脑转移瘤中Musashi1及Numb的表达及意义

发布时间：2020-07-01 03:47

【摘要】：目的:通过检测脑转移瘤中肿瘤干细胞标志物Musashi1(Msi1)及Numb的表达情况,探讨二者在脑转移瘤发生发展中的作用,进一步明确肿瘤干细胞在脑转移瘤形成中的作用,以期为脑转移瘤发病的分子生物学机制提供新的思路与方向。方法:1选取51例经手术切除的脑转移瘤标本,29例原发肿瘤标本,15例正常人脑组织标本。一部分置于10%福尔马林溶液中固定,常规制作蜡块保存;另一部分在新鲜状态下放入-80℃低温冰箱中保存。2设定脑转移瘤组与原发肿瘤组为实验组,正常脑组织组为对照组。采用免疫组织化学SP法及逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法分别对Msi1与Numb蛋白及mRNA在各组织中进行检测。每张切片随机取10个高倍视野,在高倍镜(×400)下依据染色强度分数进行半定量分析;对电泳图像中的目的基因mRNA表达水平进行半定量分析,测定目的基因灰度值,以内参GAPDH的OD值标化目的基因的OD值,作为相对表达量,进行统计学分析。3收集所有患者的详细资料,应用统计软件SPSS21.0对实验数据进行统计学分析,计量资料用t检验,计数资料用χ2检验,等级资料用Spearman相关分析进行检验,连续变量资料用Pearson相关分析进行检验,以上均为双侧检验,以P0.05表示差异具有统计学意义。结果:1 Msi1蛋白及mRNA在不同组织中表达情况免疫组化结果显示:Msi1蛋白在脑转移瘤、原发肿瘤及正常脑组织中的阳性表达率分别为60.8%(31/51)、65.5%(19/29)及13.3%(2/15)。其中Msi1蛋白在脑转移瘤与原发肿瘤间的表达差异不明显,不具有统计学意义(P0.05);Msi1蛋白在脑转移瘤中的表达显著高于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(P0.05);Msi1蛋白在原发肿瘤中的表达显著高于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05)。Rt-pcr结果显示:msi1mrna在脑转移瘤、原发肿瘤及正常脑组织中的相对表达量分别为0.78±0.50、0.60±0.36及0.38±0.29。其中msi1mrna在脑转移瘤与原发肿瘤间的表达差异不明显,不具有统计学意义(p0.05);msi1mrna在脑转移瘤中的表达显著高于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05);msi1mrna在原发肿瘤中的表达显著高于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05)。2 Numb蛋白及mrna在不同组织中表达情况免疫组化结果显示:numb蛋白在脑转移瘤、原发肿瘤及正常脑组织中的阳性表达率分别为33.3%(17/51)、31.0%(9/29)及73.3%(11/15)。其中numb蛋白在脑转移瘤与原发肿瘤间的表达差异不明显,不具有统计学意义(p0.05);numb蛋白在脑转移瘤中的表达显著低于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05);numb蛋白在原发肿瘤中的表达显著低于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05)。Rt-pcr结果显示:numbmrna在脑转移瘤、原发肿瘤及正常脑组织中的相对表达量分别为0.34±0.21、0.47±0.31及2.42±1.82。其中numbmrna在脑转移瘤与原发肿瘤间的表达差异不明显,不具有统计学意义(p0.05);numbmrna在脑转移瘤中的表达显著低于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05);numbmrna在原发肿瘤中的表达显著低于在正常脑组织中的表达,差异具有统计学意义(p0.05)。3 Msi1与numb在脑转移瘤中表达相关性分析在脑转移瘤组织中,蛋白表达经spearman相关性分析,msi1蛋白与numb蛋白的表达呈负线性相关(r=-0.258,p0.05);基因表达经pearson相关性分析,msi1基因与numb基因mrna相对表达呈负线性相关(r=-0.345,p0.05)。4 Msi1与numb在脑转移瘤中的表达与患者临床病理资料间的分析Msi1与numb在脑转移瘤中的表达情况与患者的性别、年龄及组织来源均无关(均p0.05)。结论:1Msi1蛋白及mrna在脑转移瘤及原发肿瘤中高表达;numb蛋白及mrna在脑转移瘤及原发肿瘤中低表达,说明二者表达异常可能在脑转移瘤形成过程中发挥重要作用。2Msi1与Numb在脑转移瘤及原发肿瘤中呈负线性相关,推测Msi1与Numb在脑转移瘤发生中可能存在调控机制。3肿瘤干细胞标志物Msi1在脑转移瘤及原发肿瘤中高表达,推测肿瘤干细胞可能在脑转移瘤中存在。4Msi1与Numb在脑转移瘤中的表达与患者的性别、年龄及组织来源无关。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R739.41

【参考文献】