白血病抑制因子受体在结直肠癌中的表达及临床意义

发布时间：2020-06-02 23:55

【摘要】：目的:研究白血病抑制因子受体(leukemia inhibitory factor receptor,LIFR)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织与正常组织中的表达水平的差异,并分析其与临床病理特征的相关性,探讨其在CRC中的作用及临床意义。方法:随机收集2016年10月至2017年4月在本院行结肠癌和(或)直肠癌手术的39例患者的肿瘤组织,同期另取15例癌旁正常组织为对照。采用免疫组织化学方法测定LIFR在CRC组织及正常组织中的分布及蛋白表达水平,并分析其表达水平高低与临床病理特征的关系。采用Western Blot进一步检测LIFR在CRC中的表达水平。采用实时定量PCR(Real time quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)测定LIFR在CRC组织及正常组织中m RNA表达水平差异。取对数生长期的结肠癌细胞株(Lo Vo,SW620),通过慢病毒转染,构建LIFR表达稳定上调的结肠癌细胞株(Lo Vo-LV-LIFR、SW620-LV-LIFR)与阴性对照组(Lo Vo-LV-NC,SW620-LV-NC),进行细胞划痕实验、细胞增殖实验,进一步检测LIFR在CRC中的作用。结果:1.免疫组化的结果显示,LIFR在CRC组织中有不同程度表达,阳性染色主要定位于细胞膜。39例CRC组织中有28例(71.8%)LIFR因子低表达,而15例正常结直肠组织中有14例(93%)为高表达。2.临床病理特征分析发现,LIFR的低表达与CRC的TNM分期和淋巴结转移有相关性(P0.05),而与CRC患者的性别、年龄以及肿瘤大小无相关性(P0.05)。3.在Western Blot中,15例正常组织中有14例(93%)LIFR呈高表达。39例CRC组织中有28例(71.8%)LIFR为低表达。4.RT-PCR结果显示,LIFR在CRC中表达水平明显低于正常组织(0.003±0.00469vs0.021±0.00531),两者比较差异有统计学意义(P0.05)。5.划痕实验表明,Lo Vo细胞株中,慢病毒转染后LIFR表达上调组细胞的24小时愈合速度低于相应阴性对照组细胞(Lo Vo-LV-LIFRvs Lo Vo-LV-NC,0.551±0.043vs1.000±0.044,P0.01);在SW620细胞株中,慢病毒转染后LIFR表达上调组细胞的24小时愈合速度同样低于相应阴性对照组细胞(SW620-LV-LIFRvs SW620-LV-NC,0.631±0.032vs1.000±0.036,P0.01)。6.细胞增殖实验结果显示,Lo Vo细胞株中,慢病毒转染后LIFR表达上调组细胞在培养第4天的吸光度要低于对照组(Lo Vo-LV-LIFRvs Lo Vo-LV-NC,0.581±0.025vs0.731±0.004,P0.05);SW620细胞株中,慢病毒转染后LIFR表达上调组细胞在培养第4天的吸光度同样要低于对照组(SW620-LV-LIFRvs SW620-LV-NC,0.564±0.013vs0.697±0.032,P0.05)。结论:1.LIFR在结直肠癌组织中表达水平降低,表明其参与结直肠癌的进展。2.LIFR在结直肠癌患者中的低表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移相关,而与患者的性别、年龄和肿瘤大小无相关性。3.LIFR在结直肠癌的进程中起抑癌作用,可以抑制癌细胞的增殖、迁移。
【图文】：

免疫组化,双盲法,因子,结直肠癌

结果白血病抑制因子受体在结直肠癌中的表达及临床意义结果1 免疫组化检测 CRC 组织中 LIFR 的表达情况免疫组化法检测 LIFR 因子在 CRC 组织中的表达，由 2 位经验丰富的病理科医师以双盲法阅片。阳性染色为棕黄色或棕褐色。免疫组化评分=染色强度×阳性细胞百分比。以 0~3 分为低表达，，大于 3 分为高表达。结果显示，阳性染色主要定位于细胞膜上，部分在胞浆染色。39 例中 CRC 组织中有 28 例（71.8%）LIFR 因子低表达，而 15 例正常组织中有 14 例（93%）为高表达（图 1）。

正常组织

2151841121231361etastasis 1722131547lot 检测 CRC 组织中 LIFR 的表达情况lot 法检测 39 例 CRC 组织及对照组 15 例正常组织中 LIF结果显示，15 例正常组织中有 14 例（93.0%）LIFR 呈 28 例（71.8%）LIFR 为低表达（图 2）。这表明 LIFR关。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.34

【参考文献】