CSRP1对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响
发布时间：2021-02-12 07:07
目的:探讨富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白1（cysteine and glycine rich protein 1,CSRP1）基因过表达对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养HepG2细胞,分别转染PEX-2-CSRP1重组质粒（过表达组）或PEX-2空载体（空质粒组）,另设不做任何处理的HepG2细胞为空白组;通过Western blotting法检测CSRP1基因的表达;MTT法检测0h,24h,48h,72h后HepG2细胞的增殖活性;流式细胞学检测HepG2细胞凋亡。Transwell侵袭实验检测各组HepG2细胞侵袭性;细胞划痕实验检测各组HepG2细胞迁移运动能力变化。结果:1.Western blot实验结果:转染后48h,过表达组中HepG2细胞的CSRP1蛋白的表达水平显著增高。半定量分析结果显示:过表达组蛋白相对表达量为（0.224±0.0165）,明显高于空白组（0.0723±0.0138）、空质粒组（0.0730±0.0143）差异有统计学意义（p<0.05）;2.MTT检测结果:在三个不同时间段（24h、48h、72h）,过表达组...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Westernblot法检测CSRP1蛋白表达GAPDH
南华大学硕士学位论文184.3过表达CSRP1对HepG2细胞凋亡的影响流式细胞学检测凋亡结果如下所示（4.5），各组转染48h后凋亡率结果统计分析后显示：过表达组48h凋亡率为（9.053±0.304）%，高于空白组（4.170±0.212）%、空质粒组（5.097±0.309）%，差异有统计学意义（p＜0.05）；而空白组及空质粒组凋亡率无明显差异(p＞0.05)。提示过CSRP1可促进HepG2细胞凋亡（见图4.6）。A空白组B空质粒组C过表达组图4.5FCM法检测细胞凋亡
南华大学硕士学位论文20而空白组及空质粒组穿膜数差异无统计学意义（p＞0.05）。由此可见，CSRP1基因过表达后，HepG2细胞侵袭能力减弱(图4.8)。4.5过表达CSRP1对HepG2细胞迁移影响如下图所示（图4.9），在倒置显微镜下观察各组细胞的迁移距离变化：在实验时间段，三组划痕均出现愈合，相对于空白组、空质粒组，过表达组划痕愈合速度减慢。随机取5个视野测算出各组各个时间段迁移距离，取均值后统计分析提示（结果见表4.3）：在三个时间段（24h、48h、72h），过表达组细胞迁移距离为（1.620±0.111）μm、（2.660±0.707）μm、（3.640±0.230）μm，低于空白组（2.400±0.158）μm、（3.720±0.130）μm、（5.260±0.230）μm及空质粒组（2.440±0.219）μm、（3.820±0.110）μm、（5.300±0.245）μm，差异有统计学意义（p＜0.05）。而空质粒组及空白组细胞迁移距离无统计学差异（p＞0.05）。提示过表达CSRP1基因，可抑制HepG2细胞的迁移能力。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatocellular carcinoma recurrence after liver transplantation: Risk factors, screening and clinical presentation[J]. Norma Arteiro Filgueira. World Journal of Hepatology. 2019(03)
[2]CSRP1蛋白在大肠癌中的表达及意义[J]. 石宇,王宇博,谢风,何成彦,师庆红. 中国实验诊断学. 2018(12)
[3]过表达CSRP1基因可促进人肺腺癌H1299细胞的增殖、迁移和侵袭[J]. 张笑,余涛,林河春,耿沁,潘洪玉,姚明. 肿瘤. 2018(04)
[4]Role of targeted therapy in metastatic colorectal cancer[J]. Yoshihito Ohhara,Naoki Fukuda,Satoshi Takeuchi,Rio Honma,Yasushi Shimizu,Ichiro Kinoshita,Hirotoshi Dosaka--Akita. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(09)
[5]Current status and perspectives of immune-based therapies for hepatocellular carcinoma[J]. Maridi Aerts,Daphné Benteyn,Hans Van Vlierberghe,Kris Thielemans,Hendrik Reynaert. World Journal of Gastroenterology. 2016(01)
本文编号：3030453
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Westernblot法检测CSRP1蛋白表达GAPDH
南华大学硕士学位论文184.3过表达CSRP1对HepG2细胞凋亡的影响流式细胞学检测凋亡结果如下所示（4.5），各组转染48h后凋亡率结果统计分析后显示：过表达组48h凋亡率为（9.053±0.304）%，高于空白组（4.170±0.212）%、空质粒组（5.097±0.309）%，差异有统计学意义（p＜0.05）；而空白组及空质粒组凋亡率无明显差异(p＞0.05)。提示过CSRP1可促进HepG2细胞凋亡（见图4.6）。A空白组B空质粒组C过表达组图4.5FCM法检测细胞凋亡
南华大学硕士学位论文20而空白组及空质粒组穿膜数差异无统计学意义（p＞0.05）。由此可见，CSRP1基因过表达后，HepG2细胞侵袭能力减弱(图4.8)。4.5过表达CSRP1对HepG2细胞迁移影响如下图所示（图4.9），在倒置显微镜下观察各组细胞的迁移距离变化：在实验时间段，三组划痕均出现愈合，相对于空白组、空质粒组，过表达组划痕愈合速度减慢。随机取5个视野测算出各组各个时间段迁移距离，取均值后统计分析提示（结果见表4.3）：在三个时间段（24h、48h、72h），过表达组细胞迁移距离为（1.620±0.111）μm、（2.660±0.707）μm、（3.640±0.230）μm，低于空白组（2.400±0.158）μm、（3.720±0.130）μm、（5.260±0.230）μm及空质粒组（2.440±0.219）μm、（3.820±0.110）μm、（5.300±0.245）μm，差异有统计学意义（p＜0.05）。而空质粒组及空白组细胞迁移距离无统计学差异（p＞0.05）。提示过表达CSRP1基因，可抑制HepG2细胞的迁移能力。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatocellular carcinoma recurrence after liver transplantation: Risk factors, screening and clinical presentation[J]. Norma Arteiro Filgueira. World Journal of Hepatology. 2019(03)
[2]CSRP1蛋白在大肠癌中的表达及意义[J]. 石宇,王宇博,谢风,何成彦,师庆红. 中国实验诊断学. 2018(12)
[3]过表达CSRP1基因可促进人肺腺癌H1299细胞的增殖、迁移和侵袭[J]. 张笑,余涛,林河春,耿沁,潘洪玉,姚明. 肿瘤. 2018(04)
[4]Role of targeted therapy in metastatic colorectal cancer[J]. Yoshihito Ohhara,Naoki Fukuda,Satoshi Takeuchi,Rio Honma,Yasushi Shimizu,Ichiro Kinoshita,Hirotoshi Dosaka--Akita. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(09)
[5]Current status and perspectives of immune-based therapies for hepatocellular carcinoma[J]. Maridi Aerts,Daphné Benteyn,Hans Van Vlierberghe,Kris Thielemans,Hendrik Reynaert. World Journal of Gastroenterology. 2016(01)
本文编号：3030453
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