MicroRNA-1207-5p在结直肠癌中作用的研究

发布时间：2020-05-13 09:06

【摘要】：目的:检测结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中miR-1207-5p的表达水平,分析miR-1207-5p的表达与结直肠癌患者临床病理特征以及预后之间的关系。再通过细胞转染建立异常表达miR-1207-5p的细胞模型,分析miR-1207-5p对结直肠癌细胞系生物学行为的影响,为结直肠癌诊断、治疗以及相关研究提供新的靶点。方法:1.miR-1207-5p在结直肠癌组织及细胞系中的表达提取组织及细胞系中的总RNA,采用荧光定量PCR的方法检测40例患者结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-1207-5p的相对表达量,同时检测miR-1207-5p在HCT116、SW480和SW620三种结直肠癌细胞系中的相对表达量。2.miR-1207-5p与结直肠癌患者临床病理学特征及预后之间的关系收集40例结直肠癌患者的临床病理资料,并对患者进行术后随访。分析miR-1207-5p的相对表达量与患者临床病理学特征以及预后之间的关系。3.miR-1207-5p对结直肠癌细胞系SW480生物学行为的影响利用阳离子脂质体方法,将miR-1207-5p mimics以及相应的NC(mimics control)转染至SW480中,利用荧光定量PCR验证转染效果,并对异常表达miR-1207-5p的细胞模型进行CCK-8实验、克隆形成实验、划痕实验、细胞周期检测等相关细胞学实验,并分析miR-1207-5p对SW480生物学行为的影响。4.统计学分析用SPSS 22.0统计软件进行数据统计分析,用Graph Pad Prism5软件进行相关图表的制作。miR-1207-5p的相对表达量用2-ΔΔCT值衡量,采用配对样本t检验(Wilcoxon Matched Pairs Test)分析结直肠癌组织及配对正常组织中miR-1207-5p的表达量,采用独立样本t检验(Student’s t-test)分析细胞系中miR-1207-5p的表达量。miR-1207-5p表达量与患者临床病理学特征之间的关系用χ2检验分析。患者术后生存状况用Kaplan-Meier生存曲线分析,miR-1207-5p的表达量与患者术后生存状况之间的关系用log-rank test检验分析。本研究所涉及的检验均为双侧检验,检验水准α=0.05,P0.05时认为差异具有统计学意义。结果:1.miR-1207-5p在结直肠癌组织和细胞系中的表达40例患者结直肠癌组织及其配对正常组织中,miR-1207-5p在结直肠癌组织中相对表达量(mean±SD:0.0546±0.0131)显著低于癌旁正常组织(mean±SD:0.1928±0.0317,P0.01)。将正常组织中miR-1207-5p的表达量标准化为1之后,miR-1207-5p在HCT116、SW480和SW620中相对表达量分别为0.1258、0.0414和0.5065,三种细胞系中miR-1207-5p的表达量与对照组相比均明显降低(P0.01)。2.miR-1207-5p与结直肠癌患者临床病理学特征及预后之间的关系依据miR-1207-5p表达量的平均值将40例患者分为相对高表达组和相对低表达组,相对低表达组的患者,肿瘤临床分期更晚、淋巴结转移阳性率更高,差异具有统计学意义(P=0.018、P=0.033)。miR-1207-5p的表达量与患者其他临床病理学特征,如年龄、性别、肿瘤位置、Dukes分期、脉管浸润、神经浸润等之间未见相关性。通过生存分析发现,相对低表达组患者具有更高死亡率,预后更差(P=0.049)。3.miR-1207-5p对结直肠癌细胞系SW480生物学行为的影响用荧光定量PCR方法证实,miR-1207-5p在转染mimics组的表达量是NC组的40倍(P0.01)。内源性上调miR-1207-5p的表达后,通过CCK-8实验发现转染组细胞的增殖能力显著降低(72h,P0.05),(96h,P0.01),通过克隆形成实验发现转染组细胞的克隆形成能力明显降低(P0.01),通过划痕实验发现转染组细胞的迁移能力显著降低(P0.01),流式细胞仪分析细胞周期发现转染组细胞S+G2期比例显著降低(P0.05),说明miR-1207-5p可能在结直肠癌的发生发展中发挥重要的抑制作用。结论:1.miR-1207-5p在结直肠癌组织中显著低表达。2.miR-1207-5p的表达量与结直肠癌患者临床分期、淋巴结转移及预后显著相关。3.miR-1207-5p抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移,减慢细胞周期进程。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.3

【参考文献】