POLD3在肝癌中的表达及临床意义分析

发布时间：2020-06-23 04:44

【摘要】：目的:肝细胞性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是原发性肝癌中最常见的类型,是全球最常见的恶性肿瘤之一,该肿瘤的发病机制仍是该研究领域的热点问题。DNA聚合酶δ3(DNA polymerase delta3,POLD3)是DNA聚合酶δ(DNA polymerase delta,POLD)的第三个亚基,在POLD参与的各项生命活动中处于重要的地位。目前研究提示POLD3表达紊乱与多种肿瘤的形成有着直接关系,能够确定的是POLD3突变体能够增加结直肠癌、胃腺癌和卵巢癌等肿瘤的发病风险。然而,有关POLD3与肝癌之间的关系如何,至今为止国内外文献报道甚少。本课题拟通过蛋白印迹(western blotting,WB)、免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)、实时定量多聚酶链反应(real-time quantitative polymerase chainreaction,RT-qPCR)检测肝癌肿瘤组织及肝癌细胞中POLD3的表达情况,分析POLD3基因的表达对HCC分化、增殖的影响。方法:(1)收集2012年1月至2017年6月在右江民族医学院附属医院住院且符合要求的HCC病例;在收集的石蜡标本及新鲜肝癌组织及癌旁组织中进行POLD3表达水平的分析;同时收集患者的有关临床病理资料。常规培养人肝癌细胞SMCC-7721及人肝细胞QSG-7701。(2)通过IHC检测POLD3蛋白在肝癌组织与癌旁组织中的表达情况,分析肝癌组织中POLD3的表达与HCC临床病理参数之间的关系。(3)通过WB、RT-qPCR分别检测2种细胞株中POLD3蛋白和mRNA的表达水平,使用t检验分析POLD3蛋白和mRNA在2种细胞株中的表达差异。(4)通过RT-qPCR检测POLD3mRNA在12例新鲜肝癌组织与癌旁组织中的表达情况,使用t检验分析POLD3mRNA在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异。结果:(1)当前研究共收集到134例符合要求的HCC患者,男性和女性分别为115例(85.82%)和19例(14.18%)。按Edmondson分级法进行分级:I-II级为高分化肝细胞肝癌98例(73.13%),III-IV级为中低分化肝细胞肝癌36例(26.87%)。(2)与癌旁组织相比较,POLD3蛋白在肝癌肿瘤组织中的表达下降,二者差异具有统计学意义(P=0.023);体外细胞学结果与之相一致。(3)与癌旁组织相比较,POLD3mRNA在肝癌肿瘤组织中的表达下降,二者差异具有统计学意义(P0.001);体外细胞学结果与之相一致(P=0.003)。(4)POLD3的表达受肝癌肿瘤大小的影响,肿瘤直径越大其表达水平越低,差异具有统计学意义(P=0.017)。(5)POLD3的表达受肝癌肿瘤组织学分化程度的影响,肿瘤分化程度越低其表达水平越低,差异具有统计学意义(P=0.001)。结论:POLD3在肝癌肿瘤组织中表达下调,这种表达下调与肝癌的组织学分化程度及肿瘤的大小相关。
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.7
【图文】：

形态学,图像

HE 染色结果分析前述的研究对象标本均经 HE 染色后进行分析和通过病理学确诊为Edmondson 标准分级法：I-II 级为高分化肝细胞性肝癌共 98 例，镜型性，胞浆中颗粒显著，胞核增大，核染色深浅不一，核浆比例增梁状、假腺样结构，可见少许细胞病理性核分裂象；III-IV 级为中共 36 例，镜下观：癌细胞出现结构和细胞形态的异型性很大，胞则，核分裂像多、排列成梁状、实性巢状。肝硬化：弥漫性肝小叶结的纤维结缔组织将肝组织分为大小不等的圆形或椭圆形的肝细胞团块时癌旁组织伴随着慢性肝炎改变及门脉内出现癌栓，镜下观如图所

肝组织,免疫组化,肝癌组织,性表达

21图 2 各组肝组织免疫组化的表达情况（X100）LD3 在癌旁组织中阳性表达；B：POLD3 在癌旁组织阴性表达；C：POLD3 在肝阳性表达；D：POLD3 在肝癌组织中阴性表达。）Figure 2 Immunohistochemical expression of liver tissue in each group.（X10OLD3 is positive expression in paracancerous tissues; B: POLD3 is negative in paraca; C: POLD3 is positive expression in hepatocellular carcinoma; D：POLD3 is negativetissues.）34 例临床病例中 POLD3 在肝癌组织中的阳性表达率为 14.93%、在癌旁达率为 26.12%。与癌旁组织相比较，POLD3 在肝癌组织中的表达降低统计学意义（ 2=5.147，P=0.023）（见表 2-1、图 3）。

【参考文献】