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下调SPOCK1基因表达可抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭

发布时间:2021-01-06 13:56
  目的:检测膀胱癌细胞中SPOCK1(sparc/osteonectin,cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1)基因的表达情况,并进一步研究下调SPOCK1基因表达对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 :采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1以及膀胱癌细胞株5637和T24中SPOCK1基因的表达情况。构建特异性针对SPOCK1基因的si RNA片段,并将其通过脂质体介导转染至膀胱癌5637细胞;同时设立未转染的空白对照组和转染无义序列的阴性对照组。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组细胞中SPOCK1 m RNA和蛋白的表达差异。然后采用CCK-8法、划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测SPOCK1基因表达下调后膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化情况。结果 :膀胱癌细胞中SPOCK1基因表达水平高于输尿管上皮永生化细胞,尤以膀胱癌5637细胞中的表达水平最高(P值均<0.05)。SPOCK1 si RNA转染后,膀胱癌5637细胞中SPOCK1基因的表达明显下调(P&... 

【文章来源】:肿瘤. 2017,37(09)北大核心

【文章页数】:8 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 主要试剂
    1.2 细胞及细胞培养
    1.3 实时荧光定量PCR法检测SPOCK1 m RNA表达
    1.4 蛋白质印迹法检测SPOCK1蛋白的表达
    1.5 构建si RNA片段并转染膀胱癌5637细胞
    1.6 CCK-8法检测膀胱癌细胞的增殖能力
    1.7 细胞划痕愈合实验检测膀胱癌细胞的迁移能力
    1.8 Transwell小室法检测膀胱癌细胞的侵袭能力
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 膀胱癌细胞中SPOCK1基因高表达
    2.2 si RNA转染后膀胱癌5637细胞中SPOCK1基因表达下调
    2.3 SPOCK1基因表达下调后膀胱癌5637细胞的增殖能力下降
    2.4 SPOCK1基因表达下调后膀胱癌5637细胞的迁移能力下降
    2.5 SPOCK1基因表达下调后膀胱癌5637细胞的侵袭能力下降
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]长链非编码RNA NBAT1表达下调对膀胱癌5637细胞生物学行为的影响[J]. 邵凤平,王志平.  肿瘤. 2017(01)
[2]SPOCK1的生物学研究进展[J]. 毕丹丹,成秉林,葛瑞胜,张淑君.  医学研究杂志. 2016(05)
[3]SPOCK1蛋白结构和功能与肿瘤的研究进展[J]. 国昊楠,彭士云.  实用肿瘤学杂志. 2015 (04)
[4]2003—2007年中国肿瘤登记地区膀胱癌的发病与死亡分析[J]. 温登瑰,单保恩,张思维,郑荣寿,王寒松,张莉梅,毕学娟,陈万青.  肿瘤. 2012(04)
[5]应重视膀胱肿瘤复发的研究[J]. 孔垂泽.  中华医学杂志. 2010 (18)



本文编号:2960693

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