凋亡及自噬在HVJ-E致A549和A549/DDP细胞死亡中的作用机制

发布时间：2021-01-16 05:51

　　肺癌是当今世界最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率都有明显升高的趋势,肺癌是一种多因素的疾病,吸烟是引起肺癌的主要因素之一。目前肺癌的治疗主要以手术治疗、化学治疗和放射治疗为主,但存活率普遍不高,所以,我们仍需寻求一种新的方法来治疗肺癌。研究表明,灭活的仙台病毒（Hemaglutinating virus of Japan Envelope, HVJ-E）不仅可以作为载体传递抗肿瘤药物,激活多重抗肿瘤免疫,同时还能直接杀伤肿瘤。在本研究中,我们发现HVJ-E可直接诱导人肺腺癌细胞（A549）、耐顺铂人肺腺癌细胞（A549/DDP）死亡,并初步探讨其抗肿瘤机制。首先,我们通过实验观察HVJ-E作用A549、A549/DDP细胞后,RIG-I和IFN-P的表达情况。Western Blot和ELISA检测显示,经HVJ-E刺激后,RIG-I的表达量增加,诱导IFN-β的产生,并呈剂量-效应关系。这表明HVJ-E与A549、A549/DDP细胞发生了融合,断裂的病毒基因组被RIG-I识别,从而导致A549、A549/DDP细胞中的IFN-β含量随HVJ-E浓度的增加而增加。其次,我们探索H... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

显微镜下观察HVJ-E对A549.A549/DDP细胞处理后细胞形态的影响

３．?４?ＷＢ检测ＲＩＧ－Ｉ表达量増加，ＥＬＩＳＡ检测ＩＦＮ－?Ｐ表达量也増加??用０￣８００?ＭＯＩ的ＨＶＪ－Ｅ处理Ａ５４９和Ａ５４９／ＤＤＰ细胞，２４小时后，ＷＢ检测Ｒ１Ｇ－Ｉ的??表达。如图１Ｆ所示，经ＨＶＪ－Ｅ处理后，民ＩＧ－Ｉ的表达量随着ＨＶＪ－Ｅ浓度的增加而增加，??这表明ＨＶＪ－Ｅ可与Ａ５４９、Ａ５４９／ＤＤＰ细胞发生融合，断裂的病毒基因组被民ＩＧ－Ｉ识别，促??进了?ＩＦＮ－?Ｐ的产生。如１Ｇ，化ＩＳＡ检测显示，ＩＦＮ－目的含量随着ＨＶＪ－Ｅ浓度的增加而升??高，且与空白对照组相比，都呈显著性差异（；７＜０．０１）。??ＨＶＪ－Ｅ?（ＭＯＩ）??０?１００?４００?８００??■ｉＷ?Ａ５４９??■賓－‘?，‘?ｆ－＿，?‘，、，！？：，‘＇＊：?＾?Ａ５４９／ＤＤＰ??ｇ转ｈｉｌ量．??图ｌＡ．显微镜下观察肌Ｊ－Ｅ对Ａ５４９、Ａ５４９／孤Ｐ细胞处理后细胞巧态的影响??巧?０?■■?Ａ５４９??Ｉ／／／Ｉ?Ａ５４９／ＤＤＰ??二?Ｐ＜〇?＂?ｐ＜０．０１??邊資?８８浸〇?〇：：〇〇接浸資??。ＨＶＪ－Ｅ｛ＭＯＩ）?ＨＶＪ＊Ｅ（ＭＯＩ）￣￣??图１Ｂ．?ＨＶＪ－Ｅ抑制Ａ５４９、Ａ５４９／ＤＤＰ细胞增殖??

－。??ＣＣＫ－８?实验证实，女口图?２Ｈ?所示，ｐ３８?抑制齐ＩＪ?ＳＢ２０３５８０（?１０?｜ｉＭ）、ＪＮＫ?抑制齐Ｕ?ＳＰ６００１２５??Ａ５４９；?８?＾Ｍ、Ａ５４９／ＤＤＰ：?１０?叫４）、ＥＲＫ?抑制剂?ＰＤ９８０５９?（２０?叫ｖｌ）均能有效降低?ＨＶＪ－Ｅ??用细胞２４小时后引起的细胞毒性。??上述结果说明了在ＨＶＪ－Ｅ引起Ａ５４９、Ａ５４９／ＤＤＰ细胞调ｔ中ＭＡＰＫ信号通路具有重??的作用。??


本文编号：2980274