多肽9R-P201对肝癌细胞HepG2的抑制及其作用机制研究
发布时间：2020-12-26 00:21
癌症已成为严重影响人类健康的一类疾病,更为有效的、与癌症密切相关靶标的寻找以及靶向抗癌药物的研发显得迫在眉睫。FoxM1作为一类广泛参与到肿瘤细胞恶性增殖、侵袭与转移、化药耐药以及不良预后等生物进程的转录激活因子,其高表达于多数癌细胞中,已成为极具潜力的癌症治疗靶标之一。本实验室前期已通过噬菌体随机十二肽库筛选技术,成功获得了对FoxM1c-DBD具有高亲和力的结合肽P201。本课题以修饰后的多肽9R-P201为药物、以肝癌细胞HepG2为主要研究对象,深入探讨9R-P201对癌细胞、尤其是肝癌细胞的抑制及其作用机理。通过细胞活力测定,我们发现9R-P201对肝癌细胞HepG2、前列腺癌细胞DU145以及人脐带血内皮细胞HUVEC均具有一定的抑制作用,尤其对HepG2细胞表现出强有力的杀伤作用(IC50:43.6μg/mL,13.1μM),并呈剂量依赖性,而对正常人肝细胞L-02(IC50:2855.9 μg/mL)、HL-7702(IC50:93.5 μg/mL)以及小鼠脾脏细胞的抑制率则较低,表明9R-P201对肝癌...
【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写词表
第1章 绪论
1.1 肝癌研究进展
1.1.1 肝癌的现状与发病因素
1.1.2 肝癌的治疗与药物研发
1.2 FoxM1与肿瘤
1.2.1 FoxM1结构与功能
1.2.2 FoxM1介导的肿瘤相关生物进程和信号通路
1.2.3 FoxM1介导的化药耐药相关
1.2.4 FoxM1与肝癌
1.3 FoxM1与分子靶向治疗
1.3.1 分子靶向治疗研究现状
1.3.2 靶向FoxM1与肿瘤
1.4 课题研究目的、意义和内容
1.4.1 本课题的研究目的和意义
1.4.2 本课题的研究内容
1.4.3 本课题创新点
第2章 9R-P201选择性抑制HEPG2细胞的增殖、迁移与侵袭以及诱导凋亡作用
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 主要仪器
2.2.2 细胞株
2.2.3 主要试剂与耗材
2.2.4 主要试剂配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 小鼠脾脏细胞提取
2.3.3 多肽9R-P201对人不同癌细胞株、人正常肝细胞以及小鼠脾脏细胞的活力影响
2.3.4 多肽9R-P201胞内作用位置确定
2.3.5 吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）荧光双染
2.3.6 平板克隆形成实验
2.3.7 细胞划痕实验
2.3.8 Transwell小室迁移实验
2.3.9 qRT-PCR检测相应mRNA表达
2.3.10 Western blot检测相应蛋白表达
2.3.11 统计学分析
2.4 实验结果
2.4.1 多肽9R-P201有效抑制肝癌细胞HepG2的活力
2.4.2 多肽9R-P201与FoxM1表达的调控关系
2.4.3 多肽9R-P201诱导肝癌细胞HepG2的凋亡
2.4.4 多肽9R-P201抑制癌细胞HepG2的增殖与迁移
2.5 讨论
2.6 本章小结
第3章 9R-P201有效抑制裸鼠HEPG2移植瘤的生长以及诱导凋亡作用
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 主要仪器
3.2.2 细胞株与动物
3.2.3 主要试剂与耗材
3.3 实验方法
3.3.1 多肽9R-P201溶血性评价
3.3.2 裸鼠HepG2移植瘤实验
3.4 实验结果
3.4.1 多肽9R-P201的溶血性评价
3.4.2 多肽9R-P201有效抑制HepG2移植瘤的生长
3.5 讨论
3.6 本章小结
结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]染料木黄酮在小细胞肺癌H446细胞中通过抑制FoxM1通路发挥抗肿瘤作用[J]. 田甜甜,李际盛,王亚伟,马道新,王秀问. 山东大学学报(医学版). 2013(06)
[2]Aflatoxins,hepatocellular carcinoma and public health[J]. Arvin Magnussen,Mansour A Parsi. World Journal of Gastroenterology. 2013(10)
[3]Thiostrepton介导FOXM1下调对非小细胞肺癌细胞生长及其AG1478药物敏感性的影响[J]. 公小迪,袁海花,王炯轶,郭跃辉,时婧,王竞,姜斌. 现代肿瘤医学. 2013(01)
[4]紫花牡荆素抑制FOXM1诱导乳腺癌细胞凋亡的研究[J]. 刘莉萍,欧阳取长,曹建国,刘飞. 中国癌症杂志. 2012(12)
[5]硫链丝菌肽对人喉癌Hep-2细胞生长及FoxM1表达的影响[J]. 林力,邓碧,寿铸,梁佳,陈鸿雁. 第三军医大学学报. 2012(20)
[6]6-溴异香兰素BVAN08诱发肝癌细胞HepG2纺锤体损伤和有丝分裂灾变死亡[J]. 张博,王林,王豫,徐勤枝,张士猛,周平坤. 细胞生物学杂志. 2008(05)
本文编号：2938664
【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写词表
第1章 绪论
1.1 肝癌研究进展
1.1.1 肝癌的现状与发病因素
1.1.2 肝癌的治疗与药物研发
1.2 FoxM1与肿瘤
1.2.1 FoxM1结构与功能
1.2.2 FoxM1介导的肿瘤相关生物进程和信号通路
1.2.3 FoxM1介导的化药耐药相关
1.2.4 FoxM1与肝癌
1.3 FoxM1与分子靶向治疗
1.3.1 分子靶向治疗研究现状
1.3.2 靶向FoxM1与肿瘤
1.4 课题研究目的、意义和内容
1.4.1 本课题的研究目的和意义
1.4.2 本课题的研究内容
1.4.3 本课题创新点
第2章 9R-P201选择性抑制HEPG2细胞的增殖、迁移与侵袭以及诱导凋亡作用
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 主要仪器
2.2.2 细胞株
2.2.3 主要试剂与耗材
2.2.4 主要试剂配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 小鼠脾脏细胞提取
2.3.3 多肽9R-P201对人不同癌细胞株、人正常肝细胞以及小鼠脾脏细胞的活力影响
2.3.4 多肽9R-P201胞内作用位置确定
2.3.5 吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）荧光双染
2.3.6 平板克隆形成实验
2.3.7 细胞划痕实验
2.3.8 Transwell小室迁移实验
2.3.9 qRT-PCR检测相应mRNA表达
2.3.10 Western blot检测相应蛋白表达
2.3.11 统计学分析
2.4 实验结果
2.4.1 多肽9R-P201有效抑制肝癌细胞HepG2的活力
2.4.2 多肽9R-P201与FoxM1表达的调控关系
2.4.3 多肽9R-P201诱导肝癌细胞HepG2的凋亡
2.4.4 多肽9R-P201抑制癌细胞HepG2的增殖与迁移
2.5 讨论
2.6 本章小结
第3章 9R-P201有效抑制裸鼠HEPG2移植瘤的生长以及诱导凋亡作用
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 主要仪器
3.2.2 细胞株与动物
3.2.3 主要试剂与耗材
3.3 实验方法
3.3.1 多肽9R-P201溶血性评价
3.3.2 裸鼠HepG2移植瘤实验
3.4 实验结果
3.4.1 多肽9R-P201的溶血性评价
3.4.2 多肽9R-P201有效抑制HepG2移植瘤的生长
3.5 讨论
3.6 本章小结
结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]染料木黄酮在小细胞肺癌H446细胞中通过抑制FoxM1通路发挥抗肿瘤作用[J]. 田甜甜,李际盛,王亚伟,马道新,王秀问. 山东大学学报(医学版). 2013(06)
[2]Aflatoxins,hepatocellular carcinoma and public health[J]. Arvin Magnussen,Mansour A Parsi. World Journal of Gastroenterology. 2013(10)
[3]Thiostrepton介导FOXM1下调对非小细胞肺癌细胞生长及其AG1478药物敏感性的影响[J]. 公小迪,袁海花,王炯轶,郭跃辉,时婧,王竞,姜斌. 现代肿瘤医学. 2013(01)
[4]紫花牡荆素抑制FOXM1诱导乳腺癌细胞凋亡的研究[J]. 刘莉萍,欧阳取长,曹建国,刘飞. 中国癌症杂志. 2012(12)
[5]硫链丝菌肽对人喉癌Hep-2细胞生长及FoxM1表达的影响[J]. 林力,邓碧,寿铸,梁佳,陈鸿雁. 第三军医大学学报. 2012(20)
[6]6-溴异香兰素BVAN08诱发肝癌细胞HepG2纺锤体损伤和有丝分裂灾变死亡[J]. 张博,王林,王豫,徐勤枝,张士猛,周平坤. 细胞生物学杂志. 2008(05)
本文编号：2938664
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