去甲斑蝥素阻滞肾癌细胞周期并促进其凋亡

发布时间：2020-06-03 21:57

【摘要】：目的通过研究去甲斑蝥素对肾癌细胞(ACHN、786-O)的凋亡和周期的影响,探讨其潜在的抗肿瘤机制。方法我们使用细胞增殖实验(MTS)研究去甲斑蝥素处理肾癌细胞后对肾癌细胞增殖能力的调控作用;另外,我们使用流式细胞术检测细胞周期与凋亡情况;Western Blot实验研究细胞周期和凋亡相关蛋白的改变。结果我们用不同浓度的去甲斑蝥素(0,10,50,100,500,800μM)分别处理肾癌细胞(ACHN和786-O)0,24,48,72,96小时,结果发现去甲斑蝥素可以显著性抑制肾细胞癌ACHN和786-O细胞的生长并且具有明显的时间和浓度依赖性,在24h时,100μM的去甲斑蝥素能显著性抑制肾癌细胞(786-O和ACHN)的增殖。另外,我们分别用0μM、10μM、100μM、200μM的去甲斑蝥素处理肾癌细胞24小时后,流式细胞术发现100μM的去甲斑蝥素可以显著性阻滞肾癌细胞周期于G2/M期;为了进一步证实去甲斑蝥素对肾癌细胞周期的影响,我们通过Western Blot实验研究对P21、cyclinB1、pCDC2、CDC2、pCDC25C、CDC25C等细胞周期相关蛋白表达的影响,发现去甲斑蝥素可以显著性抑制cyclinB1的表达、促进P21、pCDC25C和pCDC2的表达、而对CDC2和CDC25C表达没影响。更进一步,通过Annexin V/PI染色发现去甲斑蝥素可以显著性促进肾癌细胞的凋亡并且抑制凋亡相关蛋白caspase-9、caspase-3和PARP的表达、促进凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表达。结论本研究结果表明去甲斑蝥素可通过调节细胞周期和凋亡相关蛋白诱导肾癌细胞G2/M期阻滞并促进其凋亡,进而起到抗肿瘤的作用。
【学位授予单位】：宁波大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.11

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