乳腺癌脑转移细胞靶向肽BRBP1结合相关蛋白分子的鉴定
发布时间：2021-01-06 18:53
乳腺癌（breast cancer）严重威胁女性的健康与生命。乳腺癌转移至骨、脑、肺等器官增加了乳腺癌的治疗难度,也降低了患者的生存质量。乳腺癌脑转移（breast cancer brain metastases,BCBM）患者的中位生存时间短,确诊BCBM后一年内死亡率约为80%,即使很小的损伤也可能会导致神经功能病变,影响生活质量。研究乳腺癌脑转移的机制、寻找乳腺癌细胞膜表面与脑转移有关的靶蛋白,对乳腺癌脑转移的早期诊断及治疗具有重要意义。本实验室前期通过噬菌体展示肽库筛选技术（Phage display technology）进行全细胞消减筛选,获得能与人乳腺癌专一性脑转移细胞系231-BR结合的多肽,命名为BRBP1（专利号:ZL201210538671.4）,体内体外实验均证明该肽与231-BR细胞呈特异性结合;临床乳腺癌病理切片结果也显示BRBP1肽与人乳腺浸润性导管癌组织标本特异性结合且倾向结合高转移潜能的肿瘤细胞。因此,寻找与BRBP1肽结合的靶蛋白,对探索乳腺癌脑转移的作用机制,深度认识及拓宽BRBP1肽的应用价值有重要意义。本实验室前期真核表达BRBP1-Fc肽体,...
【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：101 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人乳腺癌细胞中MVPmRNA的表达（a）MVP溶解曲线；（b）MVP分子mRNA在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7细胞中的表达
第二章 乳腺癌细胞靶向肽 BRBP1 与 MVP 分子相关性的鉴定我们通过 Western blot、细胞免疫荧光实验、流式细胞术验证 MVP 在人乳腺癌细胞 231-BR、MDA-MB-231、MCF-7 细胞中的表达。如图（2-2、2-3、2-4）结果显示，MVP 在 231-BR、MDA-MB-231 中均有表达且在 231-BR 细胞中表达程度高于 MDA-MB-231 细胞，在 MCF-7 中低表达，流式实验结果进一步显示MVP 蛋白在 231-BR、MDA-MB231 和 MCF-7 细胞表面的表达分别为 73.86%、57.29%和 32.71%，与 mRNA 检测结果一致，符合 BRBP1 期望靶蛋白的分布情况。因此，我们后续将干扰 MVP 分子在 231-BR 细胞中的表达，以期验证 MVP是否为 BRBP1 的靶蛋白。
细胞免疫荧光验证MVP分子在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7细胞的表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]乳腺癌脑转移细胞系靶向肽体的表达与特异性鉴定[J]. 杨姣姣,张莹,沈宇清,王洁,付波,张建琼. 东南大学学报(医学版). 2016(03)
[3]肿瘤归巢肽的研究进展[J]. 朱蕾蕾,任建丽,周志益. 肿瘤. 2016(05)
[4]体内示踪技术评价噬菌体展示肽GX1特异靶向胃癌新生血管[J]. 惠晓丽,梁树辉,刘洋,刘惊涛,吴开春. 现代肿瘤医学. 2015(14)
[5]受体-配体结合的质谱分析方法研究进展[J]. 孔爱英,乔晋萍,武仙英,邓艾芳. 中国药学杂志. 2013(15)
[6]Affinity peptide developed by phage display selection for targeting gastric cancer[J]. Arun Budha,Thomas D Wang. World Journal of Gastroenterology. 2012(17)
[7]蛋白质分子的结构与功能[J]. 徐国恒. 生物学通报. 2010(03)
[8]RGD肽与整合素αvβ3受体结合的构效关系及放射性标记配体的设计[J]. 张春丽,杨铭,王荣福. 肿瘤学杂志. 2009(01)
[9]应用免疫沉淀-质谱法筛选肿瘤血管靶向肽CGNSNPKSC的结合受体[J]. 贺莉,吴开春,惠晓莉,陈瑜,梁树辉,陈蓓,曹姗姗,闫堃,韩宇,姚芳芳,杨利萍,韩英,樊代明. 现代肿瘤医学. 2008(08)
[10]T7噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白3的相互作用蛋白[J]. 黄英,蔡雪飞,何茂锐,张君,黄爱龙. 中华肝脏病杂志. 2006(08)
本文编号：2961086
【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：101 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人乳腺癌细胞中MVPmRNA的表达（a）MVP溶解曲线；（b）MVP分子mRNA在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7细胞中的表达
第二章 乳腺癌细胞靶向肽 BRBP1 与 MVP 分子相关性的鉴定我们通过 Western blot、细胞免疫荧光实验、流式细胞术验证 MVP 在人乳腺癌细胞 231-BR、MDA-MB-231、MCF-7 细胞中的表达。如图（2-2、2-3、2-4）结果显示，MVP 在 231-BR、MDA-MB-231 中均有表达且在 231-BR 细胞中表达程度高于 MDA-MB-231 细胞，在 MCF-7 中低表达，流式实验结果进一步显示MVP 蛋白在 231-BR、MDA-MB231 和 MCF-7 细胞表面的表达分别为 73.86%、57.29%和 32.71%，与 mRNA 检测结果一致，符合 BRBP1 期望靶蛋白的分布情况。因此，我们后续将干扰 MVP 分子在 231-BR 细胞中的表达，以期验证 MVP是否为 BRBP1 的靶蛋白。
细胞免疫荧光验证MVP分子在231-BR、MDA-MB-231、MCF-7细胞的表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]乳腺癌脑转移细胞系靶向肽体的表达与特异性鉴定[J]. 杨姣姣,张莹,沈宇清,王洁,付波,张建琼. 东南大学学报(医学版). 2016(03)
[3]肿瘤归巢肽的研究进展[J]. 朱蕾蕾,任建丽,周志益. 肿瘤. 2016(05)
[4]体内示踪技术评价噬菌体展示肽GX1特异靶向胃癌新生血管[J]. 惠晓丽,梁树辉,刘洋,刘惊涛,吴开春. 现代肿瘤医学. 2015(14)
[5]受体-配体结合的质谱分析方法研究进展[J]. 孔爱英,乔晋萍,武仙英,邓艾芳. 中国药学杂志. 2013(15)
[6]Affinity peptide developed by phage display selection for targeting gastric cancer[J]. Arun Budha,Thomas D Wang. World Journal of Gastroenterology. 2012(17)
[7]蛋白质分子的结构与功能[J]. 徐国恒. 生物学通报. 2010(03)
[8]RGD肽与整合素αvβ3受体结合的构效关系及放射性标记配体的设计[J]. 张春丽,杨铭,王荣福. 肿瘤学杂志. 2009(01)
[9]应用免疫沉淀-质谱法筛选肿瘤血管靶向肽CGNSNPKSC的结合受体[J]. 贺莉,吴开春,惠晓莉,陈瑜,梁树辉,陈蓓,曹姗姗,闫堃,韩宇,姚芳芳,杨利萍,韩英,樊代明. 现代肿瘤医学. 2008(08)
[10]T7噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白3的相互作用蛋白[J]. 黄英,蔡雪飞,何茂锐,张君,黄爱龙. 中华肝脏病杂志. 2006(08)
本文编号：2961086
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