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尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ诱导人舌鳞癌细胞凋亡中PERK/eIF2α蛋白表达意义的研究

发布时间:2021-03-03 10:56
  目的:探讨尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I(anti-tumor component-I from agkistrodon acutus venom,AAVC-I)诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中,蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核生物翻译起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)分子蛋白的检测,分析内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)PERK/eIF2α分子蛋白信号转导通路发生的机制。方法:本实验选择体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞作为研究对象,以对数生长期细胞进行实验,选择ERS诱导剂二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)作为阳性对照药物。1、运用MTT法检测不同浓度的DTT(1.0、2.0、4.0、8.0mM)和AAVC-I(2.0、4.0、8.0、16.0、24.0μg/ml)处理Tca8113细胞24h后的细胞增殖抑制率,并根据细胞增殖抑制率的... 

【文章来源】:皖南医学院安徽省

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ诱导人舌鳞癌细胞凋亡中PERK/eIF2α蛋白表达意义的研究


DDT与AAVC-I处理人舌鳞癌T

细胞,鳞癌,荧光,浓度


皖南医学院硕士学位论文27正常对照组DTT4.0mMAAVC-I4.0μg/mlAAVC-I8.0μg/mlAAVC-I16.0μg/ml图3DDT与AAVC-I处理人舌鳞癌Tca8113细胞24h后细胞HE染色(×200)注:图黑色箭头标识的为破裂的细胞及细胞碎片。3AnnexinV-FITC/PI双荧光染色标记法观察DTT与AAVC-I对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡的影响4.0mMDTT阳性对照实验浓度组和各4.0μg/ml、8.0μg/ml、16.0μg/mlAAVC-I实验浓度组处理Tca8113细胞24h后,用AnnexinV-FITC/PI双荧光试剂对细胞进行荧光染色。荧光染色的细胞置于荧光显微镜下观察发现,与正常对照组相互比较,DTT阳性对照实验浓度组与各AAVC-I实验浓度组细胞在荧光显微镜下观察到被荧光标记的凋亡细胞,早期凋亡细胞的胞膜会被AnnexinV-FITC染色成明亮的苹果绿色,而晚期凋亡细胞的胞膜除了会被染色成明亮的苹果绿色,胞核还会被PI染色成红-黄色,如图4A所示。在进一步对荧光染色的细胞用流式细胞仪检测凋亡细胞,结果显示,正常对照组细胞凋亡率为(2.08±0.41)%,4.0mMDTT阳性对照实验浓度组凋亡率为(34.13±1.79)%,4.0μg/mlAAVC-I浓度组凋亡率为(11.21±2.46)%,8.0μg/mlAAVC-I浓度组凋亡率为(17.98±0.99)%,16.0μg/mlAAVC-I浓度组凋亡率为(37.11±2.46)%,如图4B所示。对细胞凋亡率数据进行整理行统计学分析发现,DTT阳性对照实验浓度组与各AAVC-I实验浓度组细胞凋亡率与正常对照组相互比较差异具有统计学意义(P<0.01),同时各AAVC-I浓

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
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本文编号:3061146

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