;2018年

9 杨丹丹;针对乳腺癌细胞检测的功能纳米粒子制备及相应分析方法构建[D];东南大学;2018年

10 赵学美;磁靶向光动力多功能纳米传递系统用于乳腺癌可视化治疗研究[D];厦门大学;2017年

本文编号：2622710