循环肿瘤标志物与DTC碘-131摄取及预后的相关性研究

发布时间：2020-05-14 03:50

【摘要】：第一部分:循环非编码RNAs与乳头状甲状腺癌肺转移灶碘-131摄取功能及预后的相关性研究研究目的最新研究表明:循环长链非编码Lnc RNAs(Long non-coding RNAs:Lnc RNAs)作为一种简单有效、非侵袭性的生物标志物在鉴别诊断良恶性肿瘤、预测恶性肿瘤转移或复发、评估肿瘤治疗疗效及预后等方面具有重要临床价值。然而与乳头状甲状腺癌(Papillary thyroid carcinoma:PTC)肺转移碘-131(~(131)I)摄取及预后相关的生物标志物研究至今仍未见报道。本研究通过筛选和验证PTC肺转移灶~(131)I摄取阳性组及~(131)I摄取阴性组血浆差异表达Lnc RNAs,以评价循环Lnc RNAs预测PTC肺转移灶~(131)I摄取功能及预后的临床价值。研究方法本研究收集在我科行~(131)I治疗的204例PTC肺转移患者血浆作为研究对象;依据PTC肺转移灶是否具有~(131)I摄取功能分为两组:~(131)I摄取阳性组和~(131)I摄取阴性组;首先通过配对法选取~(131)I摄取阳性组和~(131)I摄取阴性组患者血浆各5例;利用Aaystar Lnc RNA芯片3.0检测两组血浆中Lnc RNAs的表达谱差异,并对差异表达Lnc RNAs进行聚类和统计学分析;然后,通过实时定量荧光PCR(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR)法在剩余患者血浆样本中对差异表达Lnc RNAs进行验证,以发现最有价值的Lnc RNAs;最后,利用Kaplan Meier法分析循环Lnc RNAs作为循环肿瘤标志物评价PTC肺转移患者预后的临床价值。研究结果基因芯片分析发现:相比于肺转移灶~(131)I摄取阳性组,在~(131)I摄取阴组血浆中,共有1006种Lnc RNAs表达上调,705种Lnc RNAs表达下调(P0.05和差异倍数2倍具有统计学意义);随后,通过q RT-PCR对芯片结果进行验证,发现Lnc RNAs(ENST00000462717和ENST00000415582)在~(131)I摄取阴性组患者血浆中的表达明显上调,而Lnc RNAs(TCONS_00024700和NR_028494)在~(131)I摄取阴性组中的表达明显下调(P0.05)。采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic:ROC)曲线分析显示:Lnc RNAs(ENST00000462717、ENST000004155824 TCONS_00024700和NR_028494)预测PTC肺转移灶~(131)I摄取阴性组的敏感性和特异性的最佳切点分别是432、328、34和42;曲线下面积(Area under the curve:AUC)分别是0.890、0.936、0.975和0.918。生存分析显示:高表达Lnc RNAs(ENST00000462717和ENST00000415582)的PTC肺转移患者10年生存率较差,而高表达Lnc RNAs(TCONS_00024700和NR_028494)的PTC肺转移患者10年生存率相对较好(P0.001)。研究结论本研究结果提示,循环Lnc RNAs ENST00000462717、ENST00000415582、TCONS_00024700和NR_028494可作为简单有效、非侵袭性血浆肿瘤标志物预测PTC肺转移灶~(131)I摄取功能及患者预后,对于指导DTC术后碘-131治疗具有潜在临床价值和应用前景。Lnc RNAs作为稳定的PTC血浆肿瘤标志物的临床价值还需前瞻性大样本临床试验进一步验证。第二部分:CTC与分化型甲状腺癌远处转移、碘-131难治性状态及预后的相关性研究研究目的循环肿瘤细胞(Circulating tumor cell:CTC)作为一种全新的肿瘤标志物已在多种肿瘤的辅助诊断、术后随访、复发监测、微转移灶的早期发现、疗效及预后评估、个体化诊疗等方面已开展广泛的临床研究。然而,传统的阳性富集法(Cell Search系统)检测DTC远处转移患者外周血CTC的敏感性较低;本研究使用阴性富集法检测DTC患者的外周血CTC数目,并探讨CTC数目与DTC远处转移患者临床病理特征及预后的相关性。研究方法本研究共纳入了72例DTC患者;抽血前所有入组患者均未行~(131)I治疗;抽取DTC远处转移患者外周血7.5ml用于CTC的检测;使用免疫磁珠阴性富集法联合免疫荧光原位杂交技术检测CTC的数目。肿瘤细胞的判定标准:检测恶性肿瘤细胞细胞核数目异常或检测到上皮粘附因子(Epithelial cell adhesion molecule:Ep CAM)。研究结果在72例DTC患者中,可检测出CTC者62例(86.11%),共检出CTC数目527个。受试者工作特征(Receiver operating characteristic:ROC)曲线显示:诊断DTC远处转移的CTC最佳切点数目为4.5,此时的敏感性为64.3%,特异性为83.8%,AUC为0.789,95%置信区间(CI)为:0.685 0.893。伴远处转移的DTC患者检出CTC的平均数目明显高于不伴远处转移的DTC患者和正常对照组者。不伴远处转移DTC患者检出CTC平均数明显高于正常对照组(P=0.0016、P0.001和P0.001)。单因素及多因素分析显示:预测DTC远处转移的最佳切点值为CTC数目≥5。ROC曲线显示:诊断~(131)I难治性分化型甲状腺癌(Radioiodine-refractory differentiated thyroid cancer:RR-DTC)的CTC最佳切点数目为6.5,此时的敏感性为73.7%%,特异性为69.6%,AUC为0.781,95%CI为:0.635 0.928。单因素及多因素分析显示:CTC预测RR-DTC的最佳切点值为CTC数目≥7。生存分析显示:当CTC数目≥7时,DTC患者的无进展生存期(Progression-free survival:PFS)明显缩短;Cox’s风险模型分析显示:CTC数目≥7可作为独立预后因子预测DTC远处转移患者的预后。研究结论本研究结果提示,CTC数目≥5与DTC患者的远处转移存在明显相关性,CTC数目≥7与DTC患者出现~(131)I难治性状态及预后存在明显相关性。CTC检测用于指导DTC术后~(131)I治疗及评估相预后具有潜在临床价值和应用前景,后续的前瞻性大样本多中心临床研究有利于进一步验证本研究结果。
【图文】：

聚类分析

散点图,散点图

散点图：左侧红点代表不摄取131I组上调＞2倍，，右侧红点代表在摄取131I组上调
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R736.1

【参考文献】