PLCε通过PTEN/AKT信号通路对前列腺癌细胞增殖的影响

发布时间：2021-02-27 06:24

　　第一部分目的和方法:利用搭载了干扰PLCε的慢病毒及空白对照组转染前列腺癌细胞株DU145和PC3,经过严格筛选后获得稳定低表达PLCε的前列腺癌细胞株LV-shPLCε及其阴性对照组LV-HK,利用qRT-PCR技术和Western blotting技术测定其基因水平和蛋白水平的表达,并利用MTT法及集落形成实验对其增殖能力进行测定。结果:搭载了干扰PLCε的慢病毒及空白对照组转染前列腺癌细胞株DU145和PC3后,通过病毒自带荧光标签检测后可以看到,病毒成功转入细胞中,后经过多次细胞传代及筛选后,得到稳定转染PLCε敲减的前列腺癌细胞株DU145（LV-shPLCε组）和PC3（LV-shPLCε组）,并且,同时得到DU145及PC3的阴性空载对照组（LV-HK组）。后经过qRT-PCR技术和Western blotting技术检测,观察到PLCε在基因水平及蛋白水平上出现了明显的降低。同时,采用MTT法及集落形成实验对前列腺癌细胞的增殖能力进行测定,发现在敲减了 PLCε的表达后,前列腺癌细胞的增殖能力出现了降低。结论:搭载了 PLCε干扰的慢病毒很好的敲减了 PLCε在前列腺癌... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３?ＭＴＴ法检测ＤＵ１４Ｓ和ＰＣ３前列腺癌细胞转染ＰＬＣｓ敲低慢病毒后细胞增殖能力的变化??－

细胞ＤＵ１４５及ＰＣ３的增殖能力出现了降低（图３）。同样的，细胞集落形成实验??也同样证实了，在敲低ＰＬＣｓ表达的情况下，前列腺癌细胞ＤＵ１４５及ＰＣ３的增殖??能力出现了降低（图４）。??Ａ?ＤＵ１４５?Ｂ?ＰＣ３??？０．８－，?？０．８－，??ｃ?＋?Ｂｌａｎｋ?〇?Ｂｌａｎｋ??１０．６－?＾ＪＬ?２０，６－?－匪??ａ?ＬＶ－ｓｈｐＬＣｓ?％?－＊■?ＬＶ－ｓｈＰＬＣｓ??ｒ?ｒ．??Ｉ?〇－２－?二?＾?｜〇－２－??＝?云??ｇ?〇．〇Ｊ?１?１?１?１?？〇．〇－！?１?１?１?１??２４?４８?７２?９６?０?２４?４８?７２?９６??■ｎｍｅｓ（ｈｏｕｒｓ）?Ｔｉｍｅｓ（ｈｏｕｒｓ）??图３?ＭＴＴ法检测ＤＵ１４Ｓ和ＰＣ３前列腺癌细胞转染ＰＬＣｓ敲低慢病毒后细胞增殖能力的变化??Ｆｉｇ?３?ＰＬＣｃ?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ?ＰＣａ?ｃｅｌｌｓ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｉｎ?ＤＵ１４５?ａｎｄ?ＰＣ３?ＰＣａ?ｃｅｌｌ??ｌｉｎｅｓ．??Ａ．ＭＴＴ?ａｓｓａｙｓ?ｒｅｖｅａｌｅｄ?ｔｈａｔ?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＰＬＣｃ?ｒｅｄｕｃｅｄ?ｃｅｌｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?ＤＵ１４５


本文编号：3053823