芪冬颐心口服液防治化疗心脏毒性及其改善心气虚证的研究

发布时间：2020-09-27 17:00

　　 1研究目的通过基础实验结合临床试验,深入探讨芪冬颐心口服液对恶性肿瘤患者化疗后心脏毒性的保护作用,明确其的保护作用机制及物质基础,以及对化疗后心气虚证的改善作用,借以发展和创新化疗药物心脏毒性的中医药防治理论与内涵,指导中医药干预化疗药物心脏毒性临床应用。2研究方法2.1基础研究实验一:选取90只雄性BALB/c小鼠随机分为6组:空白对照组、阿霉素模型组、右丙亚胺阳性药组、芪冬颐心口服液10ml/kg剂量组(临床等效剂量)、芪冬颐心口服液25ml/kg剂量组、芪冬颐心口服液50ml/kg剂量组,每组15只。BALB/c小鼠空白对照组及阿霉素模型组给予蒸馏水灌胃,芪冬颐心口服液各剂量组给予不同剂量的芪冬颐心口服液灌胃。给药7天后,右丙亚胺阳性药组腹腔注射右丙亚胺200mg/kg。一小时后除空白对照组外,其余5组均腹腔注射阿霉素15mg/kg,再饲养14天。观察指标:①心功能相关指标:第14天监测实验各组小鼠超声心动图、心电图、心肌酶水平并记录。通过监测实验各组小鼠超声心动、心电图变化情况及心肌酶活性,评价芪冬颐心口服液对ADM心脏毒性心功能的保护作用。②心肌细胞损伤及凋亡相关指标:造模第14天取小鼠心脏进行心肌组织HE染色、TUNEL凋亡检测、心肌组织凋亡蛋白caspase3/9、Bcl-2、Bax的westernblot分析并记录,探讨芪冬颐心口服液对ADM心肌细胞损伤及凋亡的保护作用。实验二:选取90只S180荷瘤小鼠随机分为6组:肿瘤对照组、阿霉素组(阿霉素1mg/kg)、芪冬颐心口服液10ml/kg与阿霉素联合用药组、芪冬颐心口服液25ml/kg与阿霉素联合用药组、芪冬颐心口服液50ml/kg与阿霉素联合用药组、阳性对照组(右丙亚胺200mg/kg),每组15只。正常对照组、阿霉素治疗组灌胃给予纯净水;芪冬颐心口服液各组灌胃给予不同剂量的芪冬颐心口服液;阳性对照组腹腔注射右丙亚胺200mg/kg。连续给药7天停药,再注射阿霉素12天。观察指标:①抑瘤率相关指标:第7天、第9天、第12天动态检测实验各组小鼠肿瘤长轴、短轴长度以及瘤重。通过动态检测小鼠肿瘤体积及重量变化,探讨芪冬颐心口服液对阿霉素抑瘤作用的影响。②心功能相关指标:造模前、造模第12天监测实验各组小鼠超声心动图、心电图、心肌酶水平并记录。通过监测实验各组小鼠超声心动、心电图变化情况及心肌酶活性,评价芪冬颐心口服液对ADM心脏毒性心功能的保护作用。③心肌细胞损伤及凋亡相关指标:第12天取小鼠心脏进行心肌组织HE染色、TUNEL凋亡检测、心肌组织凋亡蛋白caspase3/9、Bcl-2、Bax的westernblot分析并记录,探讨芪冬颐心口服液对ADM心肌细胞损伤及凋亡的保护作用。2.2临床研究采用中央随机对照、多中心临床试验方法,将符合纳入标准的恶性肿瘤化疗后心气虚证的患者通过中央随机分为芪冬颐心口服液组、生脉饮组。芪冬颐心口服液组(试验组)服用吉林通化白山药业股份有限公司生产的中成药芪冬颐心口服液(人参、麦冬、黄芪、茯苓、金银花、淫羊藿、紫石英、龟甲、生地、郁金、桂枝、丹参、炒枳壳),每次2支,每日3次。生脉饮组(对照组)服用同仁堂股份有限公司生产的中成药制剂生脉饮(党参、麦冬、五味子),每次1支,每日3次。干预14天统计相关治疗结果。对比不同访视点的心气虚证相关症候积分,观察芪冬颐心口服液对恶性肿瘤化疗后心气虚证相关指标的影响,探讨芪冬颐心口服液对恶性肿瘤化疗后心气虚证的改善作用。3研究结果3.1基础研究3.1.1心功能指标研究结果实验一:①超声心动图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组与给药剂量依赖性地提高左室横轴缩短率、心脏射血分数、舒张期左室容积;芪冬颐心口服液50ml/kg组与模型组比较,差异有统计学意义(p0.01);右丙亚胺组心功能水平升高,与模型组比较,差异有统计学意义(p0.01)。②心电图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组呈剂量依赖性的降低心电图S-T段,增加心率,与模型组比较,差异有统计学意义(p0.01);芪冬颐心口服液50ml/kg组与右丙亚胺组比较,差异有统计学意义(p0.05)。③心肌酶:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液剂量依赖性地降低小鼠血清LDH、CK、AST检测值,差异有统计学意义(p0.01);右丙亚胺组降低心肌酶活性优于芪冬颐心口服液各剂量组,差异有统计学意义(p0.01)。实验二:①超声心动图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组与给药剂量依赖性地提高左室横轴缩短率,心脏射血分数,舒张期左室容积及左室实际重量LV Mass(AW);芪冬颐心口服液50ml/kg组与模型组比较,差异有统计学意义(p0.01);右丙亚胺组心功能水平升高,与模型组比较差异有统计学意义(p0.05)。②心电图:与阿霉素模型组比较,芪冬颐心口服液组呈剂量依赖性的降低心电图S-T段,差异有统计学意义(p0.01);右丙亚胺组显著降低心电图S-T段,与模型组比较,差异有统计学意义(p0.01);实验各组对小鼠心率无影响。③心肌酶:芪冬颐心口服液剂量依赖性地降低小鼠血清LDH、CK、AST检测值,两组比较,有统计学意义(p0.01);芪冬颐心口服液50ml/kg组降低LDH、CK作用优于右丙亚胺组组(p0.01)。3.1.2心肌细胞损伤及凋亡指标研究结果:①TUNEL检测:阿霉素可以诱导正常小鼠/荷瘤小鼠心肌细胞凋亡,芪冬颐心口服液剂量依赖性的减少心肌细胞凋亡数量。②Westernblot检测:阿霉素组凋亡蛋白caspase3/9的表达显著增加,促凋亡蛋白Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低;芪冬颐心口服液可以剂量依赖性的降低凋亡蛋白caspase3/9的表达,增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。3.1.3抑瘤作用研究结果.:第12天,阿霉素组小鼠肿瘤长轴、短轴长度明显下降,瘤重明显下降,与对照组比较,差异有统计学意义(p0.01);芪冬颐心口服液25ml/kg与阿霉素合用组、芪冬颐心口服液50ml/kg与阿霉素合用组,小鼠肿瘤长轴、短轴、瘤重明显下降,与对照组、阿霉素组比较,有统计学意义(P0.01)。3.2临床研究3.2.1试验组组内单症候积分指标对比结果:试验组在用药后心悸、乏力、气短、汗出、失眠均有改善。乏力症状积分:访视点一及后续访视点与基线对比,差异有统计学意义(P0.01);汗出、失眠单症状积分统计,访视点二及访视点三与基线对比,差异有统计学意义(P0.01);心悸、气短单症状积分统计,访视点三与基线对比,差异有统计学意义(P0.01)。3.2.2组间单症候积分指标对比结果:①单症候积分改善情况研究结果:气短、乏力、汗出单症状积分改善情况,试验组显著优于对照组,差异有统计学意义(P0.01);失眠单症状积分改善方面,试验组优于对照组间,差异有统计学意义(P0.05);心悸积分改善方面,两组间无统计学差异(P0.05)。②单症候有效性研究结果.:乏力、汗出方面,试验组有效性显著优于对照组,差异有统计学意义(P0.01);气短、失眠方面,试验组优于对照组间,差异有统计学意义(P0.05);心悸方面,两组间无统计学差异(P0.05)。3.3.3组间总积分指标对比结果:两组间在基线及各访视点总积分无统计学差异(P0.05);两组总积分改善情况无统计学差异(P0.05)。3.3.4两组症候积分线性变化趋势分析结果:①两组各单项症状积分、总积分,以访视时间为变化因素,均呈显著性下降趋势(P0.01);②气短、乏力积分变化曲线,两组间对比,具有统计学差异(P0.05);③心悸、汗出、失眠积分变化曲线,量组间对比,无统计学差异(P0.05);④两组总积分变化曲线,组间对比,具有统计学差异(P0.01)。3.3.5安全性指标:试验组安全性指标试验前后对比,无统计学差异(P0.05)。4研究结论4.1基础研究:芪冬颐心口服液对阿霉素具有增效减毒作用。芪冬颐心口服液可以剂量依赖性的改善阿霉素心脏毒性相关心功能减低(包括左室短轴缩短率(FS%),心脏射血分数(EF%),舒张期左室容积(LVVd)、左室实际重量(LV Mass)、收缩末期左室容积(LVVs))、心电图异常(包括心率减慢、ST-T段改变)、心肌酶升高(LDH、CK、AST)、心肌细胞损伤及凋亡(包括Caspase3、Caspase9、Bcl-2、Bax表达异常);芪冬颐心口服液50ml/kg组与右丙亚胺在阿霉素的心脏保护作用方面基本一致;芪冬颐心口服液与阿霉素联合应用,具有协同抑瘤作用,优于阿霉素单独应用。4.2临床研究:芪冬颐心口服液可以有效改善化疗药物心脏毒性相关心气虚证,对乏力症状改善效果最有效、快速,在5天内即具可见显著的改善效果;对气短、汗出、失眠、心悸的症状改善均具有显著效果。芪冬颐心口服液对于化疗后血小板计数方面具有一定的潜在改善作用。
【学位单位】：北京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R730.5
【部分图文】：

左室,实际重量,舒张期,短轴

（ｐ＜０．０Ｔ）。逡逑３．邋２心肌功能检测结果逡逑实验各组心肌功能检测结果见图２邋（组图）。逡逑ｃｏｎｔ逦逦逦ＤＯＸ＋ＱＤ１０（ｍ＿逡逑ＢＢＢ邋ｌｕｉｉｉ邋ＩｂＭ邋ｉｉｉｉｉｉ逡逑ｍｍｒｎＭＢＳＢｔｉ邋V邋ｚ邋Vｙ邋V邋ｖ，逡逑ＤＯＸ＋２５（ｍｌ／ｋｇ）逦ＤＯＸ＋５０（ｍｌ／ｋｇ）逦ＤＯＸ＋ＤＥＸ逡逑１２９ｉ逡逑ＥＩ９９邋W邋＞＂■■■１咄逡逑＾邋＾逡逑图２．实验各组小鼠心肌功能检测结果逡逑注：与祺型对照组比较，Ｖａ颂逡逑图２表明：①阿霉素降低小鼠左室短轴缩短率（ＦＳ％），心脏射血分数（ＥＦ％），逡逑舒张期左室容积（ＬＶＶｄ）及左室实际重量（ＬＶ邋Ｍａｓｓ）。但对收缩末期左室容积（ＬＶＶｓ）逡逑无显著影响。②芪冬颐心口服液组与给药剂量依赖性地提高左室横轴缩短率（ＦＳ％），逡逑心脏射血分数（ＥＦ％），舒张期左室容积（ＬＶＶｄ）。其中，与模型对照组比较，逡逑５０ｍｌ／ｋｇ组作用显著，具有统计学意义（ｐ＜％仍）。但对左室实际重量（ＬＶ邋Ｍａｓｓ逡逑（ＡＷ））无作用。③与模型组比较，阳性药组对左室短轴缩短率（ＦＳ％），心脏射血分逡逑４７逡逑

心电图,小鼠,小鼠血清,组图

逡逑３．３心电图检测结果逡逑实验各组小鼠心电图检测结果见图３、图４邋（组图）。逡逑ｔｏｔ逦ＤＯＸ邋Ｄ０＿１＿ｇｌ逦．逡逑ｕ－ｉ－ｉ逦ｈＩ邋＊邋ｉｌｉ邋ｉｉｉｉｉ逡逑＿＿逦＿＿邋＿ＥＸ邋晒晒楩＂晒邋ｊ１邋ｊ｜ｌｌｌｌ逡逑／邋／／邋／／／逡逑图３．实验各组小鼠心电图检测结果逦图４．实验各组心率与ＳＴ段统计结果逡逑注：与祺型对照组峨，Ｖａ仍；ｗ逡逑上述结果表明：①阿霉素组小鼠心电图Ｓ－Ｔ段显著异常，心率减慢。②芪冬颐心逡逑口服液各剂量组呈依赖性的降低或恢复心电图Ｓ－Ｔ段，增加心率，芪冬颐心口服液逡逑５０ｍｌ／ｋｇ优于阳性药对照组。逡逑３．邋４血清心肌酶检测结果逡逑各组小鼠血清心肌酶（ＬＤＨ、ＣＫ、ＡＳＴ）检测结果见图５（组图）。逡逑１０００－．邋■＞00■逡逑Ｋ翁＋逦Ｋ翁＋逡逑人。＋７逦Ｗ邋ｆ逦Ｗ邋ｆ逡逑图５．小鼠血清心肌三海检测结果逡逑注：与模型对照组比较，＜７５，逡逑上图所示，阿霉素组小鼠血清ＬＤＨ、ＣＫ、ＡＳＴ活力明显升高，芪冬颐心口服液剂量逡逑依赖性地降低小鼠血清ＬＤＨ、ＣＫ、ＡＳＴ检测值，两组比较，有统计学意义（；？似仍）。逡逑阳性药对照组降低心肌酶活性优于芪冬颐心口服液各剂量组仍）。逡逑３．邋５心肌病理学观察逡逑实验各组心肌病理片见图６邋（组图）。逡逑４８逡逑

心电图,心率,对照组,小鼠血清

【参考文献】