伯舒替尼对肝癌细胞的放疗增敏效果研究

发布时间：2020-05-16 17:36

【摘要】：目的:探讨伯舒替尼(Bosutinib)对肝癌细胞Hep G2的放疗增敏效果及其可能的机制,为临床上提高肝癌的放疗效果提供实验依据。方法:实验设计为单纯药物组、单纯放疗组(2Gy)、单纯放疗组(4Gy)药物+放疗组(2Gy)和药物+放疗组(4Gy);采用CCK-8法检测,选取两个时间点(24h、48h)检测不同药物浓度与不同放射剂量对人肝癌细胞Hep G2的抑制作用;进一步通过细胞克隆实验观察细胞存活情况。最后用流式细胞仪检测各组的细胞周期。应用统计软件SPSS22.0处理数据,运用多元相关方法、方差分析方法,分析各因素对人肝癌细胞Hep G2的抑制作用以及各因素之间的作用。结果:1.单纯药物组的肝癌细胞Hep G2的生长抑制率,作用24h、48h后分别为1000n M/ml、600n M/ml。细胞存活分数有时间-剂量效应,方差分析结果显示,当药物浓度大于200 n M/ml后的药物浓度和作用时间的差异具有统计学意义(P0.05)。放疗剂量、伯舒替尼浓度均对人肝癌细胞Hep G2的生长有抑制作用,而且药物浓度和放疗剂量具有协同作用。通过分析肝癌细胞的抑制率与伯舒替尼浓度、时间的相关性、放疗剂量,结果发现,生长抑制率受放疗剂量、伯舒替尼浓度、作用时间的影响,呈正相关关系,数据结果通过分析均有统计学意义(P0.05)。实验的结果提示伯舒替尼对肝癌细胞株Hep G2的生长抑制率有显著的影响,在肝癌细胞体外培养实验中显示出增敏效应,同时增敏效果随着放疗剂量越大更加明显。2.细胞克隆实验中,伯舒替尼药物浓度设定为100n M/ml时候,单纯伯舒替尼药物联合放疗后对人肝癌细胞Hep G2的生长增殖起到较强的抑制作用,随着放疗剂量的增加,伯舒替尼药物联合放疗对Hep G2细胞的增殖抑制作用更加明显。3.不同药物浓度处理24、48h后,检测细胞的周期分布,发现随着药物浓度和作用时间的增加,细胞G1、G2、S期所占比例均发生了变化。随着伯舒替尼药物浓度增加在作用24h内检测,细胞周期中的S期所占细胞周期的百分比逐渐减少,通过作用时间的增加,即48h后,S期所占细胞周期的比例降低的更加明显。伯舒替尼联合放疗后,检测各细胞周期所占百分比,结果经过分析后均具有统计学意义(P0.05)。肝癌细胞周期的分布改变更加明显。结论:伯舒替尼可以明显的抑制肝癌细胞生长,伯舒替尼药物联合放疗对Hep G2细胞的增殖有更加明显的抑制作用。伯舒替尼具有较强的放疗增敏作用,其作用机制可能是通过改变细胞周期时相的分布实现。
【图文】：

图 3 不同浓度药物作用 24h、48h 后 CCK-8 检测的细胞存活分数表 4 单纯药物组、放疗 2Gy、4Gy 后单纯放疗组与药物+放疗组后 CCK-8 检的 SF 值方差分析表比较（x士s n=3）2Gy 4Gy24h P 值 48h P 值 24h P 值 48h P 值药物组0.8066 士0.01520.000 0.7165 士0.03590.0000.8067 士0.01520.000 0.7165 士0.03590.000放疗组0.9464 士0.00780.001 0.9083 士0.01540.0000.9038 士0.00840.000 0.8675 士0.01150.000物+放疗0.7118 士0.03110.000 0.6937 士0.00740.000 0.6284 士0.00150.000 0.5574 士0.01460.000表 5 放疗 2Gy 时不同浓度的作用 24h、48h 后 CCK-8 检测的 SF 值方差分析表x 士 s n=3）浓度 nM/ml 作用时间 24h P 值 作用 48h P 值

环境下的培养箱中培养。将培养 10-14d 后的细胞按照步骤 2 计算细胞克隆数，整理并分析实验结果。2.3.实验结果伯舒替尼药物在不同浓度作用 10 天后，首先选择显微镜计算大于 50 个细胞的细胞团，大于 50 个细胞的细胞团算做是一个细胞克隆，然后计数每个细胞培养皿中细胞的克隆数，，我们发现细胞培养皿内，细胞的克隆数值随伯舒替尼药物的浓度增加而减少（见图 7）。在伯舒替尼药物浓度设定为 100nM/ml 时候,单纯伯舒替尼药物联合放疗后，实验结果发现药物联合放疗对人肝癌细胞 HepG2的生长增殖起到良好的抑制作用，另外，随着放疗剂量的增加，伯舒替尼药物联合放疗对 HepG2 细胞的增殖抑制作用更加明显（见图 8）。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.7

【参考文献】

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本文编号：2667078