BPI-15086对EGFR-T790M作用机制的体外研究
发布时间：2021-03-21 23:22
目的:在本研究中我们选用携带L858R/T790M双突变的人肺腺癌细胞株NCI-H1975、携带EGFRDEL19的人肺腺癌细胞PC-9、以及携带EGFR野生型的人腺癌细胞A549,为了研究BPI-15086对EGFR T790M突变的作用机制,观察BPI-15086对各组细胞的影响。方法:利用ARMS实时PCR法对H1975、PC-9及A549细胞株进行EGFR基因突变类型鉴定;CCK8法对各细胞株的增殖抑制率进行检测;流式细胞术检测不同浓度BPI-15086对H-1975、PC9、A549细胞作用24小时后细胞周期及凋亡的变化;流式细胞术分别检测空白组、特定浓度BPI-15086对H-1975,PC9,A549细胞作用24小时后其细胞周期变化;Western-blot法检测在不同浓度BPI-15086作用下,各细胞株的EMT相关E-cad表达水平的变化。结果:1、CCK8结果显示BPI-15086能够对A549、PC9、H1975细胞增殖产生相应的抑制作用,随着浓度的增加,抑制作用更加明显,呈浓度依赖性（P<0.01）,其对H1975细胞增殖的抑制作用的效果是显著的（P<...
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５三种细胞ＥＧＦＲ突变基因检测结果??２１??
?表２?Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５细胞Ｅ－ｃａｄ在ＢＰ１－１５０８６作用下细胞周期分布的情况???ＢＰＩ１５０８６??Ａ５４９???ＰＣ９???Ｈ１９７５???（ｕｍｏｌ／１）?Ｇｌ／ＧＯ?Ｓ?Ｇ２／Ｍ?Ｇｌ／ＧＱ?Ｓ?Ｇ２／Ｍ?Ｇｌ／ＧＯ?Ｓ?Ｇ２／Ｍ??０?３６．９土２．４１?３１．９７土１．１０?３１．０７±２．３３?４５．３３土?１．７３?３９．４７±１．８３?１５．２０士?１．０４?５６．４５士１．６８?２１．６３士１．１５?２２．２士１．２４??５?４１．７士?１．１３?１３．７２±１．０４?４４．５４±２．０８?４９．７９±１．９１?１５．６０±１．９５?３５．９８±２．６２?６９．２３士２．４３?１４．２１?士０．９４?１６．６１?土０．９３??Ｐ?值?０．０３６?＜０．０１?＜０．０１?０．０４?＜０．０１?＜０．０１?＜０．０１?＜０．０１?＜０．０５??２３??
流式细胞仪检测结果显示ＢＰＩ１５０８６作用于Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５细胞２４ｈ后，??Ｇ０／Ｇ１期细胞比例均明显升高（Ｐ＜０．０５），?Ｓ期细胞比例明显减少（ＰＣ０．０５），提示提??示ＢＰＩ－１５０８６诱导细胞发生显著的Ｇ０／Ｇ１期周期阻滞（表２、图３）。??ＢＰｌ－１５０８６?５ｕｍｏｌ／ｌ作用于三种细胞２４小时以后，Ｇ１／Ｇ０期细胞占比升高（Ｐ??值＜０．０５），而且Ｓ期细胞比例降低（Ｐ＜０．０１）。各组细胞Ｇ１／Ｇ０期细胞不同程度??升高，且Ｈ１９７５细胞Ｇ１／Ｇ０阻滞较Ａ５４９、ＰＣ９细胞明显，差异有统计学意义??（Ｐ＜０．０５）。以上结果说明ＢＰＩ－１５０８６可诱导ＮＳＣＬＣ细胞发生Ｇ１／Ｇ０阻滞，Ｓ期??减少。??４．流式细胞术检测ＢＰＩ－１５０８６对三种细胞的细胞凋亡的影响??ＢＰＩ－１５０８６作用于Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５细胞２４ｈ后，电子显微镜下观察各组细??胞形态变化，如图４所示：细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，细胞??质密度增加，核质浓缩，部分胞膜有小泡状形成。??流式细胞仪检测结果显示ＢＰＩ１５０８６作用于各组细胞２４小时后
【参考文献】：
期刊论文
[1]靶向药物治疗的晚期肺癌患者引入中医养生理论主导护理策略的临床效果[J]. 赵小娟,姚俊,杨增华,李杰. 现代中西医结合杂志. 2019(03)
[2]53例肺癌放疗患者生存质量分析[J]. 李玲燕,袁萍. 解放军预防医学杂志. 2018(12)
[3]表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂对晚期伴随基因异常的表皮生长因子受体敏感突变的非小细胞肺癌患者的疗效[J]. 李佳旻,胡洁,白春学,张勇,徐晓波,王晓丹,丁宁. 中华结核和呼吸杂志. 2018 (10)
[4]第三代EGFR-TKI奥希替尼的耐药机制探讨及处理策略[J]. 袁媛,谷伟. 国际呼吸杂志. 2018 (18)
[5]奥希替尼联合抗血管生成靶向药对人肺腺癌细胞抑制作用的实验研究[J]. 刘洋,熊志成,孙鑫,马洁韬,孙丽,张树玲,孙婧,张晓诺,韩琤波. 现代肿瘤医学. 2018(19)
[6]PI3K/AKT信号通路与EGFR-TKIs治疗NSCLC耐药的相关性研究进展[J]. 李静,朱冰. 重庆医学. 2018(17)
[7]非小细胞肺癌中表皮生长因子受体（EGFR）复合突变与EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗敏感性研究[J]. 黄珊,刘迪. 中国临床药理学杂志. 2018(10)
[8]114例老年肺癌患者铂类药物疗效及不良反应分析[J]. 成舒乔,龚志成,尹桃,周伯庭,张赞玲,李湘平. 肿瘤药学. 2018(02)
[9]晚期非小细胞肺癌PD-1/PD-L1单抗治疗临床转化现状[J]. 张盼,张俊萍. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2018(04)
[10]晚期非小细胞肺癌EML4-ALK融合变异体与克唑替尼治疗的临床分析[J]. 张鹤,宋正波,吕镗烽,陆志伟,吴娟,宋勇. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2018(02)
硕士论文
[1]BPI-15086对EGFR-T790M作用机制的体外研究[D]. 张远建.皖南医学院 2018
本文编号：3093682
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５三种细胞ＥＧＦＲ突变基因检测结果??２１??
?表２?Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５细胞Ｅ－ｃａｄ在ＢＰ１－１５０８６作用下细胞周期分布的情况???ＢＰＩ１５０８６??Ａ５４９???ＰＣ９???Ｈ１９７５???（ｕｍｏｌ／１）?Ｇｌ／ＧＯ?Ｓ?Ｇ２／Ｍ?Ｇｌ／ＧＱ?Ｓ?Ｇ２／Ｍ?Ｇｌ／ＧＯ?Ｓ?Ｇ２／Ｍ??０?３６．９土２．４１?３１．９７土１．１０?３１．０７±２．３３?４５．３３土?１．７３?３９．４７±１．８３?１５．２０士?１．０４?５６．４５士１．６８?２１．６３士１．１５?２２．２士１．２４??５?４１．７士?１．１３?１３．７２±１．０４?４４．５４±２．０８?４９．７９±１．９１?１５．６０±１．９５?３５．９８±２．６２?６９．２３士２．４３?１４．２１?士０．９４?１６．６１?土０．９３??Ｐ?值?０．０３６?＜０．０１?＜０．０１?０．０４?＜０．０１?＜０．０１?＜０．０１?＜０．０１?＜０．０５??２３??
流式细胞仪检测结果显示ＢＰＩ１５０８６作用于Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５细胞２４ｈ后，??Ｇ０／Ｇ１期细胞比例均明显升高（Ｐ＜０．０５），?Ｓ期细胞比例明显减少（ＰＣ０．０５），提示提??示ＢＰＩ－１５０８６诱导细胞发生显著的Ｇ０／Ｇ１期周期阻滞（表２、图３）。??ＢＰｌ－１５０８６?５ｕｍｏｌ／ｌ作用于三种细胞２４小时以后，Ｇ１／Ｇ０期细胞占比升高（Ｐ??值＜０．０５），而且Ｓ期细胞比例降低（Ｐ＜０．０１）。各组细胞Ｇ１／Ｇ０期细胞不同程度??升高，且Ｈ１９７５细胞Ｇ１／Ｇ０阻滞较Ａ５４９、ＰＣ９细胞明显，差异有统计学意义??（Ｐ＜０．０５）。以上结果说明ＢＰＩ－１５０８６可诱导ＮＳＣＬＣ细胞发生Ｇ１／Ｇ０阻滞，Ｓ期??减少。??４．流式细胞术检测ＢＰＩ－１５０８６对三种细胞的细胞凋亡的影响??ＢＰＩ－１５０８６作用于Ａ５４９、ＰＣ９、Ｈ１９７５细胞２４ｈ后，电子显微镜下观察各组细??胞形态变化，如图４所示：细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，细胞??质密度增加，核质浓缩，部分胞膜有小泡状形成。??流式细胞仪检测结果显示ＢＰＩ１５０８６作用于各组细胞２４小时后
【参考文献】：
期刊论文
[1]靶向药物治疗的晚期肺癌患者引入中医养生理论主导护理策略的临床效果[J]. 赵小娟,姚俊,杨增华,李杰. 现代中西医结合杂志. 2019(03)
[2]53例肺癌放疗患者生存质量分析[J]. 李玲燕,袁萍. 解放军预防医学杂志. 2018(12)
[3]表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂对晚期伴随基因异常的表皮生长因子受体敏感突变的非小细胞肺癌患者的疗效[J]. 李佳旻,胡洁,白春学,张勇,徐晓波,王晓丹,丁宁. 中华结核和呼吸杂志. 2018 (10)
[4]第三代EGFR-TKI奥希替尼的耐药机制探讨及处理策略[J]. 袁媛,谷伟. 国际呼吸杂志. 2018 (18)
[5]奥希替尼联合抗血管生成靶向药对人肺腺癌细胞抑制作用的实验研究[J]. 刘洋,熊志成,孙鑫,马洁韬,孙丽,张树玲,孙婧,张晓诺,韩琤波. 现代肿瘤医学. 2018(19)
[6]PI3K/AKT信号通路与EGFR-TKIs治疗NSCLC耐药的相关性研究进展[J]. 李静,朱冰. 重庆医学. 2018(17)
[7]非小细胞肺癌中表皮生长因子受体（EGFR）复合突变与EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗敏感性研究[J]. 黄珊,刘迪. 中国临床药理学杂志. 2018(10)
[8]114例老年肺癌患者铂类药物疗效及不良反应分析[J]. 成舒乔,龚志成,尹桃,周伯庭,张赞玲,李湘平. 肿瘤药学. 2018(02)
[9]晚期非小细胞肺癌PD-1/PD-L1单抗治疗临床转化现状[J]. 张盼,张俊萍. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2018(04)
[10]晚期非小细胞肺癌EML4-ALK融合变异体与克唑替尼治疗的临床分析[J]. 张鹤,宋正波,吕镗烽,陆志伟,吴娟,宋勇. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2018(02)
硕士论文
[1]BPI-15086对EGFR-T790M作用机制的体外研究[D]. 张远建.皖南医学院 2018
本文编号：3093682
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3093682.html
