MiRNA-125b抑制食管鳞癌细胞增殖并诱导细胞凋亡的相关机制研究
发布时间：2020-06-21 14:49
【摘要】：研究目的:探讨微小 RNA-125b(miR-125b)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)增殖及细胞凋亡中的作用。明确miR-125b与候选靶点bcl-2修饰因子(bcl-2 modification factor,BMF)之间的调控关系。探讨miR-125b/BMF途径对食管癌诊断的意义。材料与方法:1.根据研究要求选择66例ESCC癌组织和对应癌旁组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-125b在组织中的表达水平,同时结合临床病理资料及预后行相关性分析。2.检测miR-125b在人食管癌细胞109(EC109)和人食管癌细胞9706(EC9706)2种食管癌细胞系及正常食管上皮细胞中的本底表达。3.将合成miR-125b阴性对照(NC)或miR-125b模拟物或相应抑制物转染进入EC109和EC9706食管癌细胞系,用细胞计数Kit-8(CCK8)检测miR-125b模拟物和抑制物转染ESCC细胞系后发生的变化。流式细胞术检测转染后细胞周期和凋亡的变化。4.体外实验验证miR-125b在ESCC中的作用,将EC 109细胞转染miR-125b模拟物及NC并注射到裸鼠中,注意观察它们的变化,定期称重,注意瘤块变化,了解生长状况。根据结果绘制瘤体体积增长曲线和体质量曲线。采用组织学和免疫组织化学法检测裸鼠瘤块体积、重量以及肿瘤组织Ki-67表达等情况。5.通过生物信息学软件Target Scan寻找miR-125b的潜在靶基因。鉴定BMF为候选靶基因。6.使用沉默BMF(si-BMF)转染EC109和EC9706细胞,采用qRT-PCR和western blot检测转染后BMF表达,并用CCK-8检测细胞增殖情况,Western blot分析BMF沉默与细胞凋亡的关系。评估ESCC患者组织和ESCC细胞系中BMF的表达情况,分析miR-125b与BMF水平之间的关系。结果:1.在ESCC癌组织和细胞系中,miR-125b表达显著降低,并且miR-125b的降低与患者淋巴转移明显相关。2.MiR-125b过表达显著抑制细胞生长,诱导细胞凋亡,增加人食管癌细胞109和人食管癌细胞9706细胞周期的G1期。3.过表达miR-125b显著抑制体内肿瘤生长。4.BMF是miR-125b调控人食管癌细胞109和人食管癌细胞9706细胞增殖、凋亡和细胞周期的功能靶点。结论:1.MiR-125b在ESCC中显著下调,具备成为ESCC具有淋巴结转移的诊断潜能。2.MiR-125b通过靶向BMF显著抑制食管鳞癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.1
【图文】：
为５丨．５０邋９．４７％。这说明￡（：１０９细胞转染0１r溃保玻担保磕Ｄ馕锖螅蛲鱿赴棵麇义舷栽黾印＃脱荆恚椋遥保玻担饽Ｄ馕铮颍椋康模牛茫梗罚埃断赴攵哉兆橄啾龋赴麇义贤鲈黾樱种疲恚椋遥玻担庠蛳灾档拖赴蛲觯ㄍ迹矗粒＝徊椒治隽说蛲鱿噱义瞎氐柏В桑拢幔ⅲ拢悖欤病ⅲ悖幔螅穑幔螅澹场ⅲ穑玻返谋泶铮簦椋必觥Ｔ谡猓恋摆嘭校攵哉兆橄噱义媳龋茫恚椋遥欤玻担饽Ｄ庾镜模牛茫保埃购停牛茫梗罚埃断赴蟹⑾郑持执俚蛲龅鞍祝拢幔㈠义希悖幔螅穑幔螅澹澈停穑玻飞系鳌Ｈ欢谧荆恚椋遥保玻担馔赌馕锏南赴校沟蛲龅鞍族义希拢悖欤蚕灾碌鳌４送猓蚕赴荆恚椋遥欤玻担庖种萍潦保玫剑喾吹慕峁ｅ义弦虼耍币种疲恚椋遥欤玻担獗泶锸贝俚蛲龅鞍姿⒉废碌鳎沟蛲龅鞍姿缴系鳎ㄍ煎义希矗拢
本文编号：2724218
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.1
【图文】：
为５丨．５０邋９．４７％。这说明￡（：１０９细胞转染0１r溃保玻担保磕Ｄ馕锖螅蛲鱿赴棵麇义舷栽黾印＃脱荆恚椋遥保玻担饽Ｄ馕铮颍椋康模牛茫梗罚埃断赴攵哉兆橄啾龋赴麇义贤鲈黾樱种疲恚椋遥玻担庠蛳灾档拖赴蛲觯ㄍ迹矗粒＝徊椒治隽说蛲鱿噱义瞎氐柏В桑拢幔ⅲ拢悖欤病ⅲ悖幔螅穑幔螅澹场ⅲ穑玻返谋泶铮簦椋必觥Ｔ谡猓恋摆嘭校攵哉兆橄噱义媳龋茫恚椋遥欤玻担饽Ｄ庾镜模牛茫保埃购停牛茫梗罚埃断赴蟹⑾郑持执俚蛲龅鞍祝拢幔㈠义希悖幔螅穑幔螅澹澈停穑玻飞系鳌Ｈ欢谧荆恚椋遥保玻担馔赌馕锏南赴校沟蛲龅鞍族义希拢悖欤蚕灾碌鳌４送猓蚕赴荆恚椋遥欤玻担庖种萍潦保玫剑喾吹慕峁ｅ义弦虼耍币种疲恚椋遥欤玻担獗泶锸贝俚蛲龅鞍姿⒉废碌鳎沟蛲龅鞍姿缴系鳎ㄍ煎义希矗拢
本文编号：2724218
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/2724218.html
