负性共刺激分子VISTA在肝细胞肝癌中的表达及其临床价值的研究

发布时间：2020-05-15 10:32

【摘要】：【目的】采用免疫组织化学的方法研究含免疫球蛋白V区的T细胞活化抑制子(VISTA)在肝细胞肝癌(HCC)组织标本中的表达及其临床意义。【方法】1.第一部分:收集2006年1月至2012年12月解放军福州总医院经外科手术切除且病肝经病理确诊为HCC病例,具有完整病理临床资料及随访信息,同时排除因其他肿瘤、外界因素或术后重症感染等并发症致死的病例,共计338例。以338例HCC为实验材料,制备肝癌及癌旁组织的组织芯片,并应用EliVision~TMM plus IHC染色方法观察VISTA的表达,分析其与患者临床病理因素之间的关系以及对HCC患者预后的影响。2.第二部分:探讨HCC肿瘤微环境中CD8、Foxp3的表达情况及其与HCC临床病理特征的关系和预后,并分析VISTA蛋白与CD8、Foxp3的相关性。3.第三部分:观察ZEB1蛋白在HCC组织中的表达情况,探讨其与临床病理因素及患者预后之间的关系,并分析与VISTA蛋白的相关性。【结果】1.VISTA在HCC肿瘤细胞、间质淋巴细胞以及血管内皮细胞阳性表达率分别为16.27%(55/338)、100%(338/338)、89.05%(301/338);VITSA在HCC肿瘤细胞中表达水平高于正常肝组织;2.肝癌间质淋巴细胞中VISTA的表达与肿瘤大小、脉管侵犯、肿瘤分化程度、T分期、血清AFP水平相关(P0.05);与年龄、性别、肿瘤包膜完整、乙肝病毒感染、门静脉侵犯、肿瘤数量、远处转移、术后复发转移和肝硬化无相关性(P0.05)。HCC肿瘤细胞中VISTA蛋白表达与临床病理参数均无相关性(P0.05)。3.338个病例5年回顾分析发现,VISTA低表达组的总生存率明显高于高表达组(P0.05);VISTA低表达组的无复发生存率与VISTA高表达组无统计学差异(P0.05)。4.CD8、Foxp3在肿瘤间质淋巴细胞的阳性表达率分别为97.63%(330/338)、88.16%(298/338)。HCC间质淋巴细胞中CD8蛋白的表达与肿瘤包膜完整、肿瘤大小、脉管侵犯、肿瘤分化程度、T分期相关(P0.05)。HCC间质淋巴细胞中Foxp3蛋白的表达与脉管侵犯、门静脉侵犯、术后复发转移、乙型肝炎病毒感染相关(P0.05)。5.338例HCC患者中,Foxp3高表达患者的5年总生存率明显低于Foxp3低表达组(P=0.0005);CD8低表达患者的5年总生存率明显低于CD8高表达组(P=0.0037)。VISTA低表达而CD8高表达的患者显示预后较好,而VISTA高表达而CD8低表达的患者预后差。VISTA蛋白和Foxp3蛋白共同低表达时患者显示预后好。VISTA蛋白和Foxp3蛋白低表达而CD8高表达时患者显示预后好。VISTA蛋白高表达和CD8低表达,Foxp3蛋白无论高表达还是低表达时,患者预后均较差。6.对338例HCC的多因素分析显示,肿瘤分化程度、脉管侵犯、门静脉侵犯、VISTA高表达、Foxp3高表达是患者死亡的独立危险因素。7.338例HCC组织中ZEB1的阳性表达率为24.85%(84/338),对应的正常肝组织的阳性表达率为0.59%(2/338)。HCC组织中ZEB1的表达与年龄、脉管侵犯、乙型肝炎病毒感染、T分期、血清AFP水平相关(P0.05)。8.ZEB1阴性患者的5年生存率明显高于ZEB1阳性组(P0.05);两组间的无复发生存率无统计学差异(P0.05)。9.VISTA表达与ZEB1表达呈正相关关系(P0.05)。【结论】HCC组织中VISTA主要表达于肝癌间质淋巴细胞中,肿瘤细胞表达率较低,且与临床病理参数无相关性。HCC间质淋巴细胞中VISTA、CD8、Foxp3的表达和癌细胞ZEB1表达与多个临床病理参数相关;HCC间质淋巴细胞中VISTA高表达,CD8低表达、Foxp3高表达、ZEB1高表达与肿瘤的侵袭进展有关,并且与患者预后不良有关。当VISTA蛋白高表达伴CD8低表达时,患者预后明显较差。而VISTA蛋白低表达、CD8高表达同时伴Foxp3蛋白低表达时,患者的总体生存率明显高于其他组别,显示患者预后较好;三者的表达对患者预后有一定的提示作用。VISTA表达与ZEB1表达具有正相关性。
【图文】：

患者,中位,淋巴细胞,阈值确定

1.4 HCC 组织中 VISTA 蛋白的表达与肝癌患者预后的关系338 例 HCC 患者术后随访至少五年，截止至 2017 年 12 月 31 日，随访时间为1~129 个月，中位随访时间为 63 个月；无复发生存期随访中位时间 31 个月(1~129个月)，复发时间为术后 1～50 个月。分别按照上文所述每 mm2淋巴细胞和每 100个淋巴细胞中 VISTA 阳性表达阈值确定两种方法下的 High组、Low组，采用Kaplan-Meier 法计算 5 年总生存率、无复发生存率，Log-rank 检验进行单因素分析。结果显示：VISTA低表达组（Low组）的 5年总生存率均明显高于高表达组（High组）（P＜0.05）（图 2A-B）；而两组间的无复发生存率无统计学差异（P>0.05，图 2C-D）。

患者,中位,淋巴细胞,阈值确定

1.4 HCC 组织中 VISTA 蛋白的表达与肝癌患者预后的关系338 例 HCC 患者术后随访至少五年，截止至 2017 年 12 月 31 日，，随访时间为1~129 个月，中位随访时间为 63 个月；无复发生存期随访中位时间 31 个月(1~129个月)，复发时间为术后 1～50 个月。分别按照上文所述每 mm2淋巴细胞和每 100个淋巴细胞中 VISTA 阳性表达阈值确定两种方法下的 High组、Low组，采用Kaplan-Meier 法计算 5 年总生存率、无复发生存率，Log-rank 检验进行单因素分析。结果显示：VISTA低表达组（Low组）的 5年总生存率均明显高于高表达组（High组）（P＜0.05）（图 2A-B）；而两组间的无复发生存率无统计学差异（P>0.05，图 2C-D）。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.7

【参考文献】