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乳腺癌MCF-7细胞p21 WAF1/CIP1 启动子区HDAC1高功能结合位点的研究

发布时间:2020-12-26 04:30
  目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21WAF1/CIP1启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L-10.88μL SAHA(S组)、0.625 nmol·L-110μL Leptin(L组)处理24 h,对照组(B组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液与HDAC1抗体孵育,收集纯化结合HDAC1抗体的DNA片段,应用Realtime PCR法检测p21WAF1/CIP1启动子区从TSS到其上游(+2-4 000 bp)f1f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCT法分析。结果 B组中,HDAC1抗体在p21WAF1/CIP1启动子区f1、f8片段有高亲和力,f8片段达最高。S组中,HDAC1抗体与p21WAF1/CIP1

【文章来源】:中国药理学通报. 2017年03期 北大核心

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 应用染色质免疫共沉淀技术(chromatin-im-munoprecipitation,Ch IP)处理样品
f10片段的DNA相对表达">        1.2.3 Real-time PCR检测各组p21WAF1/CIP1f1f10片段的DNA相对表达
    1.3 统计学处理
2 结果
f10片段HDAC1高功能结合位点筛选">    2.1 B组MCF-7细胞p21WAF1/CIP1启动子区f1f10片段HDAC1高功能结合位点筛选
f10片段HDAC1高功能结合位点筛选">    2.2 SAHA作用下MCF-7细胞p21WAF1/CIP1启动子区f1f10片段HDAC1高功能结合位点筛选
f10片段HDAC1高功能结合位点筛选">    2.3 Leptin作用下MCF-7细胞p21WAF1/CIP1启动子区f1f10片段HDAC1高功能结合位点筛选
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]SAHA在Leptin诱导的乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中的调控作用[J]. 冯秀艳,韩翰,周伟强.  中国药理学通报. 2016(04)
[2]SAHA和TRAIL联合使用对乳腺癌雌激素受体阳性细胞MCF-7生长的影响[J]. 韩翰,王敏.  中国药理学通报. 2016(02)



本文编号:2939039

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