岩黄连提取物对肺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤的生长及骨转移模型影响的研究

发布时间：2020-10-23 19:32

　　目的:探讨岩黄连提取物(岩黄连总碱)对人肺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤及骨转移抑制的影响。方法:(一)建立裸鼠右前肢的肺癌移植瘤动物模型及实验分组,每组6只:阴性对照组(NS 0.2ml/d,灌胃)、岩黄连提取物低剂量组(CSBTA 100mg/kg/d,灌胃)、岩黄连提取物高剂量组(CSBTA300mg/kg/d,灌胃)、顺铂组(2mg/kg,隔1d,腹腔注射)。测量小鼠右前肢瘤体体积,绘制相应生长曲线,21天后处死小鼠称量瘤重,计算抑制率;TUNEL检测凋亡情况;Western-blot检测瘤组织中增殖、凋亡相关蛋白Survivin的表达。(二)左心室注射法建立裸鼠肺腺癌溶骨性骨转移癌模型及分组,每组10只:岩黄连治疗组(CSBTA 300mg/kg/d,灌胃)、顺铂组(2mg/kg,隔1d,腹腔注射)、NS组(0.2ml/d,灌胃)。40d时行X射线检查。52d处死小鼠,ELISA检测血清骨特异性碱性磷酸酶。结果:(一)阴性对照组、岩黄连提取物低剂量组、岩黄连提取物高剂量组、顺铂组移植瘤体积分别为:(1896±130)mm3、(1467±111)mm3、(1145±113)mm3、(708±62)mm3,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.05);岩黄连组和顺铂组瘤重低于阴性对照组(P0.05),抑瘤率分别为18.35%、29.43%、49.16%;TUNEL检测岩黄连组和顺铂组的凋亡细胞多于阴性对照组,Western-blot结果显示岩黄连提取物组与顺铂组较阴性对照组Survivin蛋白表达减少,差异有统计学意义(P0.05)。(二)岩黄连提取物和顺铂可以减少骨转移,减缓骨质破坏,降低血清骨特异性碱性磷酸酶(BALP)。血清BALP含量结果:未造模正常裸鼠(1.092±0.214)mg/mL;NS组(3.255±1.050)mg/mL;岩黄连提取物组(1.963±0.639)mg/mL;顺铂组(1.385±0.504)mg/mL,用药组与NS组比较有统计学差异(P0.05)。结论:岩黄连提取物(岩黄连总碱)抑制裸鼠A549细胞移植瘤的生长,可能是通过下调Survivin而抑制瘤体生长;岩黄连提取物(岩黄连总碱)可减轻骨转移骨质破坏的程度。
【学位单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R734.2
【部分图文】：

谱图,岩黄连,脱氢,品色

2 结果2.1 岩黄连提取物 HPLC 含量测定岩黄连碱（脱氢卡维丁）对照品溶液制备：称取适量岩黄连碱对照品，加流动相，称取对照品 5mg，置于 50ml 量瓶中溶解并稀释至刻度，配制成 100μg/ml。供试品溶液制备：取岩黄连提取物 2g，精密称定，置于 50ml 容量瓶，加甲醇至刻度，超声 30min，用甲醇补足损失，摇匀，取上清液，用 0.45μm 滤膜过滤，取续滤液即得供试品溶液。

岩黄连,提取物,顺铂,低剂量

物平均峰面积为 60024.5。根据 C对/C供=A对/A供可得岩黄连提取物中岩黄连碱（脱氢卡维丁）的含量为 3.93%。2.2 皮下移植瘤模型2.2.1 成瘤情况及裸鼠一般状况皮下注射 A549 细胞悬液，裸鼠全部成活，1-2 天皮下悬液完全吸收，7-10 天可见瘤体出现，岩黄连高剂量组和顺铂组出现瘤结节稍晚，成瘤率 100%。裸鼠在接种后及用药过程中精神、活动、饮食等行为未出现明显不适。药物干预结束，处死前各组裸鼠体重为：阴性对照组（22.28±1.38）g；岩黄连提取物低剂量组（22.82±1.02）g；岩黄连提取物高剂量组（22.17±1.84）g；顺铂组（21.78±1.13）g；各组间统计学比较 P>0.05，体重无统计学差异。2.2.2 瘤体体积

裸鼠,饮水困难,恶病质,生存状态

22图 6 在药物干预期间，各组裸鼠体重曲线图各组裸鼠体重在早期均有一个升高的趋势，后期因肿瘤转移，裸鼠平均体重均降低，主要是两个方面的原因：1.肿瘤骨转移引起裸鼠行动障碍，进食饮水困难；2.同时又有肿瘤多发转移恶病质表现，故出现体重下降。动物体重作为生存质量的一个重要指标，可以反映生物体的生存状态。第 52d，各组裸小鼠死亡情况，均以距造模当日的天数统计：NS 组（第 26d 死亡一只，第 32d 死亡两只，第 42d 死亡
【参考文献】

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