Sunitinib抑制免疫细胞因子的研究

发布时间：2020-07-26 21:25

【摘要】：目的:肿瘤的免疫治疗是在化疗和放疗之后,治疗肿瘤的又一种有效手段。随着近几年对肿瘤免疫治疗手段的不断尝试和优化,现今,肿瘤免疫治疗已经成为临床上的重要治疗方法之一。虽然相较于传统方法,肿瘤免疫治疗的毒性和对患者机体损伤已经有了很大改变,但是不可避免会存在一定的副作用,细胞因子风暴就是其中较为严重的问题之一。如何兼顾肿瘤治疗疗效和降低细胞因子风暴的风险成为一种新的解决思路。舒尼替尼是一种多靶点的酪氨酸激酶抑制剂,是经批准的上市抗肿瘤靶向药。经实验发现舒尼替尼可以抑制免疫细胞的炎性因子产生,将经免疫激动剂诱发的多种炎性细胞因子水平抑制在正常范围内。这一发现为肿瘤免疫治疗的药物安全性提供了一种新的思路。本次实验首次对舒尼替尼抑制炎性因子的能力进行了普遍性验证,对舒尼替尼在动物个体上对细胞因子风暴的抑制和保护能力进行探索;最终根据药物特性对舒尼替尼和天然免疫通路,对舒尼替尼抗免疫细胞因子机制进行了探索。结果:在我们的研究中发现,无论在体内还是体外,舒尼替尼均能对炎性细胞因子产生抑制。在体外实验中,舒尼替尼在小鼠的脾淋巴细胞、小鼠的髓源单核细胞、以及人源T细胞水平上由免疫激动剂强化的炎性细胞因子均有抑制作用;另一方面,舒尼替尼对多种天然免疫激发的炎性细胞因子也同样具有抑制作用,其中包括TLR4、TLR5、TLR7、TLR7/8、TLR9几种类型的激动模拟的炎性细胞因子的引发;在体内实验中,实验发现舒尼替尼可以显著提高细胞因子风暴模型小鼠的生存期,降低小鼠外周血中的炎性细胞因子,保护建模小鼠的组织器官;最后实验结果显示,舒尼替尼对炎性细胞因子的作用与TLR-Myd88、TLR-MAPK、PDGFR-MAPK通路有关,PDGFR通过对P-ERK以及P-AKT作用来影响TLR-Myd88的作用,从而影响炎性细胞因子分泌。结论:舒尼替尼能显著的抑制炎性细胞因子的产生,延长细胞因子风暴小鼠的生存周期且减小组织损伤,这一过程与PDGFR通过对P-ERK以及P-AKT的调控影响TLR-Myd88的作用有关。
【学位授予单位】：深圳大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R730.51
【图文】：

炎性细胞因子,抑制比,抑制效果

3.1 多种 TKI 的免疫抑制作用对比以及舒尼替尼的给药浓度选择为了研究酪氨酸激酶抑制剂和免疫之间的关系，首先我们筛选了市面上已经投入使用的 11 种 TKI 进行测试，结果如下图 1A 所示，并根据抑制效果的程度不同，对不同 TKI 抑制效果进行标注，并且选择其中抑制效果最好的舒尼替尼进行进一步实验。选定舒尼替尼作为实验药物之后，要为后面的效果实验进行准备工作，为了选定实验用舒尼替尼的浓度，我们对舒尼替尼的安全剂量范围以及抑制效果与浓度之间的关系进行实验。由图 1B 数据且经计算可以得到，舒尼替尼细胞实验的 IC50 值为 21.14。图 1C 数据中，我们做了浓度和抑制效果之间的相互关系，由图可知，当舒尼替尼浓度大于 2μM 时，将会有 75%的细胞因子被抑制产生，同时当舒尼替尼的浓度为 2μM 时，不会对细胞造成大量杀伤，故此我们根据上述结果，选择使用 2μM 的舒尼替尼来进行后续实验。

Sunitinib抑制免疫细胞因子的研究

为不同

炎性细胞因子,脾淋巴细胞,多因子,抑制效果

Sunitinib 抑制免疫细胞因子的研究浓度舒尼替尼对脾淋巴细胞被 TLR7 激动剂免疫后产生白介素 6 因子的抑制作用。图 1C 为舒尼替尼浓度依赖的正常细胞的杀伤作用。3.2 舒尼替尼抑制炎性细胞因子的具体作用实验验证了舒尼替尼对免疫细胞的炎性细胞因子产生具有抑制效果，进而对舒尼替尼的这种效果做进一步探索和广谱性分析。首先我们使用脾细胞进行实验，向其中加入模拟细菌感染过程的 TLR4 激动剂 LPS 以及模拟病毒感染过程的 TLR7 激动剂两种，而后加入合适浓度的舒尼替尼，经过 24 小时刺激，我们吸取细胞培养上清进行 ELISA 测试其中细胞因子，结果如下图 2 所示。

【参考文献】