LncRNA-SNHG17通过抑制P15、P16促进胃癌细胞增殖、迁移

发布时间：2020-04-20 04:21

【摘要】：背景胃癌(Gastric Cancer,GC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,居消化系统肿瘤之首。胃癌在中国、日本、拉丁美洲、东欧等国发病率较高,全球每年约有72万人死于胃癌。近年来,随着早期胃癌诊断率提高及治疗方式进步,胃癌总体生存率有所改善,但进展期胃癌患者远期生存率仍有待提高。胃癌发生、发展是由多基因参与、多步骤的复杂过程,原癌基因激活、抑癌基因失活均与肿瘤发生、发展相关。胃癌相关基因研究有望寻找早期胃癌的生物标志物,有助于制定更有针对性的治疗策略,从而提高患者生存率。人类基因组组学研究表明,仅有不到2%的RNA可被翻译成蛋白质。不具有蛋白编码能力的RNA被称为非编码RNA(nocoding RNA,ncRNA),其中长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA。LncRNA在肿瘤的发生、发展过程中具有重要作用,如LncRNA可通过沉默细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor,CKI),使周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CKI)对细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)的负性调控作用降低或完全丧失从而促进肿瘤细胞的增殖、迁移。文献提示LncRNA-SNHG17在结直肠癌中表达增加,并通过抑制P57表达,促进结直肠癌增殖、迁移。但LncRNA-SNHG17在胃癌中的作用及机制尚不清楚。本研究拟通过细胞学试验、裸鼠成瘤实验等研究LncRNA-SNHG17在胃癌组织中的表达、作用及其机制。方法1.实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测正常胃黏膜上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BGC-823与BGC-803中LncRNA-SNHG17、P15、P16、P18与P19的表达水平。检索TCGA数据库验证LncRNA-SNHG17在胃癌组织和癌旁组织中是否具有差异性。2.设计干扰序列下调胃癌细胞LncRNA-SNHG17表达,研究LncRNA-SNHG17对胃癌细胞P15、P16、P18及P19表达的影响。3.平板克隆实验、细胞周期实验、细胞凋亡实验、Western blot、裸鼠成瘤实验研究LncRNA-SNHG17对胃癌细胞增殖的影响;Transwell实验研究LncRNA-SNHG17对胃癌细胞迁移的影响。结果1.与正常胃黏膜上皮细胞和正常胃组织相比,胃癌细胞及胃癌组织LncRNA-SNHG17表达显著增加。2.LncRNA-SNHG17促进胃癌细胞增殖、迁移。3.下调LncRNA-SNHG17后胃癌细胞P15、P16的表达显著升高,而P18、P19表达无明显变化。4.下调LncRNA-SNHG17可促进胃癌细胞凋亡、细胞周期阻滞在G1/G0期、细胞周期蛋白依赖性激酶-4(CDK4)含量减少。结论Lnc RNA-SNHG17在胃癌组织及胃癌细胞中表达增加,且通过下调P15、P16的表达促进胃癌细胞增殖迁移。LncRNA-SNHG17参与胃癌发生发展过程,有望成为胃癌防治新靶点。
【图文】：

胃癌细胞,和胃,癌组织,胃癌组织

图 1．胃癌细胞和胃癌组织中 LncRNA-SNHG17 表达显著升高。（A）qRT-PCR 研究显示 LncRNA-SNHG17 在胃黏膜上皮细胞 GES-1 中含量最低，，与 GES-1 相比，胃癌细胞 AGS、SGC7901、BGC803、BGC823 中表达均显著升高（**：P<0.01）。（B）TCGA 数据分析显示胃癌组织中 LncRNA-SNHG17 表达显著升高（P<0.01）。

胃癌细胞,序列,迁移能力,医科

南京医科G17 表达（图 2）。平板克隆实验表明，LncRNA-SN7901 细胞克隆形成数显著低于对照组（P<0.01）（图示 LncRNA-SNHG17 沉默后，AGS 和 SGC7901 胃组（图 3B）。Transwell 迁移实验结果显示沉默 Lnc SGC7901 胃癌细胞迁移能力显著下降（图 3C）。综G17 可抑制胃癌细胞增殖、迁移能力。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.2

【参考文献】