SP-1/3在前列腺癌细胞DU145和LNCaP中的表达水平及对PP2A-Aα的调控作用

发布时间：2021-04-06 22:15

　　蛋白磷酸酶PP2A是丝/苏氨酸特异性磷酸酶的主要成员,在真核生物中占到50%以上的丝/苏氨酸磷酸酶活性。PP2A的核心酶由36kDa的催化亚基C和65kDa的结构亚基A构成,另外与各种不同的调节亚基B共同组成了全酶复合体。PP2A全酶复合体结构的复杂为其PP2A功能的复杂奠定了基础。PP2A在细胞代谢中具有非常重要的作用,其中包括:细胞周期的调控,细胞增殖与凋亡,生物个体发育,细胞迁移,细胞骨架的动态平衡,信号通路的调节,目前的研究表明,PP2A是重要的肿瘤抑制基因。之前有关PP2A在前列腺癌发生中的作用的研究都集中在催化亚基和调节亚基上,而有关PP2A结构亚基与前列腺癌发生的相关研究处于空白状态。鉴于此种情况,我们实验室比较研究了前列腺癌细胞LNCaP和DU145中结构亚基的表达水平,结果表明PP2A-A?在DU145中的表达显著下降。此外,我们实验室的研究证明,CREB是调节PP2A-A?表达的重要转录因子之一。通过对CREB在前列腺癌LNCa P和DU145细胞中的表达比较分析,我们发现对A?表达起重要正向调节的转录因子CREB的表达在DU145细胞中也明显下调。除了CREB能对... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 蛋白磷酸酶 2A （protein phosphatase 2A，PP2A）
        1.1 PP2A的结构
        1.2 PP2A 的功能
    2 转录因子Sp1
        2.1 Sp1的结构
        2.2 Spl与细胞凋亡
        2.3 Spl在肿瘤中的作用
    3 转录因子Sp3
        3.1 Sp3的结构
        3.2 Sp3功能
    4 本课题研究背景
第二章 实验材料和方法
    1 实验材料与试剂
        1.1 材料
        1.2 试剂
        1.3 仪器设备
    2 实验方法
        2.1 LNCaP和DU145细胞的培养
        2.2 Western blot检测LNCaP和DU145细胞中Sp1/3 与PP2A的表达水平
        2.3 过表达Sp1/Sp3的DU145和LNCaP细胞系的建立
        2.4 特异性siRNA对Sp1和Sp3进行敲低
        2.5 凝胶迁移滞后（EMSA）分析 DU145 和 LNCa P 细胞核蛋白中 Sp1和 Sp3 转录因子与 PP2A-Aα基因启动子序列的体外相互作用
第三章 实验结果和讨论
    1 实验结果
        1.1 Western blot检测DU145和LNCaP细胞中Sp1/3 与PP2A-Aα的表达水平
        1.2 凝胶迁移滞后对LNCaP和DU145细胞核蛋白中Sp1和Sp3与PP2A-Aα启动子序列体外相互作用的分析
        1.3 在LNCaP细胞中，Sp1/Sp3转录因子对PP2A-Aα蛋白表达水平的调控作用
        1.4 在DU145细胞中，Sp1/Sp3转录因子对PP2A-Aα蛋白表达水平的调控作用
    2 讨论与展望
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]转录因子Sp1与肿瘤关系研究的新进展[J]. 白雪,邓红.  浙江大学学报(医学版). 2010(02)
[2]蛋白磷酸酶PP2A的结构及其肿瘤抑制因子功能[J]. 李天祝,向本琼.  生物化学与生物物理进展. 2009(02)
[3]Ser/Thr蛋白磷酸酶PPP家族结构研究新进展[J]. 王柏婧,魏群.  中国科学（C辑:生命科学）. 2008(07)
[4]Sp1和Sp3介导的转录调控[J]. 薛丽香,翁默,吴军峰,张宗玉,童坦君.  中国生物化学与分子生物学报. 2006(02)
[5]蛋白磷酸酶2A的结构、功能和活性调节[J]. 刘卫军,沈瑛,丁健.  生物化学与生物物理学报. 2003(02)



本文编号：3122250