美洛昔康通过抑制COX-2/PGE2/β-catenin信号通路发挥其抗肝癌细胞迁移的实验研究
发布时间：2021-04-13 00:53
目的在世界范围内,肝细胞肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是一种发病率及致死率均居于前列的实体恶性肿瘤,其具有病程进展迅速、发病隐匿的临床特点。手术切除是HCC的首选治疗方案,后期可联合应用经肝动脉介入栓塞化疗、射频消融术及口服分子靶向药物等。但是,HCC容易发生侵袭转移的生物学特性在一定程度上严重影响了其临床治疗的效果及患者的预期预后。因此,深入研究肝癌细胞的生物学特点及其潜在的分子机制对于充分认识HCC的临床发展过程、研究相关靶点药物及制定相应治疗方案具有重要意义。环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）在大多数体内正常细胞中处于不表达状态,或者仅是少量表达,不同于COX-1可在肾脏、胃等器官组织中的高表达。但是,IL-1、TNF-α、紫外线等炎症相关因子及促癌因素可以促进组织细胞中COX-2的蛋白或基因表达,进而参与体内的相关炎症反应或肿瘤的发生发展过程。大量的研究已经证实,在肝细胞肝癌、结肠癌、乳腺癌等多数的恶性实体肿瘤中,研究者均可检测到COX-2蛋白的高表达。在对其调控作用及分子机制的研究中发现,COX-2可以通过Akt等相...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１?ＣＯＸ－２选择性抑制剂Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ可降低肝癌细胞系中ＰＧＥ２的细胞外水平??－－－－
Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ处理组，肝癌细胞的迁移能力增加不明显，二者无明显统计学差异；??而比较于单独ＰＧＥ２处理组，细胞的迁移能力显著下降，表明Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ可在??一定程度上逆转外源性ＰＧＥ２促进肝癌细胞迁移的作用。（图４）??Ａ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＰＧＥ２?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ?Ｍｅｌ＋ＰＧＥ２??嚇資＾矜衣讀若巧客??黄键藻指也＇苗边＃??簿蔓：學淺Ｉ鮮藻巧麟Ｉ??巧黏起敏繞、古淺咬裤麵??Ｂ?ＨｅｐＧ２?ＳＭＭＣ－７７２１??２５〇ｉ?＊?。２扣１?荀＇??１?２。。－?６?！！。。－?Ａ??Ｉ?１５０－?－ｒ?Ｉ?ＩＳＯ－下??？５?１００－?ｗ＊?＊５?化０－??ｉ?＂?円■售５。－?产１幽??Ｚ?Ｊ?Ｕ——Ｕ＿Ｚ?〇Ｕ——Ｕ——ＬＪＢＬ??口?Ｃｏｎｔｒｏｌ?區１?Ｍｅｋｗｄｃａｍ?口?Ｃｏｎｔｒｏｌ?〇?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ??口?ＰＧＥ２?■?Ｍｅｌ＋ＰＧＥＺ?口?ＰＧＥ２?■?Ｍｅｌ＋ＰＧＥ２??图４?ＰＧＥ２介导Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ抑制细胞迁移的作用??ＨｅｐＧ２及ＳＭＭＣ－７７２１均设置为对照组，外源性？０６２处理组（１０?＾ｉＭ），Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ??处理組（８０＾ｌＭ），Ｍｅ］＋ＰＧＥ２处理组，Ｔｒａｎｓｗｅｌ］法检测肝癌细胞迁移能力变化（国４Ａ，??ｌＯＯＸ）。细胞迁移数目为随机５个视野下迁移细胞数目的平均值（图４?Ｂ）。??５．?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ通过ＣＯＸ－２／ＰＧＥ２途径调控巧癌细胞的迁移能力??我们前期研究所选细胞系均为高表达ＣＯＸ－２的巧癌细胞系，ＰＧＥ２作为??３３?
我们选取Ｃ０Ｘ－２的ｓｉＲＮＡ，分别转染ＨｅｐＧ２与ＳＭＭＣ－７巧１细胞系，??实验证实，Ｃ０Ｘ－２ｓｉＲＮＡ可显著降低上述两种细胞的转移能力（Ｐ＜０．０１），表??明ＣＯＸ－２／ＰＧＥ２在Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ调控肝癌细胞转移中的作用。（图５）??Ａ?Ｂ??Ｍｅｌ?（ｍＭ）?０?４０?８０?至?ｕ］?—?Ｓ?激ｍｉ??。ＪＳ??ＧＡＰＤＨ｜?呈?ｇｊ。去?｜?冉??一一???５。３＂?麵?Ａ?４?各??广＇…？Ｍ。＇．…＇職？＇＂＂＇＇＇＇．＇＇別＇＂＇＇…，ｉｍ？婦＂寒，?Ｓ?＊＊’?＊＊??ｆＳｋ?Ｉ?＇?ｍ??＾?０．０！?－??ＧＡＰＤＨ＾?ｊＮＳｊｌ?蓮ＩＭＰ?補｜１譲瞧２?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ?（ｐＭ）??ｃ??巧ａ?ＨｅｐＧ２??Ｉ?－?ＳＭＭＣ－７７２１??，，说＊?ＪＬ?＾?Ｊ１?Ｔ＿??Ｉ?ｎ圓?Ｉ??Ｉ?１００．?■圓??Ｉ?：］Ｉ．Ｈ，，，，，，，，［，１?站．??／／／??图５?ｃｏｘ－２介导Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ巧制巧癌细胞转移作用??ＨｅｐＧ２及ＳＭＭＣ－７７２１均设置为对照组与Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ处理组（４０＾Ｍ，８０｜ｉＭ），处理??２４ｈ，提取总蛋白，Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ法检测ＣＯＸ－２蛋白表达（留５Ａ）。ＷＧＡＤＰＨ作为内参??蛋白，Ｉｍ巧ｅＪ软件分析目的蛋白灰度值（图５Ｂ）。ＨｅｐＧ２及ＳＭＭＣ－７７２１均分别转染对??照ｓｉＲＮＡ及ＣＯＸ－２ｓｉＲＮＡ
本文编号：3134304
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１?ＣＯＸ－２选择性抑制剂Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ可降低肝癌细胞系中ＰＧＥ２的细胞外水平??－－－－
Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ处理组，肝癌细胞的迁移能力增加不明显，二者无明显统计学差异；??而比较于单独ＰＧＥ２处理组，细胞的迁移能力显著下降，表明Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ可在??一定程度上逆转外源性ＰＧＥ２促进肝癌细胞迁移的作用。（图４）??Ａ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＰＧＥ２?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ?Ｍｅｌ＋ＰＧＥ２??嚇資＾矜衣讀若巧客??黄键藻指也＇苗边＃??簿蔓：學淺Ｉ鮮藻巧麟Ｉ??巧黏起敏繞、古淺咬裤麵??Ｂ?ＨｅｐＧ２?ＳＭＭＣ－７７２１??２５〇ｉ?＊?。２扣１?荀＇??１?２。。－?６?！！。。－?Ａ??Ｉ?１５０－?－ｒ?Ｉ?ＩＳＯ－下??？５?１００－?ｗ＊?＊５?化０－??ｉ?＂?円■售５。－?产１幽??Ｚ?Ｊ?Ｕ——Ｕ＿Ｚ?〇Ｕ——Ｕ——ＬＪＢＬ??口?Ｃｏｎｔｒｏｌ?區１?Ｍｅｋｗｄｃａｍ?口?Ｃｏｎｔｒｏｌ?〇?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ??口?ＰＧＥ２?■?Ｍｅｌ＋ＰＧＥＺ?口?ＰＧＥ２?■?Ｍｅｌ＋ＰＧＥ２??图４?ＰＧＥ２介导Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ抑制细胞迁移的作用??ＨｅｐＧ２及ＳＭＭＣ－７７２１均设置为对照组，外源性？０６２处理组（１０?＾ｉＭ），Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ??处理組（８０＾ｌＭ），Ｍｅ］＋ＰＧＥ２处理组，Ｔｒａｎｓｗｅｌ］法检测肝癌细胞迁移能力变化（国４Ａ，??ｌＯＯＸ）。细胞迁移数目为随机５个视野下迁移细胞数目的平均值（图４?Ｂ）。??５．?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ通过ＣＯＸ－２／ＰＧＥ２途径调控巧癌细胞的迁移能力??我们前期研究所选细胞系均为高表达ＣＯＸ－２的巧癌细胞系，ＰＧＥ２作为??３３?
我们选取Ｃ０Ｘ－２的ｓｉＲＮＡ，分别转染ＨｅｐＧ２与ＳＭＭＣ－７巧１细胞系，??实验证实，Ｃ０Ｘ－２ｓｉＲＮＡ可显著降低上述两种细胞的转移能力（Ｐ＜０．０１），表??明ＣＯＸ－２／ＰＧＥ２在Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ调控肝癌细胞转移中的作用。（图５）??Ａ?Ｂ??Ｍｅｌ?（ｍＭ）?０?４０?８０?至?ｕ］?—?Ｓ?激ｍｉ??。ＪＳ??ＧＡＰＤＨ｜?呈?ｇｊ。去?｜?冉??一一???５。３＂?麵?Ａ?４?各??广＇…？Ｍ。＇．…＇職？＇＂＂＇＇＇＇．＇＇別＇＂＇＇…，ｉｍ？婦＂寒，?Ｓ?＊＊’?＊＊??ｆＳｋ?Ｉ?＇?ｍ??＾?０．０！?－??ＧＡＰＤＨ＾?ｊＮＳｊｌ?蓮ＩＭＰ?補｜１譲瞧２?Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ?（ｐＭ）??ｃ??巧ａ?ＨｅｐＧ２??Ｉ?－?ＳＭＭＣ－７７２１??，，说＊?ＪＬ?＾?Ｊ１?Ｔ＿??Ｉ?ｎ圓?Ｉ??Ｉ?１００．?■圓??Ｉ?：］Ｉ．Ｈ，，，，，，，，［，１?站．??／／／??图５?ｃｏｘ－２介导Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ巧制巧癌细胞转移作用??ＨｅｐＧ２及ＳＭＭＣ－７７２１均设置为对照组与Ｍｅｌｏｘｉｃａｍ处理组（４０＾Ｍ，８０｜ｉＭ），处理??２４ｈ，提取总蛋白，Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ法检测ＣＯＸ－２蛋白表达（留５Ａ）。ＷＧＡＤＰＨ作为内参??蛋白，Ｉｍ巧ｅＪ软件分析目的蛋白灰度值（图５Ｂ）。ＨｅｐＧ２及ＳＭＭＣ－７７２１均分别转染对??照ｓｉＲＮＡ及ＣＯＸ－２ｓｉＲＮＡ
本文编号：3134304
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3134304.html
