细胞质FMR1相关蛋白1（CYFIP1）在肝细胞性肝癌发生发展中的生物学作用

发布时间：2021-03-08 06:11

　　目的肝细胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是常见的恶性肿瘤。本课题主要研究细胞质FMR1相关蛋白1（CYFIP1）在肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达及与HCC发生发展的相关性。方法利用组织微阵列分析检测80例原发性肝细胞性肝癌的肿瘤组织与癌旁正常肝组织中CYFIP1的表达水平,并分析其与HCC患者临床特征以及生存期的相关性;运用Annexin V-FITC/PI双染标记法检测Hep G2细胞沉默CYFIP1后的凋亡水平;运用Western blot法检测CYFIP1的蛋白表达变化。结果组织芯片染色结果提示肝癌组织中CYFIP1表达量降低（P=0.031）,且与HCC患者的肿瘤分化程度,肿瘤直径及生存期存在相关性。采用sh RNA沉默CYFIP1后,Hep G2细胞的细胞增殖水平上升（P=0.019）,且细胞凋亡水平下降（P=0.022）。结论CYFIP1是HCC的抑癌基因,可能成为患者临床预后的监测指标。 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CYFIP1组织芯片免疫组化表达情况100

安徽医科大学硕士学位论文243.2CYFIP1在肝癌组织中的表达与肿瘤组织分化、肿瘤直径及患者生存期具有相关性上述的多因素分析临床特征分析的结果提示，CYFIP1的表达与患者的肿瘤分级、肿瘤直径（cm）两项临床指标呈负相关且差异具有统计学意义（P=0.012；P=0.014）；但是与性别、年龄、血清AFP、HBV-DNA、Child分级等指标的关联不具有统计学意义（P＞0.05)，并提示CYFIP1可能是抑癌基因并且与肿瘤患者的生存存在负相关。因此，我们进行进一步的HCC患者术后生存分析。我们通过对纳入的明确诊断为HCC的患者进行术后随访，并统计计算其术后生存状态。术后生存分析的结果提示，CYFIP1低表达的HCC患者的术后生存期较短，与CYFIP1高表达患者相比，差异具有统计学意义（χ2=8.213，P=0.018）。见图2。图2CYFIP1在HCC患者的表达水平与患者总体生存率之间的关系

安徽医科大学硕士学位论文253.3沉默CYFIP1可促进HepG2细胞的增殖在人肝癌细胞系HepG2中采用shRNA质粒转染的方法，沉默HCC细胞系HepG2内基因CYFIP1。shRNA转染后，我们通过Westernblot验证CYFIP1在HCCHepG2细胞系中的表达水平，结果提示shRNA沉默明显的下调了细胞系中CYFIP1的表达。随后在shRNA-CYFIP1转染有效的基础上，采用MTT方法，检测shRNA-CYFIP1转染对细胞增值水平的影响。进一步的MTT检测结果提示，下调CYFIP1表达后，HepG2细胞增殖速度明显提高，与对照组相比，差异具有统计学意义（P=0.019）。见图3。图3沉默CYFIP1可促进HepG2细胞的增殖沉默CYFIP1可抑制HepG2细胞蛋白CYFIP1的表达，并且质粒转染后的HepG2细胞，其增殖能力显著提高，差异具有统计学意义，P=0.019；NC：Negativecontrol.


本文编号：3070557